动物营养研究中有关消化与代谢概念的辨正

消化试验与代谢试验是动物营养研究中最常应用的方法,两种方法的原理和试验步骤都源自营养物质(与能量)在动物消化道与体组织内的转化过程。但近年国内一些研究报道(特别是禽方面)中,忽略了被吸收的有机养分分别汇集入碳代谢池与氮代谢池的事实,误认为能测出消化率的养分也能被测定代谢(利用)率。文章就此进行了讨论,以便有助于辨别有关研究中的正误,提高其科学性。     

禽类实验动物发展的影响因素及对策(二)——我国禽类实验动物发展存在的问题与对策

1 我国禽类实验动物发展中存在的问题 　　1.1 以SPF鸡为核心的禽类实验动物生产种源不足 　　SPF鸡为核心的禽类实验动物生产的核心是种源问题,我国实验动物科技工作者本着两条腿走路的原则,在引进SPF鸡种卵的同时,积极培育中国SPF鸡基础群,经过努力已有2家企业建立了中国SPF鸡基础群,但依然不能达到国内供种的能力,引种时,各SPF鸡场都是各自为政地从国外进口种卵.由于办理手续很繁琐,种卵到机场后往往不能按时提货,这就严重影响SPF鸡种卵的质量,而且种卵价格昂贵,每枚13～20美元不等,国外供种尚存在受国外疫情变化影响种源的风险.……     

新型抗生素替代品-重组抗菌剂类蛋白的研究

长期使用抗生素,尤其是人类常用抗生素会导致抗生素在畜产品中残留及细菌耐药性的产生。因此,生产者们迫切需要一种既有效又有利于环保的新的抗生素替代剂。抗菌肽和细胞因子由于具有多种活性越来越受到关注。文章主要介绍了抗菌肽和细胞因子重组蛋白表达与抗菌活性等研究进展,这两类重组蛋白有望成为新的饲料添加剂服务于养殖业。     

禽β-防御素的研究进展

已从鸡(Gallinacins)、火鸡(Gallopavin)和驼鸟(Ostricacin)的血液、鸡与火鸡的上皮细胞、以及企鹅(Sphenicins)的胃内容物中分离到多种禽β-防御素。综述了该类抗菌肽的分子特征、抗菌机理与应用前景。     

重组鸡β-防御素10蛋白的原核表达及其抗菌活性的测定

鸡抗菌肽属β-防御素类,在鸡的先天性免疫中发挥重要作用.本研究将克隆得到的鸡β-防御素-10基因(AvBD10).亚克隆到原核表达载体pGEX-6p-1中构建了重组表达质粒pGEX-AvBD10.将重组质粒转化至BL21,于37℃用IPTG诱导培养不同时间,SDS-PAGE电泳与灰度扫描显示该重组蛋白表达量占菌体总蛋白的34.3%.表达的AvBD10融合蛋白以包涵体的形式存在,分子量约为31 ku.重组蛋白经纯化后,以对数生长中期的大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽胞杆菌和猪霍乱沙门氏菌为检测菌,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定了重组鸡AvBD10蛋白的抗菌活性.结果显示.重组鸡AvBD10蛋白对大肠杆菌、多杀性巴氏杆菌、金黄色葡萄球菌、嗜酸乳杆菌、枯草芽胞杆菌有抗菌活性.此外,重组鸡AvBD10蛋白在70℃～100℃及在pH4～pH10条件下仍具有抗菌活性.     

重组鸡抗菌肽Gallinacin-9的原核表达及其抗菌活性的鉴定

采用RT—PCR方法,从鸡舌组织中扩增到Gallinacin-9（Gal-9）基因,测序表明Gal-9为201bp,其成熟肽由67个氨基酸残基组成。进一步将克隆的Gal-9基因亚克隆到大肠杆菌原核表达载体pGEX-6p-1的EcoR I和Sal I双酶切位点上,构建重组表达质粒pGEX—Gal-9,经序列分析鉴定确证目的基因克隆人载体的预期位点。将重组质粒转化大肠杆菌BL21,于37℃诱导培养不同时间,SDS-PAGE电泳表明该基因在大肠杆菌中高水平表达,表达的重组鸡Gab-9融合蛋白相对分子质量约为32ku。重组蛋白占菌体总蛋白的40％。表达的重组鸡Gal-9融合蛋白以包涵体的形式存在。重组蛋白经纯化后,分别以对数生长中期的大肠杆菌BL21（DE3-）株与致病性链球菌CAB株为检测菌,利用薄层平皿琼脂糖孔穴扩散法测定了重组Gal-9蛋白的抗菌活性,结果表明,重组Gal-9对这2种细菌都具有抗菌活性。     

人工感染鸭源新城疫病毒对绍鸭β-防御素和细胞因子基因表达的影响

试验旨在探讨人工感染鸭源新城疫病毒（Newcastle disease virus,NDV）对绍鸭β-防御素（avian β-defensins,AvBDs）和细胞因子基因表达的影响。选用45只20日龄SPF绍鸭,随机分为攻毒组（27只）和对照组（18只）,攻毒组采用滴鼻点眼的途径（10^8.38 EID₅₀）接种鸭源NDV强毒株（Md/CH/LGD/1/2005）,对照组接种磷酸盐缓冲液。在攻毒后24和48 h,从对照组及攻毒组各随机取6只鸭屠宰,分别采集肾脏、肺脏、气管、腺胃、骨髓、脾脏、盲肠扁桃体、哈德氏腺、法氏囊9个组织,运用实时荧光定量PCR法检测组织样品中9种AvBDs和细胞因子的表达量;剩余鸭每天持续观察,每隔4 d采血1次,直至24 d,检测血清抗体水平;于攻毒后24、48、72和120 h采集咽喉及泄殖腔拭子,以确定排毒周期。结果表明,感染该NDV毒株后,鸭没有临床发病症状和死亡情况发生;感染后鸭排毒开始于攻毒后第1天,到第5天停止,在攻毒组咽喉及泄殖腔拭子中均检测到NDV。抗体水平检测结果显示,该NDV能够诱导鸭体内产生抗NDV特异抗体。实时荧光定量PCR结果发现,与对照组相比,感染后24 h,部分鸭组织中AvBD1、AvBD2、AvBD5、AvBD6、AvBD9和AvBD16表达量均显著升高（P<0.05）;感染后48 h,AvBD1和AvBD6在部分鸭组织中表达量均显著上调（P<0.05）;感染后48 h法氏囊中白细胞介素6（IL-6）和脾脏中干扰素γ（IFN-γ）的表达量明显低于感染后24 h的表达量。综上所述,该鸭源NDV毒株感染可诱导绍鸭体内在早期产生天然免疫反应,这些反应可能与病毒在机体内复制有关。     

女贞子、五味子、四君子汤和大豆黄酮对蛋鸡在热应激状态下抗氧化功能的影响

试验选用59周龄海兰褐蛋鸡96只,随机分为6个处理组,试验1～3组分别添加1%的女贞子、五味子和四君子汤,试验4组添加10mg/kg的大豆黄酮,试验5组添加5mg/kg黄霉素,试验6组为对照组。研究这几种中草药及大豆黄酮对蛋鸡在热应激状态下抗氧化功能的影响及其机理,同时比较这几种中草药、大豆黄酮和黄霉素的作用效果,试验期为4周。鸡舍内平均温度为(32.0±0.5)℃,相对湿度为50%～70%。结果表明:1)女贞子、五味子、四君子汤和大豆黄酮显著提高了热应激状态下蛋鸡的产蛋率(P<0.05),女贞子和五味子显著降低料蛋比(P<0.05)。2)女贞子、五味子、四君子汤和大豆黄酮能显著降低蛋鸡组织、血清和蛋黄中脂质过氧化物含量,表明这几种药物对热应激引起的蛋鸡脂质过氧化状态有明显改善作用。3)女贞子、五味子、四君子汤、大豆黄酮和黄霉素对蛋鸡组织与血清中过氧化物歧化酶活性无明显影响,但能显著提高谷胱甘肽还原酶活性,表明这几种药物可通过提高GR活性,清除热应激蛋鸡体内LPO,维持机体正常功能状态。4)女贞子、五味子、四君子汤、大豆黄酮和黄霉素对蛋鸡组织与血清中谷胱甘肽含量无明显影响。     

女贞子、五味子、四君子汤、大豆黄酮和黄霉素对蛋鸡脂质稳定性的影响

试验选用51周龄海兰褐蛋鸡144只,随机分为6个处理组,试验1、2和3组分别添加1%的女贞子、五味子和四君子汤,试验4组添加10mg/kg的大豆黄酮,试验5组添加5mg/kg黄霉素,试验6组为对照组。研究中草药及大豆黄酮对蛋鸡脂质稳定性的影响及其机理,同时比较中草药、大豆黄酮和黄霉素的效果。设预试期1周,正试期为6周。结果表明:1)添加3种中草药和大豆黄酮均有降低蛋鸡组织、血清或蛋黄中脂质过氧化物含量的作用,其中3种中草药的作用明显优于大豆黄酮和黄霉素(P<0.05),黄霉素的作用不明显;2)中草药、大豆黄酮和黄霉素对超氧化物歧化酶活性没有显著提高(P>0.05),但能显著提高谷胱甘肽还原酶活性(P<0.05);3)3种中草药和大豆黄酮均可显著提高蛋鸡组织或血清中谷胱甘肽含量(P<0.05)。结论为:3种中草药和大豆黄酮均有增强蛋鸡抗氧化水平和脂质稳定性的作用;3种中草药的抗氧化作用优于大豆黄酮;黄霉素对蛋鸡的抗氧化机能没有影响。     

中药复方对鸡增重和免疫功能的影响

中草药含有多种营养成分和天然化学成分，如维生素、矿物质、微量元素等，其作用是多靶点的，在防病治病的同时，还能促生长、增强动物的免疫机能、提高机体整体抗病能力，是营养价值和药用价值的统一。而复方中药更是单味药物治病的进一步发展，既能发挥单味药的特长，又能弥补单味药的不足，更能增强效力。在大力提倡绿色食品的今天，