外源超氧物歧化酶基因转化巴西橡胶树的研究

本研究采用农杆菌侵染法成功实现玄参花叶病毒（FMV）34S启动子控制下的氧物歧化酶基因对巴西橡胶树（Hevea Brasiliensis Muell.Arg）的遗传转化。来自巴西橡胶无性系RRⅡ105未成熟花药的愈伤组织用含有双元质粒载体的根癌农杆菌菌株EHA 101进行转化。该双元载体带有用作选择标记的新霉素磷酸转移酶（nptⅡ）基因及β-葡糖醛酸酶（GUS）报告基因,同时含有带FMV 34S启动子的Mn-超氧物歧化酶（Mn-SOD）目的基因。试验中采用含4.5μM 2,4-D,2.2μM BAP,以及1.1μM NAA的MS培养基筛选并增殖抗卡那霉素的GUS阳性愈伤组织,并利用附加1.5μM BAP,1.4μM KIN,1.1μM NAA,以及2.0μM GA_3的MS培养基诱导高频体胚发生。用于胚胎成熟的培养基为附加1.2μM GA_3及1.5μM TDZ（噻苯隆）的改良MS培养基。试验结果显示,成熟的转化胚胎中有20%发育成小植株。这些小植株经健化之后被移植到营养袋中并置于温室中继续培育生长。最后,本研究通过用SOD及nptⅡ特异性引物作PCR扩增以及用nptⅡ特异性探针与分离自转化植株的DNA模板进行Southern杂交进一步证实了转化事件的发生。     

巴西橡胶树简单重复序列的鉴定及分离

本研究利用巴西橡胶树（Hevea brasiliensis）这一重要产胶植物的基因组文库进行了简单重复序列（SSRs），也即微卫星序列的分离鉴定。对来自无性系GT1的小插入基因组文库进行SSRs（AC/TG及CT/GA基序）筛选鉴定共获得154个克隆。采用载体通用引物及重复序列进行PCR扩增发现，其中114个为阳性克隆。限制性酶切分析结果显示，这些阳性克隆中有6个为重复拷贝，故予以剔除。之后，对剩余108个克隆中的50个进行了序列分析。此外，试验中对来自优良无性系RRII105的大插入基因组文库也进行了筛选。所获24个阳性克隆的测序结果也证实了橡胶基因组中微卫星序列的存在。经过最终的序列分析，本研究共鉴定出67个具有不同特点的简单及复合型微卫星序列，其中59个来自GT1，其余8个来自RRII105。所检测到的重复基序包括二核苷酸（TG/AC，AG/TC，TA/AT），三核苷酸（AAG，AGG，ATT），四核苷酸（GAAA，AAGG，ATCC，TAAA，AAAT），以及一个五核苷酸（GAAAT）。与其它作物的报道结果类似，在橡胶基因组中也观察到大量的CT/GA重复。     

巴西橡胶树的次生体细胞胚胎发生—— 一种新的长期性体细胞胚胎发生诱导方法

在橡胶树中，以未成熟种子的内珠被为外植体通过其胚性愈伤组织的继代增殖可以持续不断地诱导体细胞胚胎，该方法称为持久体细胞胚胎发生(Maintained Somatic Embryogenesis，MSE)。然而，直接利用内珠被组织诱导易碎型胚性愈伤组织系不但频率很低，而且迄今仅无性系PB260和RRIM703能够藉此途径实现体细胞胚胎的长期诱导。本研究以体细胞胚胎为外植体成功诱导和建立可增殖胚性愈伤组织系。组织学分析显示，体胚外植体切口边缘表皮及周维管细胞脱分化导致易碎型胚性愈伤组织的产生。所获愈伤组织经继代增殖和筛选最终得以建立胚性愈伤组织系。该新方法被称为间接次生体细胞胚胎发生(Indirect Secondary Somatic Embryogenesis，SSE)。我们还就体胚及内珠被2种外植体诱导胚性愈伤系的潜力进行了深入比较。结果表明，采用体胚外植体诱导胚性愈伤组织系其频率明显高于内珠被外植体。除了PB260和RRIM703之外，我们通过SSE途径还成功建立了无性系PB217的胚性愈伤组织系，而该无性系之前一直难以用MSE法获得其胚性愈伤系。此外，采用SSE法建立胚性愈伤系所需继代培养的次数也大为减少。对于不少仅实现初生体细胞胚胎发生的无性系而言，该方法无疑为其长期性体胚发生的诱导开辟了一条新的途径。     

微繁橡胶种植材料在大田试验中的生长及产量表现

摘要：一直以来，因无法得到自根无性系或砧木无性系使得橡胶树的选育种受到极大的限制和阻碍。法国国际农业研究与发展中心（CIRAD）自1980年代开始橡胶树离体培养研究，现已成功建立若干老态无性系的离体微繁体系，并培育出2类新型的种植材料，即自根无性系和芽接复壮无性系。自1989年以来，CIRAD相继在3个亚非国家建立了65 hm2大田试验区以期对这些新型种植材料在生长势及产量等方面的表现作出客观、科学的评价鉴定。鉴定分析结果显示，来自“初始愈伤体细胞胚胎发生” 的自根无性系以及来自微型扦插的芽接复壮无性系其生长势及产量表现均优于常规芽接无性系，而来自“保存愈伤体细胞胚胎发生” 的自根无性系其生长势及产量则显著差于常规芽接无性系。本文还就这些新型种植材料的应用前景作了进一步的讨论。     

巴西橡胶树几个苗期性状的选择及遗传增益

本研究以巴西橡胶树[Hevea brasiliensis（W-ilia．ex Adr．de Juss）Muell．-Arg．]20个3年生自由授粉后代群体为材料，对其包括产量在内的5个性状（即干胶产量、生长势、树皮厚度、乳管总列数和乳管13径）的遗传变异及选择效果进行了分析评估。试验地点设置在巴西圣保罗州平多拉马（Pindorama）的北部中心试验站。试验采用随机区组设计，重复4次，每小区种植10株。研究结果显示，不同后代群体之间在大多数性状上均存在极显著的遗传差异（p〈0．01）。产量、生势、树皮厚度、乳管总列数及乳管口径的基因型方差占各自表型方差的比例分别为13．2％、12．3％、9.4％、3．4％和0．23％，其单株遗传力（hi^2）则分别为37％、35％、69％、10％和16％。性状相关分析结果显示，产量与生势、树皮厚度及乳管总列数之间在基因型及表型上均呈极显著正相关。根据以上分析资料，当从20个后代群体中遴选出2个最优群体时，干胶产量及生势2个性状的遗传增益分别为12．3％和6．8％。若从每一后代群体中选出2个最佳的无性系母株，则该2个性状的遗传增益分别为27．7％和9．1％。经过以上2个步骤的选择，该2个性状的遗传增益可分别达到40％和16％。     

橡胶无性系早期选择中不同苗龄选择效果的比较及相关性研究

对68个橡胶无性系1-12树龄的茎围及产量性状进行相关分析的结果显示，第1-6树龄（苗期）和7-12树龄（成龄期）茎围，以及第7-12树龄胶乳产量间的基因型相关系数均达极显著水平。同时，不同树龄之间在苗期茎围（girth A），成龄期茎围（girth B），以及橡胶年产量（yield）上的等级相关系数也达到显著水平，并且该系数随树龄增大而减小。     

巴西橡胶树未成熟花药的体细胞胚胎发生及植株再生

以巴西橡胶树（Hevea brasiliensis Muell. Arg.）的未成熟花药为外植体成功实现高频体细胞胚胎发生及植株再生。筛选出的最佳愈伤组织诱导培养基为：改良MS+2,4-D 2.0 mg/L+KT 0.5 mg/L， 最佳体细胞胚胎诱导培养基则为：改良MS+KT 0.7 mg/L+NAA 0.2 mg/L。将成熟体胚转移至无激素培养基中可进一步发育出根、茎、叶完整的小植株。细胞学分析显示， 所有受检小植株均为二倍体。将长至2-3 cm高的小植株移栽到营养袋中并置于温室条件下育苗， 随后可定植到大田。     

香蕉试管苗生产的成本分析及其控制对策

本文结合我厂几年来的实践，从理论上就香蕉试管苗室内直接生产成本的核算方法及影响因素进行了探讨了分析，同时还就其控制对策提出了我们的看法和建议。     

巴西橡胶树胶乳基因表达

摘 要 　　天然橡胶（顺式-１，４-聚异戊二烯）是巴西橡胶树（Hevea brasiliensis Muell. Arg. ）乳管中合成的一种具有众多工业用途的高分子聚合物。就胶乳中的特异性或高丰度基因而言，它们在橡胶生物合成中可能起着十分重要的作用。     

印度部分巴西橡胶野生种质在生长早期的表现

1引言 为了满足未来天然橡胶工业的需求，目前的橡胶品种改良计划已将巴西橡胶树的野生种质列为最重要和最基本的种质材料之一。橡胶栽培种质的遗传基础极为狭窄，鉴于拓宽橡胶种质遗传基础的紧迫性及重要性，国际橡胶研究与发展委员会（IRRDB）于1981年组织了旨在重返巴西橡胶树的原产地，同时也是其多样性中心的巴西亚马孙河流域热带雨林采集野生橡胶种质的联合考察行动。