黑褐新糠虾血细胞形态及其与日本新糠虾对溶藻弧菌敏感性的比较

实验采用Giemsa与Wright' s两种染色方法对黑褐新糠虾血细胞进行染色,根据血细胞大小,所含颗粒与否,颗粒多少和核质比将其分型,并对各型血细胞所占比例进行统计.结果表明,通过比较Giemsa染色与Wright's染色两种方法的染色时间和效果,Wright's染色更加适合糠虾血细胞.通过染色,将黑褐新糠虾血细胞分为3种类型,它们分别为透明细胞、半颗粒细胞和颗粒细胞.它们的胞体大小依次增大,核质比依次降低.对此3种类型血细胞比例分别统计后发现,颗粒细胞所占比例最多约( 48.38％±0.05％),其次是半颗粒细胞约为(35.22％±0.04％),最少的为透明细胞约为(16.40％±0.01％).对不同浓度溶藻弧菌的感染试验发现,日本新糠虾在较短的时间内出现死亡,即48h,而黑褐新糠虾72 h出现死亡,各浓度组中日本新糠虾死亡率均高于黑褐新糠虾.黑褐新糠虾相对日本新糠虾来说,对溶藻弧菌具有较低的敏感性,可能与其血细胞中颗粒和半颗粒比例较高有关.     

溶藻细菌的分离及溶藻特性研究

从爆发蓝藻水华的鱼池采集水样,以铜绿微囊藻为对象进行溶藻细菌筛选,得到R1、R2、R3、R5、R6、R8和R9共7株溶藻细菌,生理生化特征初步鉴定R5为海鱼弧菌,另6株为非发酵型细菌.R1、R3、R5、R8和R9细菌含量为105～108 cfu/ml时,对微囊藻的抑制率很高,效果优于R2和R6.对R1、R3、R5和R9...     

千金对河蟹幼蟹生长的影响及其在体内的蓄积

设定急性（96 h）和慢性（40 d）试验,以初步探讨千金对河蟹幼蟹生长的影响,用高效液相色谱测定千金 在河蟹体内的蓄积,并在急性试验中间隔12 h测定千金在水中96 h内的浓度变化,计算其降解率。结果表明,急性 试验中（千金浓度分别为11、5.5、2.8 滋g/mL）,随着水体中千金浓度的升高,幼蟹死亡率呈上升趋势;在最高浓度（11 滋g/mL）组,河蟹幼蟹死亡率最高、为33.33%,与其他两组有显著性差异。慢性试验中（千金浓度分别为1.10、0.54、 0.22 滋g/mL）,不同浓度千金浸泡对幼蟹的重量、死亡率、蜕壳率和平均蜕壳天数均未产生明显影响。在急性和慢性试 验中,千金在肝胰腺中含量均为最高,其最高蓄积量（在最高千金浓度组）为8.61 滋g/g,与其他各组间有显著性差异。 浓度分别为11、5.5、2.8 滋g/mL 的千金在水中降解速度很快,48 h内的降解率分别为83.91%、68.73%和53.09%,48 h 后降解率增加明显变缓。结合急性和慢性试验的结果表明,千金不会导致河蟹大量死亡,不会对河蟹的蜕壳与生长 产生明显影响,并且千金在河蟹体内并没有大量蓄积。     

两种常见淡水鱼在高温储存过程中挥发性盐基总氮和生物胺的含量变化

实验检测了条和红鳍红鲌在30℃下贮存48 h内每隔6 h的挥发性盐基总氮(TVBN)和9种生物胺(尸胺、腐胺、组胺、酪胺、5-羟色胺、亚精胺、精胺、多巴胺和章鱼胺)含量的变化,并对TVBN和生物胺含量与时间的相关性进行分析,以期为淡水水产品类饵料安全投喂和人类食品安全提供基础资料。结果显示,两种鱼在相同贮存条件下TVBN和生物胺含量均存在一定差异。其中,TVBN含量均随着贮存时间的延长而逐渐增加且与时间存在明显的相关性。红鳍红鲌除在42 h时TVBN含量低于■条外,其他时间均高于■条。在30℃贮存下,■条和红鳍红鲌的TVBN含量均在12 h时超过30 mg/100 g,因此,这两种鱼在12 h后不推荐食用。尸胺、腐胺、酪胺和组胺是这两种鱼主要的生物胺类型,且有随贮存时间延长含量显著增高的趋势,并与时间呈显著性相关,可推荐用于评价此两种水产品食用安全的生物胺类型。除此之外,在可测到的生物胺中,红鳍红鲌的尸胺和组胺含量明显高于■条,且红鳍红鲌体内的5-羟色胺与时间也呈显著性相关。     

不同药物处理及不同开口饵料对金波子鱼受精卵孵化和稚鱼存活的影响

以金波子鱼(Papiliochromis ramirezi)为对象,研究3种药物制剂(复方五倍子煎剂、庆大霉素、呋喃西林)对金波子鱼受精卵孵化率的影响以及3种开口饵料(蛋黄粉、草履虫和人工超微粉料)对金波子稚苗存活率的影响。结果表明,添加复方五倍子组孵化率最高,达到了(81.22±6.52)%,显著高于其余两组(P0.05),且未发现畸形稚苗。因此,在金波子受精卵孵化时添加复方五倍子可显著提高孵化率。使用人工超微粉料作开口饵料的小组稚苗7 d存活率最高,达到(91.33±3.06)%,显著高于其余两组(P0.05)。因此,人工超微粉料较适合作为金波子稚苗的开口饵料。     

草甘膦对中华绒螯蟹成蟹主要免疫指标的影响

草甘膦作为广谱灭生性除草剂,目前在我国已被广泛使用。但养殖水体用药对于水生动物,特别是经济类甲壳动物的影响却鲜有报道。因此,通过测定分别在草甘膦0、1.90、4.10、6.30、8.50、10.70 mg/L浓度下,中华绒螯蟹成蟹总血细胞密度(THC)、血清中血蓝蛋白含量、酚氧化酶(PO)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性以及碱性磷酸酶(AKP)活性5项重要免疫指标的变化情况,研究草甘膦对于中华绒螯蟹成蟹免疫功能的影响。结果表明,中华绒螯蟹成蟹对草甘膦耐受力强于幼蟹,10.70 mg/L组48 h死亡率仅有13.3%。草甘膦各浓度组THC在试验过程中均有上升,其中8.50 mg/L组上升幅度最大,并于6 h达到峰值,显著高于空白组;而10.70 mg/L组在24 h后有所下降,至48 h显著低于其他5组。血清中血蓝蛋白含量出现明显下降,且随着浓度增高下降越明显,其中8.50 mg/L组至12 h降至最低水平。PO活性各组均有所上升,随后回落;10.70 mg/L组上升最为明显,3 h升至最高值,显著高于其他各组。ACP活性低浓度组出现略微上升,而高浓度组出现下降;AKP活性则各浓度组均出现下降,且随着浓度升高愈加明显。上述结果表明,草甘膦可以显著影响中华绒螯蟹免疫指标,且随着浓度升高影响越为明显。在非致死浓度下,草甘膦可以引起中华绒螯蟹免疫应激,部分免疫功能下降。因此,建议草甘膦在中华绒螯蟹养殖水体中应避免使用。     

溴氰菊酯对中华绒螯蟹血细胞DNA的损伤

为研究溴氰菊酯对中华绒螯蟹的遗传毒性作用,将中华绒螯蟹分为5组进行半静水毒性试验,分别为0μg/L的空白对照组,只添加丙酮的溶剂对照组,以及0.10、0.20、0.40μg/L的溴氰菊酯质量浓度试验组。通过彗星检测的方法,分别测定溴氰菊酯暴露1、2、4、8、12d后中华绒螯蟹血细胞拖尾率及Olive尾距(OTM值)。结果显示,溶剂组在各时间点拖尾率及Olive尾距均同对照组无显著差异(P0.05),表明溶剂丙酮并非造成中华绒螯蟹血细胞DNA损伤的原因。溴氰菊酯对中华绒螯蟹血细胞有较强的DNA损伤作用,1d后0.20μg/L和0.40μg/L组拖尾率和Olive尾距均显著高于对照组(P0.05),此后3个质量浓度组在各时间点均极显著高于对照组(P0.01),至12d后仍未恢复。拖尾率和Olive尾距随着暴露时间增加而上升,呈现明显的时间效应和剂量效应,表明其可以作为评估溴氰菊酯对中华绒螯蟹遗传毒性的敏感指标。     

溴氰菊酯对中华绒螯蟹主要免疫指标的影响

为揭示溴氰菊酯对中华绒螯蟹免疫功能的影响,测定了在不同浓度溴氰菊酯(0、0.19、0.30、0.41、0.52μg/L)条件下中华绒螯蟹总血细胞数量(THC)、吞噬活性、酚氧化酶(PO)活性、酸性磷酸酶(ACP)活性和碱性磷酸酶(AKP)活性5项主要免疫指标的变化情况。结果表明,溴氰菊酯对中华绒螯蟹免疫有显著影响,低浓度处理(0.19、0.30μg/L)引起THC药后6 h和12 h出现极显著上升,随后逐渐恢复;而高浓度处理(0.41、0.52μg/L)则在药后24 h后持续下降,药后96 h极显著低于对照。各浓度处理均对血细胞吞噬活性有抑制效应,且随着浓度升高抑制效果越强。0.52μg/L处理PO活性药后6 h出现极显著上升,随后逐渐下降,药后96 h处理间无显著差异;而ACP活性、AKP活性药后6 h出现明显下降,各时间段均极显著低于对照。     

色氨酸羟化酶在中华绒螯蟹中肠、肠球和后肠组织中的分布和定位

5-羟色胺(5-hydroxytryptamine,5-HT)存在于各种动物的消化道中,并影响甲壳动物的生长和繁殖。色氨酸羟化酶是5-HT生物合成中的限速酶,可作为5-HT免疫活性细胞的特异标志。运用组织学和免疫组织化学技术对中华绒鳌蟹中肠、肠球和后肠的形态学及色氨酸羟化酶在其中的分布进行研究,结果显示:中华绒螯蟹肠道中肠和后肠组织结构组成基本相似,均由黏膜层、黏膜下层、肌层和外膜四部分组成。然而,肠球外膜非常发达,由结缔组织组成。其余组织形态一部分与中肠相似(近头端),另一部分与后肠相似(近尾端)。色氨酸羟化酶在中华绒螯蟹中肠、肠球和后肠均有分布,阳性物质呈棕褐色。在中肠,主要分布在黏膜上皮细胞的胞核中;在肠球,主要分布在近中肠端黏膜上皮细胞的胞核中、近后肠端的黏膜上皮细胞的胞浆中、以及外周结缔组织中;在后肠,主要分布在黏膜上皮细胞的胞浆中。为进一步了解5-HT在甲壳动物消化道中的生理调节机制奠定了基础。     

中华绒螯蟹的血细胞组成、分类及免疫学功能

为了解中华绒螯蟹血细胞组成、分类及其在免疫应答过程中起到的重要作用,本研究通过细胞化学和细胞酶学分析,并结合细胞形态观察,对中华绒螯蟹血细胞的组成、分类进行了研究。同时,通过人工感染嗜水气单胞菌后血液的总血细胞数(THC)和不同类型血细胞数(DHC)的变化,研究不同类型血细胞在免疫应答过程中所发挥的作用。结果显示,依据本实验分类方法,中华绒螯蟹血细胞可以分为4类:大颗粒细胞(G)、中间型颗粒细胞(IG)、小颗粒细胞(SG)和透明细胞(H)。其中小颗粒细胞数量最多,约占33.54%±0.98%,中间型颗粒细胞最少,仅占15.31%±2.01%。4种类型细胞中均含有多糖成分而不含脂质,只有大颗粒细胞在酸性磷酸酶、碱性磷酸酶、β-葡萄糖醛酸酶以及酚氧化酶染色中发现阳性反应。此外,嗜水气单胞菌感染后中华绒螯蟹总血细胞数在3 h后明显升高,在6 h达到峰值,约9.57×106个/m L,并显著高于未处理组和生理组;在感染过程中,大颗粒细胞数量明显下降而透明细胞数量明显上升,这种现象在6 h时达到顶峰并随着时间延长而逐渐恢复至正常水平。研究表明,在中华绒螯蟹非特异性免疫应答过程中,透明细胞主要通过大量增殖执行吞噬功能来参与免疫应答,而大颗粒细胞主要通过裂解释放胞质中所含免疫相关酶参与免疫反应。其中,各类型细胞之间可能存在相互转化作用,而中间型颗粒细胞为这种转化中的过渡类型。