生物拆分法制备D-天冬氨酸

[目的]利用L-天冬氨酸-β-脱羧酶生物转化拆分DL-天冬氨酸得到D-天冬氨酸的工艺过程。[方法]研究了碳源、有机氮源、转化过程pH值和转化温度对发酵液L-天冬氨酸-β-脱羧酶酶活力的影响,探讨了L-天冬氨酸-β-脱羧酶的热稳定性及L-丙氨酸对L-天冬氨酸-β-脱羧酶热稳定性的影响,并测定了拆分产物的主要指标。[结果]糖类对该酶的生物合成有明显的阻遏作用,而富马酸和苹果酸是很好的碳源物质。有机氮源中蛋白胨浓度对发酵液酶活力的影响较大,当牛肉膏浓度为0.2%,玉米浆为1.0%,蛋白胨为1.0%时发酵液酶活力可以达到最高。转化过程最适pH值为6～7。转化过程最适温度50℃。温度超过60℃酶失活比较严重。浓度6.0%以上的丙氨酸能显著提高转化过程中酶的热稳定性。[结论]利用D-天冬氨酸和L-丙氨酸的等电点的差异来分离提取D-天冬氨酸的制备工艺,其工艺简单,原料价格适宜,提取方便,工艺路线要比其他方法更便捷,更容易产业化。     

红花籽粕中5-羟色胺衍生物的提取工艺

[目的]探究红花籽粕中5-羟色胺衍生物的回流提取工艺。[方法]经过单因素试验,确定乙醇为最适合提取溶剂,在单因素试验的基础上,通过正交试验确定提取过程中3个主要因素的最佳值。[结果]结果表明:原料粒度在20目以上可以有较好的提取效果;提取过程中3个主要因素的最佳值:提取温度为80℃,提取时间为3 h,液料比为3∶1。在此条件下,5-羟色胺衍生物的提取得率达到了2.592mmol/g。[结论]液料比对试验结果影响最大,其次为提取温度和提取时间。     

一株高产谷氨酰胺酶菌株的鉴定和酶活特性的研究

对筛选得到一株高产谷氨酰胺酶菌株进行了初步鉴定并对酶活特性做了研究.通过生理生化实验并结合菌体形态特性,结果发现该菌株可以确定该菌属于柠檬酸细菌属(Citrobacter).通过单因素试验,考察了温度、pH、NaCl和产物谷氨酸对该菌株产生的谷氨酰胺酶的影响.结果发现菌株产生的谷氨酰胺酶的最佳反应pH为6.2,酶最适反应温度为50℃.酶最稳定的pH为6.2,温度低于40℃,酶具有较高的稳定性.高浓度的NaCl对谷氨酰胺酶活性基本无影响.谷氨酸对酶也没有明显的抑制作用.     

一株饲用酪酸菌特性及培养条件的研究

对本实验室分离保藏的一株饲用酪酸菌的一些特性进行了研究,发现该菌株具有较强的耐热性、耐酸性,对胆盐具有较强的耐性,对大肠杆菌有较强的抑制作用。对其碳源、氮源、无机盐等培养基组成进行了研究优化,并确定了最适培养温度等培养条件。     

烟碱降解微生物的筛选、鉴定及其烟碱降解效果评价

采用烟碱降解微生物平板筛选鉴别方法,从白肋烟和烤烟中筛选出11株烟碱降解微生物,经初步鉴定,3株为细菌,8株为放线菌;采用荷移光谱法测定了11株菌对纯烟碱和白肋烟叶片中烟碱的降解能力,其中放线菌K2对烟碱的降解能力最强,对白肋烟叶片中的烟碱降解率(48h)为74.77%,对纯烟碱可以完全降解。经过生理生化试验鉴定和16SrDNA序列比对,确定放线菌K2为除虫链霉菌(Streptomyces avermitilis)。     

新型微生物饲料添加剂的开发及应用效果研究与应用

根据微生态理论，筛选出3株乳酸菌、2株芽孢菌、2株酵母菌、1株光合菌、1株酪酸菌，经过液体种子培养，再以麸皮为主要原料厌氧固体发酵生产出新型微生物饲料添加剂。通过养殖试验，发现2％添加量组比对照组提高日增重8％，提高饲料利用率10％，降低粪便NH3含量61％。     

产脲酶细菌的固定化及转化条件研究

[目的]研究1株高产脲酶的芽孢杆菌菌体的固定化及其固定化细胞的转化条件。[方法]研究不同浓度海藻酸钠溶液、菌体包埋量、戊二醛溶液对固定化细胞脲酶酶活的影响,以及不同pH值、不同温度、几种离子浓度对脲酶活力的影响。[结果]结果表明,固定化细胞转化最适pH值为7.5,最适温度为40℃,最适海藻酸钠溶液浓度为30 g/L,最佳包埋量为40 g/L,最适戊二醛浓度为2%;细胞经过固定化后,细胞脲酶稳定性显著提高,经过戊二醛交联后,稳定性再次提高。固定化细胞的脲酶对Cu2+、Hg2+的抑制作用有一定的抗性。[结论]固定化细胞比游离细胞更适合工业化操作。     

N-糖基化修饰对异源蛋白在毕赤酵母中表达的作用研究进展

毕赤酵母是目前工业上生产重组蛋白最常用的宿主之一，而蛋白高水平表达技术一直是该领域的研究热点。目前，成熟的分子生物学技术手段使改造N-糖基化修饰位点成为一种操作性较强的提高目标蛋白表达水平的策略。综述了毕赤酵母中蛋白N-糖链的结构、其介导的CNX循环和对蛋白折叠的作用以及通过N-糖基化修饰位点改造促进蛋白表达的应用研究。