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本文描述了一种构建与PCR产物直接连接的克隆载体的方法。以高拷贝克隆载体 pUC118为骨架载体,在 pUC118质粒Ampr 基因的Eam110 5I酶切位点上,以点突变的方式封闭Eam110 5I酶切位点。经转化大肠杆菌JM 10 9证实,该改造过的pUC118质粒,可使宿主细胞具有氨苄抗性,仍可作为氨苄选择标记的克隆载体。将一人工合成的具有两个Eam110 5I酶切位点的互补寡聚核苷酸链(两端具有BamHI接头)插入已封闭Eam110 5I酶切位点的pUC118 载体的BamHI位点,构成新的克隆载体,此质粒命名为pUC118E。该载体经Eam110 5I酶切后,可产生 3 端突出一个T碱基的T -vector,能与PCR产物直接连接。 相似文献
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渠道防渗技术的应用与推广 总被引:5,自引:2,他引:3
新《水法》明确规定:各级人民政府应当推行节水灌溉方式和节水技术,对农业蓄水输水工程采取必要的防渗措施,提高农业用水效率。渠道防渗则为传输节水的根本措施。推广应用优秀的防渗形式及先进的防渗技术是非常必要的。介绍几种不同材料不同结构形式的工程防渗技术,可因地制宜、灵活选择应用。 相似文献
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【目的】建立黄芩(Scutellaria baicalensis Georgi)的组织培养快速繁殖体系。【方法】以黄芩的幼茎、幼叶及叶柄为外植体,在MS培养基上添加不同质量浓度的6-BA、2,4-D与NAA诱导愈伤组织及再生芽;在1/2 MS培养基上添加IAA、IBA或NAA激素,单独或者组合使用,诱导黄芩试管苗生根。【结果】幼叶和叶柄容易褐化死亡,而幼茎显示很好的脱分化和再分化效果;BA与NAA组合可以诱导幼茎外植体脱分化与再分化,而BA与2,4-D组合只能诱导愈伤组织发生。IAA诱导生根率最高,但是茎基部会形成愈伤组织,后期无法驯化成活;IBA及NAA均可以诱导根的发生,但是以IBA效果为佳。【结论】幼茎为最佳外植体,MS+BA0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织诱导及再生芽的分化培养基。1/2MS+IBA 0.1mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率为70.3%。 相似文献
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本研究以膜荚黄芪的子叶、下胚轴、幼茎、幼叶为外植体,诱导愈伤组织及再生芽,建立膜荚黄芪组织培养再生体系。结果表明,子叶是最佳的外植体。在6-BA与2,4-D或NAA培养基组合中,以MS+6-BA 0.5mg/L+NAA 0.5mg/L为最佳的愈伤组织及芽诱导培养基。黄芪再生植株较难生根,在IAA、IBA和NAA激素培养基组合中,以1/2MS+IBA 2.0mg/L或1/2MS+IBA 1.0mg/L+NAA 1.0mg/L为最佳的试管苗生根培养基,生根率50%左右。 相似文献
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[目的]为广藿香的快速繁殖及育种提供新的方法.[方法]以MS为基本培养基,添加6-BA(6-苄氨基嘌呤)、IAA(吲哚乙酸)、NAA(萘乙酸)等3种激素,单独或配合使用诱导广藿香试管苗再生芽的发生,共设计10个组合.[结果]除对照组的诱导率较低(19.2%)外,其他激素组均优于对照组,其中有5组诱导率达到100%,包括6-BA与IAA或与NAA组合中的4组,以及单一激素组即6-BA 0.5 mg/L组.繁殖系数及生长状态均有所不同,繁殖系数超过4.0的有2组,分别是MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L及MS+6-BA 0.5 mg/L 组,且这2组差异不大.[结论]以 MS+6-BA 1.0 mg/L+IAA 0.2 mg/L 及 MS+6-BA 0.5 mg/L 为较佳的诱导广藿香试管苗再生芽发生的激素组合. 相似文献
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本文报道了茴茴蒜(Ranunculuschinensis)的染色体数目及核型.结果表明,2n=16.核型分析表明,8对染色体中,1对为正中部着丝点染色体,2对为中部着丝点区染色体,3对为近中部着丝点区染色体,1对为近端部着丝点区染色体,1对为端部着丝点染色体.核型公式为2n=2x=16=2M+4m+6sm+2st+2T.核型属3A类型. 相似文献