利用杆状病毒表达系统表达奶牛触珠蛋白及其单克隆抗体的制备

为了建立奶牛早期妊娠诊断检测方法,试验用GenBank公布的奶牛触珠蛋白(haptoglobin)Hp基因序列设计引物,扩增出Hp基因全长片段,将Hp基因亚克隆至Bac-to-Bac昆虫/杆状病毒表达系统的供体质粒pFastBacHTb的多克隆位点中,转入含昆虫杆状病毒骨架质粒的E.coli DH10Bac感受态细胞中,通过蓝白斑筛选获得穿梭质粒rBacmid-Hp阳性克隆,在脂质体介导下转染昆虫细胞sf_9,获得含Hp基因的重组杆状病毒质粒rBacmid-Hp;用纯化的rBacmid-Hp蛋白免疫Balb/c小鼠,将免疫小鼠的脾细胞和鼠SP2/0骨髓瘤细胞融合,采用间接ELISA法和有限稀释法筛选杂交瘤细胞;分别用ELISA法、Western-blot检测单克隆抗体腹水效价及特异性。结果表明:在sf_9细胞中成功表达Hp蛋白,该蛋白具有良好的生物学活性;制备了8株单克隆抗体,分别命名为3B_(12)、4F_4、4F_(11)、5D_7、5G_8、7E_5、10C_3和12F_9,腹水效价均在1∶5.12×10~4以上;亚类鉴定显示,除3B_(12)、4F_(11)、10C_3为IgG_(2a)外,其余单克隆抗体均属于IgG_1;筛选出1对配对单克隆抗体,分别为12F_9和4F_(11)。说明Hp蛋白可在Bac-to-Bac昆虫/杆状病毒表达系统中高效表达,并成功筛选出一对配对的高效单克隆抗体。     

动物铜中毒途径与防治策略

当机体摄入过量的铜,或是饲料中钼、硫、钙、锌等元素含量明显减少以及肝细胞受到损害之后,均易引起铜在体内特别是肝脏的大量蓄积,从而产生毒性作用,引发铜中毒。一、发病特点1.动物种类不同,敏感性不同。对铜的敏感性,反刍动物中以绵羊最敏感,牛次之。单胃动物对铜有较大的耐受量。2.动物年龄不同,敏感性不同。青年家畜比成年家畜对铜敏感。羔羊比成年羊敏感。3.动物遗传素质不同,敏感性     

乡土树种的开发和利用

乡土树种是农村防护和景观主要造林树种,随着新村的建设,村庄搬迁,土地复垦,乡土树种面临严重生存危机,如何开发和利用乡土树种意义重大。     

六盘水市牂牁江景区旅游资源调查与评价研究

该文在对六枝特区牂牁江景区的旅游资源进行充分了解的基础上,对其进行分析,得出了牂牁江旅游资源的结构和空间分布特征,以期对六枝特区牂牁江的旅游资源有一个全面、科学的认识,为地方政府在开发牂牁江景区时提供科学的依据,并为其他景区开发提供借鉴。     

协调各方关系是关键

<正>乡镇供电所日常工作为安全生产、营销管理、优质服务三个方面,从日常用户新装线路到配电网运行维护等,每天要面临的问题千头万绪,处理好各方面关系显得尤其重要。要当好一名合格所长,我认为应该做到:协调好上下级关系。供电所长要和公司领导及各部门协调好关系,在日常工作中,有问题要反映,应做到先向分管自己的领导请示和汇报。要分清哪些在自己职权范围内可以去做,哪些不可     

都市农业: 实现城乡统筹的新突破口

步入十二五时期,作为转变经济发展方式的重要内容,推进城乡统筹将是未来实现科学发展的关键。而将农业的生产、生活、生态等三生功能结合于一体的都市农业可以充分发挥桥梁作用,是解决城乡统筹问题的一个新突破口。