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抗菌肽(antibacterial peptides)是生物体内经诱导产生的一种具有生物活性的多肽,是天然免疫的重要组成部分.为了提高抗菌肽的表达量以及很方便地检测抗菌肽的表达情况,本研究利用口蹄疫病毒(Foot-and-mouth disease virus,FMDV) 2A将荧光蛋白dTomato基因和3个串联的MagaininⅡ基因融合到一个开放阅读框中(open reading frame,ORE),融合的基因被置于pPIC9K载体醇氧化酶基因(AOX1)启动子的下游,构建分泌型重组酵母表达载体pPIC9K-dTomato -2A-3M,将线性化的重组酵母表达载体通过电击法转入毕赤酵母(Pichia pastoris )GS115中,经G418筛选和PCR鉴定得到阳性转化子,然后将其转至摇瓶,在30℃、0.5%甲醇的条件下进行诱导表达,连续诱导3d.SDS-PAGE电泳图谱显示,在31 kD(dTomato)和9.5kD(3M)处有蛋白条带出现,在荧光显微镜下观察酵母表达上清发出红色荧光,对大肠杆菌(Escherichia coli)和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)抑菌试验结果表明,重组抗菌肽串联的MagaininⅡ具有明显的抑菌效果.结果表明,由2A连接的融合基因(荧光蛋白dTomato和串联的MagaininⅡ)在毕赤酵母中成功的进行了表达,FMDV 2A在其C端剪切多聚蛋白,得到dTomato和串联的MagaininⅡ两个独立而有活性的蛋白,为小分子抗菌肽的表达提供一个高效的检测方法. 相似文献
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育肥猪舍甲烷和氧化亚氮排放浓度检测 总被引:1,自引:0,他引:1
为探明通风与不同养殖模式情况下猪舍的温室气体浓度,该研究测定了6个不同养殖场育肥猪舍内的甲烷(CH4)和氧化亚氮(N2O)含量。结果表明:在采样月份,晚上不采取通风的养殖场与其他全天通风的养殖场相比,其CH4含量存在显著差异性(P<0.05),含量明显高于其他养殖场实验猪舍。在采样月份,采用生物发酵床养殖工艺的养殖场与传统养殖工艺的养殖场相比,其N2O含量存在显著差异性(P<0.05),含量明显高于其他养殖场实验猪舍,但其含量远小于堆同样粪便量产生的N2O的含量。说明通风以及不同养殖工艺与舍内温室气体的排放浓度有密切的关系,为进一步的改善猪舍空气质量提供依据。 相似文献
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依据北京市养猪业发展情况,选定3个区作为调研区域。在各区选择2家养殖工艺具有代表性的规模猪场,作为主要调研场。在正式开展调研之前,团队组织会议,经过充分研讨,编制调研表格。2011年4—6月,首次深入各猪场进行全面调研。根据调查结果,对调研表格进行修改,在9—11月再次进入这6家猪场进行第2次调查。通过调查,对6家猪场取得了有关猪场概况、养殖规模、猪舍环境、粪污处理方法、能源利用等全面的情况。同时,采集猪场的空气、粪便、污水样品,进行监测,掌握猪场环境控制和污染物处理情况。 相似文献
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碘醚柳胺脂质体定向剂是抗肝片吸虫药—碘醚柳胺的一种新剂型,为了探讨其是否对绵羊细胞免疫机能有影响,本试验将8只通过粪检为肝片吸虫病阳性的绵羊分为两组每组4只,试验组以0.3mg·kg~(-1)体重皮下注射碘醚柳胺脂质体定向剂,对照组以3mg·kg~(-1)体重皮下注射碘柳胺注射液,分别于用药前和用药一周后用 E-玫瑰花环形成试验对 T 细胞计数,并对用药前后的数据进行 t 检验。结果为:试验组用 相似文献
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[目的]介绍禽类艾美耳球虫生物学和免疫生物学的研究进展,减少其对养禽业造成的经济损失。[方法]从禽类球虫的生活史、遗传学、生物化学、种类鉴定和诊断、免疫生物学、球虫病的控制及未来发展方向和亟待解决的问题等方面,阐述了近年来的发展情况。[结果]禽类的艾美耳球虫的生活史包括有性生殖阶段和无性生殖阶段;球虫的生物学发育也比较清楚;在外界环境中进行孢子生殖;目前其种类主要为7类;在球虫感染的免疫学方面研究有很大进展;在了解以上生物学和免疫生物学的研究进展后,提出了防治措施。[结论]该研究为防治养禽业球虫病提供了依据。 相似文献
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【研究目的】提取沙门氏菌鞭毛蛋白并鉴定其抗原性;【方法】选用鸭沙门氏菌经半固体培养基诱导鞭毛,经肉汤培养后,用酸裂解、经差速离心、硫酸铵沉淀,分离出粗制鞭毛蛋白。将粗制的鞭毛蛋白用SDS-PAGE和磷钨酸负染投射电镜观察,并包板做ELISA检测其抗原性;【结果】SDS-PAGE显示提取的鞭毛蛋白相对分子质量约为58.0KD,且纯度较高,抗原性较好,每1000ml培养液可获得32.8mg鞭毛蛋白;【结论】酸裂解法可获得高质量的鞭毛蛋白,抗原性较好,为禽副伤寒沙门氏菌病诊断方法的建立奠定了基础。 相似文献
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猪疥螨病,是由猪疥螨(Sarcoptesscabiei)寄生于猪的表皮内引起的慢性皮肤病。该病各地广泛流行,患猪生长缓慢,皮张质量严重损伤,阻碍养猪业的发展,造成巨大的经济损失。为了寻求更好的诊断和防治方法,我们对辉县市任村养猪场的疥螨病猪(简称“患猪”)及河南职业技术师范学院实习猪场健康猪(简称“健猪”)进行了血像值的测定及分析,为临床诊断提供辅助依据。1材料和方法1.1动物“患猪”为27头5~12周龄长白猪,病变部位占体表面积的1/3以上,经实验室检查确诊为疥螨病;“健猪”为20头5~12同龄长白猪.经临床检查确认为健康… 相似文献
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单抗介导的银加强金标免疫技术检测传染性支气管炎病毒 总被引:1,自引:0,他引:1
利用胶体金标记纯化的羊抗鼠IgG,建立了一种银加强金标免疫技术(SECGA)检测IB抗原.检测抗原时先将抗原点样于硝酸纤维素膜(NCM)中央,封闭后浸于1:40 IBV单抗中作用10 min,洗涤后再浸于1:4金标羊抗鼠IgG液中作用1 h,银染10 min后观察,在膜上出现灰黑斑点的为阳性结果,反之,不出现斑点为阴性结果.SECGA对IB抗原最低检测量为0.703 ng/点(2 μL),对含毒尿囊液的最低检测量为102.9 EID50,检测IBV M41在鸡胚中繁殖时以36~54 h含毒量最高;检测SPF鸡气管粘液,至少于感染后3 d内检出病毒.结果表明,SECGA检测抗原可用于IBV早期诊断,具有群特异性、快速、敏感、简便,不需特殊设备、结果易判定等优点,尤适于基层实验室或现场应用. 相似文献
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为研究低致病性禽流感H9N2病毒感染鸡群的变化,用107.4 EID50/0.1 ml H9N2病毒,0.5ml/只,接种1月龄SPF鸡.结果5日后引起鸡群发病,并引起一些个体发生死亡,剖检发现喉头充血、肺淤血,气囊膜增厚.皮下胶样浸润、出血,腺胃乳头出血,十二指肠出血.肝、脾、肾、肺常见有灰黄色坏死灶.无菌取肺组织做细菌培养时发现在血平板上有灰白色露珠状菌落,挑取菌落做碱性美蓝染色镜检发现两极浓染的球杆状菌;经生化和PCR检验确认该菌属于多杀性巴氏杆菌.低致病性禽流感H9N2病毒感染鸡群可引起巴氏杆菌的内源性感染,从而导致鸡群的高发病率与高死亡率现象. 相似文献