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1.
中华鳖体液免疫应答的初步研究   总被引:16,自引:0,他引:16       下载免费PDF全文
不同季节用嗜水性单胞杆菌免疫中华鳖所产生的体液免疫应答有所不同。7-9月,抗体效价较高,免疫后第20d,效价为1:8,免疫后第30d,效价为1:64,第40do 1:128;而在冬春季免疫中华鳖后,均未检测到特异性抗体。对其进行了2次免疫后,也未见抗体水平升高。  相似文献
2.
利用淀粉胶电泳技术,对天鹅洲通江型故道青鱼(Mylopharyngodonpiceus)(60尾),草鱼(Ctenopharyngodonidelus)(40尾),鲢(Hypothalmichthysmolitreix)(40尾),鳙(Aristichthysnobilis)(40尾)的心、眼、脑、白肌、肝五种组织中LDH、MDH、G6PDH及EST四种同工酶进行分析,并对这几种酶的一系列基因座位作了比较和定位,以此分别计算青、草、鲢、鳙的种群遗传变异率,为构建通江型长江故道“四大家鱼”种质资源生态库提供重要依据。  相似文献
3.
中华鳖同工酶研究   总被引:11,自引:0,他引:11       下载免费PDF全文
采用垂直淀粉胶电泳对中华鳖脑、眼、心、肌、肝、肾和卵巢七种组织中的六种同工酶系统(LDH、ADH、IDH、ME、G6PDH、EST)进行研究,构建了中华鳖同工酶酶谱,并利用草鱼LDH-B4抗体对中华鳖LDH酶谱进行了免疫化学分析,确定了中华鳖LDH同工酶酶谱和亚基组成,揭示了鱼类LDH与爬行类LDH在进化上的保守性  相似文献
4.
鳙小卫星DNA的克隆   总被引:6,自引:2,他引:4       下载免费PDF全文
鳙基因组DNA 经内切酶Sau3AⅠ完全酶切后,与Bam HⅠ- pUC18 质粒连接,转化DH5α后,获得933 个重组体。用人源小卫星探针33 .15 对重组体进行原位杂交筛选,获得14 个阳性克隆,取其中的1 个阳性克隆( 即小卫星pBC174) 作探针,与5 尾鳙和4 尾鲢基因组DNA 杂交,能产生具有高度变异性的、个体特异性的DNA 指纹图,表明克隆的鳙小卫星pBC174 可用于鱼类DNA 指纹分析。  相似文献
5.
注射溶藻弧菌疫苗对南美白对虾免疫功能的影响   总被引:5,自引:0,他引:5  
应用溶藻弧菌疫苗注射南美白对虾,测定了弧菌疫苗对南美白对虾免疫指标的影响以及疫苗的免疫保护作用。结果表明,注射溶藻弧菌疫苗后,血清凝集效价增强,24 h时活力达到最高值,尤其是1.08×108cell/ml组的凝集效价升高最明显,为对照组的6.0倍;在24 h时,3个试验组的凝集效价均明显高于对照组(P<0.05)。溶菌活力注射后6 h即达到最高值,1.08×107、1.08×108cell/ml组的溶菌活力明显高于对照组(P<0.05)。抗菌活力在注射后3 h时最高,明显高于对照组。溶血活力在注射疫苗后有所增强,注射后6 h时1.08×106、1.08×107cell/ml组的活力达到最高,而1.08×108cell/ml组12 h时活力达到峰值。注射疫苗对血清超氧化物歧化酶活力基本没有影响。1.08×106、1.08×107、1.08×108cell/ml对南美白对虾的免疫保护率分别为46.3%、61.0%和75.6%。  相似文献
6.
红笛鲷头肾消减cDNA文库的构建与分析   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
应用抑制性消减杂交技术(SSH)构建红笛鲷(Lutjanus sanguineus)头肾消减cDNA文库,筛选红笛鲷免疫相关基因的EST.以哈氏弧菌(Vibrio harveyi)灭活疫苗体内诱导红笛鲷为实验组,以注射无菌生理盐水的红笛鲷为驱动组,通过SSH技术构建红笛鲷头肾消减.DNA文库.利用PCR技术和斑点杂交对文库进行筛选,从2 424个含插人片段的阳性克隆中筛选了680个克隆在上海生工进行了序列测定.使用BLASTx和BLASTn工具对获得的ESTs与GenBank数据库进行同源性比较并根据相似性序列的名称通过GO法对ESTs进行注释.结果获得了30个与红笛鲷免免疫防御相关基因的EST,如组织相容性抗原复合物基因(MHC I和MHCII),免疫球蛋白基因(IgH和IgL)、热休克蛋白基因(HSP10,HSP70和HSP90)等.本研究构建了哈氏弧菌灭活疫苗免疫后与正常组织差异表达的消减cDNA文库,并获得一批与红笛鲷免疫防御相关的ESTs,旨在为探讨红笛鲷分子免疫防御机制、筛选参与免疫防御调控相关的功能基因,揭示红笛鲷免疫抗病机制、提高机体抗病力、实现遗传改良奠定基础.  相似文献
7.
龟鳖的防病机制   总被引:2,自引:0,他引:2       下载免费PDF全文
龟鳖的防病机制Disease-preventingmechanismofTestudineandTrionyx简纪常(中国水产科学研究院淡水渔业研究中心,无锡214081)JianJichang(FreshwaterFisheriesResearch...  相似文献
8.
S-腺苷同型半胱氨酸水解酶(S-adenosyl-L-homocysteine hydrolase,SAHH)是一种细胞内广泛存在的酶,在调节生物体转甲基化反应中占据重要地位.本研究通过RT-PCR及RACE-PCR技术克隆了南极冰藻(Ch lamydomonassp.ICE-L)S-腺苷同型半胱氨酸水解酶全序列,命名为ICE-LSAHH.ICE-LSAHH全长1844 bp,包括5’非编码区36 bp,3 ’非编码区344 bp,含有一个较长的poly(A)尾.开放阅读框1461bp,编码487个氨基酸.根据推导的氨基酸序列预测其分子量为53.0 kD,理论等电点为5.16.SignalP 3.0、TMHMM Server v.2.0、NetNGlyc l.0和NetPhos2.0预测结果显示,ICE-LSAHH蛋白不存在信号肽与跨膜区,含有1个N-糖基化位点及23个磷酸化位点.利用ClastalX 2.0及MEGA 5.0软件,以邻位相连法对南极冰藻及其他物种SAHH构建系统进化树,结果显示,ICE-LSAHH与杜氏盐藻(Dunaliella salina)、莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)、小球藻(Chlorella variabilis)等有较近亲缘关系.利用SWISS-MODEL程序和PyMOL Viewer软件成功模拟了ICE-LSAHH蛋白亚基的三维结构,该结构包括20个α-螺旋和12个β-折叠,且存在3个结构域:N端底物结合域、NAD结合域和C端域.可见,SAHH基因存在于南极冰藻并进行了有效的表达,该蛋白定位于细胞质,进一步证实SAHH是一个进化上比较保守的蛋白.  相似文献
9.
本研究采用蛋白质组学技术,建立了溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)ZJ03培养至稳定期的蛋白质组双向电泳图谱,并对部分蛋白分子进行了肽质量指纹图谱分析鉴定.首先将溶藻弧菌接种子TSB培养基28℃培养24 h,利用裂解液裂解细菌,提取全菌可溶性蛋白,荧光染料标记,24cm pH4~7的胶条进行等电聚焦,再用12.5%的胶进行SDS-PAGE.2-D胶经过分析,得到902±8个蛋白斑点,重复胶的匹配点数为866±28,匹配率为96%.从双向电泳图谱中选取68个高丰度蛋白质点进行肽质量指纹图谱鉴定,其中60个在NMPDR数据库中得到鉴定,另外8个在NCBI数据库中得到鉴定.鉴定的蛋白中发现Serine protein kinase、purine nucleoside phosphorylase和Alkyl hydropemxide reductase subunit C-like protein存在修饰现象,它们在胶上均有2种表现形式.对68个蛋白进行了细胞功能的分类,发现能量代谢蛋白最多,占43%;其次是转运和结合蛋白,占9%;第三是外膜蛋白,占8%.经CMR操纵子预测软件分析预测到2个操纵子,它们均参与了能量代谢过程.研究结果为溶藻弧菌在不同生长条件下的比较蛋白质组学以及该菌强毒株和无毒株的比较研究提供了基础资料.  相似文献
10.
为了研究溶藻弧菌双组分调控系统KdpDE减毒活疫苗对鱼体的免疫保护作用,本研究采用Overlap PCR和同源重组技术,构建了kdpD/kdpE(kdpDE)基因无标记基因框内敲除突变株。对野生株和缺失突变株的生物学特性及致病性进行了比较研究,发现kdpDE的缺失对溶藻弧菌的生长速率和胞外蛋白酶活性的影响不明显,但是突变株的泳动能力、生物被膜形成能力较野生株下降。斑马鱼致病性实验结果显示,突变株毒力下降78.5倍,表明减毒株构建成功,可以作为减毒活疫苗的候选菌株。突变株在鱼体内存活能力实验结果显示,注射免疫7 d后,鱼体内不能检测到该菌。以突变株ΔkdpDE为抗原,分别用注射和浸泡的方式免疫斑马鱼,免疫后第28天用溶藻弧菌和哈维氏弧菌攻毒,评估该减毒活疫苗及不同免疫方式对斑马鱼的保护效果。实验结果表明,免疫后的斑马鱼能够抵抗溶藻弧菌的感染,其中注射免疫组的免疫保护率达83.3%,浸泡免疫组次之(66.7%);同时,该减毒活疫苗能刺激斑马鱼对哈维氏弧菌产生交叉保护效应,其中注射免疫组的免疫保护率为65.5%,浸泡免疫组为55.2%。以上结果表明,kdpDE基因敲除突变株可能是抵抗溶藻弧菌感染的有效的候选减毒活疫苗。  相似文献
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