细叶连翘的组织培养与快速繁殖

[目的]研究细叶连翘组织培养与无性快繁技术。[方法]以细叶连翘的茎及茎尖为外植体，以MS为基本培养基，添加不同浓度的6-BA和IBA，配制不同的培养基，对细叶连翘试管苗进行分化与诱导、增殖与生根培养试验，并对试管苗进行炼苗与移栽。[结果]经分化与诱导培养后的无毒茎尖分化苗接种到增殖培养基中，10d后分化出丛生芽，20d后苗高3～4cm，将3～4cm的丛生苗转入生根培养基中，7d后有不定根形成，20d后丛生苗生根率达100％，根长2～3cm的幼苗经炼苗和移栽后，成活率可达98％。[结论]获得了细叶连翘茎尖培养的启动培养基（MS＋6-BA0．5mg／L＋IBA0．2mg／L）、增殖培养基（MS＋6-BA1．5mg／L＋IBA0．2mg／L）和生根培养基（1／2MS＋IBA0．5ms／L），建立了细叶连翘的组织培养与快速繁殖体系。     

甘草悬浮培养细胞与甘草草药、植株中甘草酸的检测

采用不同的萃取剂从甘草的根、茎、叶、草药和甘草悬浮培养细胞中萃取甘草酸。结果表明,选择含氨0.5%、浓度为10%的乙醇溶液作为萃取剂,萃取得到的甘草酸粗品含量均高于50%乙醇萃取的萃取含量,检测出在优选甘草悬浮培养细胞中所含的甘草酸铵的含量高于其他材料,其中通过细胞悬浮培养,获得的甘草酸铵含量最高可达160.81 mg/g。     

不同植物激素对冬凌草愈伤组织增殖及褐化的影响

研究了不同种类的植物激素对冬凌草叶片诱导愈伤组织及褐化的影响,结果表明:培养基中植物激素的种类、浓度及其组合对愈伤组织增殖及褐变影响较大。适宜浓度的2,4-D、IAA和NAA生长素、KT和6-BA细胞分裂素及GA3,能不同程度地减轻或抑制褐化,促进愈伤组织的生长,其中以2,4-D(2.5) KT(0.2) GA3(0.2)效果最好。     

冬凌草的组织培养与快速繁殖

以冬凌草的茎和茎尖为外殖体,在启动培养基MS+6-BA1mg/L(单位下同)+NAA0.1,增殖培养基MS+6-BA2.0+NAA0.1,生根培养基1/2MS+IBA0.3上,成功地实现了组织培养和快速繁殖。     

同核异质玉米幼胚的离体培养

本研究选用7对同核异质玉米,进行了幼胚离体培养。研究结果表明:C 细胞质玉米的愈伤组织诱导率明显低于其正常(N)细胞质的保持系。而在同核条件下不同细胞质对愈伤组织的生长速率没有明显影响,但对愈伤组织分化频率影响较大。     

火鹤的组织培养和快速繁殖

对火鹤在不同的生长素,细胞分裂素组合条件下的生长,分化进行试验,选择出火鹤高效增殖,继代,生根的快繁体系,其中ＭＳ＋６－ＢＡ１．０ｍｇ／ｋｇ＋ＩＢＡ０．１ｍｇ／ｋｇ继代增殖最佳,１／２ＭＳ＋ＩＢＡ０．５ｍｇ／ｋｇ生根效果最好。     

小麦VP基因的克隆、生物信息学分析及功能初探

为研究小麦液泡膜H~+转运无机焦磷酸酶基因VP在植物中的作用,根据大麦、水稻等植物VP基因序列设计简并引物,用RACE法扩增小麦VP基因全长,对VP蛋白进行生物信息学分析,构建VP基因植物表达载体,转化拟南芥,对阳性转基因纯合体株系进行筛选和耐盐性鉴定。结果表明,小麦VP基因编码区序列全长2 286 bp,共编码761个氨基酸,等电点为5.17。VP蛋白为无信号肽的疏水性蛋白,主要含α螺旋。转VP基因拟南芥在NaCl胁迫下的萌发率、绿苗率均高于野生型拟南芥,成苗生长状态优于野生型拟南芥,说明小麦VP基因提高了转基因拟南芥的耐盐性。     

抗旱基因8981转化‘吉粳88’的研究

以‘吉粳88’成熟胚为外植体,用农杆菌介导法转入抗旱基因8981,对转化过程中愈伤组织的诱导、转化、筛选等条件进行研究,建立一个稳定、高效的农杆菌介导的遗传转化体系,并对获得的转基因植株进行PCR鉴定、除草剂抗性检测和抗旱性鉴定分析。结果表明:‘吉粳88’在诱导愈伤的过程中,不需要切芽;当菌液浓度OD600=0.2,浸染时间为20min时,转化效率最高且效果最好;在筛选培养前,需要经过恢复培养。PCR检测证明8981基因已整合到‘吉粳88’基因组中,抗性检测发现转基因植株对除草剂和PEG胁迫都有一定的抗性。     

植物生长物质对冬凌草愈伤组织生长及褐化的影响

研究了不同种类植物生长物质对冬凌草愈伤组织生长及褐化的影响,结果表明:培养基中植物生长物质的种类、浓度及其组合对愈伤组织生长及褐变起着重要的作用;适宜浓度的生长素(2,4!D、NAA和IBA)、细胞分裂素(6!BA和KT)、GA3能不同程度地促进愈伤组织的生长,减轻或抑制褐化作用,其中以2 mg/L2,4!D+0.2 mg/LKT+0.5 mg/LGA3效果最好。     

生长调节物质对黑果腺肋花楸试管苗增殖和生根的影响

研究了不同种类植物生长调节物质对黑果腺肋花楸试管苗增殖和生根的影响,结果表明:KT对黑果腺肋花楸试管苗的增殖无效果;MS+0.5 mg/L 6-BA+0.2 mg/L IBA对黑果腺肋花楸试管苗的增殖、继代培养效果最好;IBA的生根效果优于NAA,尤其是1/2 MS+0.4 mg/L IBA表现最好。