湖南柑橘衰退病调查分析及弱毒系筛选

 The investigation showed that stem-pitting Citrus tristeza virus (CTV)occurred commonly in citrus production areas in several varieties of Hunan Province. Accurate detection of CTV strains was performed by p23/PCR method, PCR and the results indicated that the most samples were infected with several CTV isolates. Three mild strains were isolated and their pathogenicity was identified by biological identification, it indicated that p23/PCR groups had uniformity with the pathogenicity of CTV isolates. Furthermore, three mild isolates were tested in the cross protection by analysis of biological symptoms and composition of p23 gene. Different protecting effects were observed among these strains and W17 mild isolate was effective.     

冰糖橙果实品质无损伤在线检测分级技术的建立与应用

【目的】冰糖橙果实外观分级与内部品质不一致极大地影响了其市场声誉,建立冰糖橙果实品质分级标准和果实快速规模化无损伤品质检测分级技术,并进行在线应用,为快速分选不同糖酸度冰糖橙产品提供技术支持。【方法】在利用常规果实品质分析方法对主产区的冰糖橙果实进行多年品质分析的基础上,找出果实外观和内在品质的相关性,确定不同果型横径与糖酸度含量的关系,形成冰糖橙果实分级标准。在此基础上,采集710-960 nm波段近红外透射光谱建立果实无损伤检测模型,利用常规品质分析数据对原始光谱反复进行校正并验证,确定无损伤检测的准确性,并在分级线上进行应用;调查统计应用无损伤检测生产线分级后各级冰糖橙的产量、销售单价和销售额。【结果】（1）根据果实横径大小进行初选分级,68-74 mm为大果型,62-67 mm为中果型,56-61 mm为小果型,再按果实的糖度（可溶性固形物Brix度）和酸度不同将冰糖橙划分为4个等级：糖度≥14、酸度≤0.4%为特级果;12≤糖度＜14、酸度≤0.4%为一等果;糖度≥14、0.6%≥酸度＞0.4%为二等果;糖度＜12、酸度≤0.4%为合格果。通过反复矫正,建立了冰糖橙果实品质分级标准。（2）通过多次进行单果糖度和酸度的分析矫正,建立了冰糖橙果实糖度和酸度的检验线。第1次建立的冰糖橙糖度检量线检测范围为10.1-14.9 Brix,再利用常规品质分析验证无损伤检测结果,合格率仅为26%。第2次建立的糖度检量线延长高糖检测范围,为10.1-16.2 Brix,经验证后合格率达90%。第3次建立的糖度检量线扩大低糖检测范围,为9.8-16.2 Brix,经验证后合格率为90%。第1次建立的冰糖橙酸度检量线检测范围为0.1%-1.26%,再利用常规品质分析验证无损伤检测结果,合格率仅为64%。第2次建立的酸度检量线延长高酸检测范围,为0.1%-1.37%,经验证后合格率达94%。第3次建立的酸度检量线继续扩大高酸检测范围,为0.1%-1.53%,经验证后合格率为92%。（3）新建立无损伤糖酸度校正和验证模型,糖度有效检测范围为8.7-15.1 Brix,酸度有效检测范围为0.14%-2.0%,经验证后糖度合格率达到98%,酸度合格率为98%。应用该分级技术,分选速度达到10个冰糖橙/秒,品质分级后最高单价48元/kg,年产量4 500 t,实现产值9 122万元。【结论】研究结果预测糖酸度准确,测量范围全面涵盖冰糖橙商品果的糖酸度,能大批量、快速、高质量和无损伤在线鉴别冰糖橙果实内在品质,结合外观品质分级标准,分选出内外品质均一的产品。     

β-氨基丁酸诱导植物抗病作用的研究

β-氨基丁酸(BABA)是一种具有广谱诱抗活性的植物化学诱抗剂.为了研制和开发该类氨基酸农药制剂,对BABA及其合成制剂温室诱导辣椒抗TMV,CMV,疫病和番茄抗根结线虫病及田间诱导大白菜抗霜霉病的活性进行了研究.结果表明,β-氨基丁酸喷雾处理辣椒叶片和茎杆后,可诱导辣椒获得对TMV和CMV的抗性,诱抗效果受诱抗剂浓度所影响,最高的诱抗效果可达到50%以上;10?BA可溶性粉剂对多种病害的诱抗效果均在BABA纯剂之上,特别对辣椒疫病的诱抗效果在接种后10 d仍高达88%;对大白菜抗霜霉病的诱抗效果也较生产上常用药剂甲霜锰锌要好.BABA衍生物对TMV,CMV,疫病和根结线虫病亦表现出一定的诱抗潜能.     

红肉冰糖橙的品质与遗传鉴定

【目的】探明红肉冰糖橙的品质及遗传变异状况,以期为红肉冰糖橙芽变品种的选育及其开发利用提供理论依据。【方法】采用分光光度计法、HPLC法和改良CTAB法等方法分别测定甜橙各品质指标及汁胞红色色素,提取其叶片DNA,分析比较红肉冰糖橙与红肉脐橙、普通冰糖橙的品质及遗传差异。【结果】在红肉冰糖橙、红肉脐橙和普通冰糖橙中,果实横径和纵径分别为65.66～79.18 mm和63.58～77.84 mm,均为红肉脐橙＞普通冰糖橙＞红肉冰糖橙;皮厚为3.28～3.96 mm,依次为普通冰糖橙＞红肉脐橙＞红肉冰糖橙;可食率为62.81%～65.90%,依次为红肉冰糖橙＞红肉脐橙＞普通冰糖橙;可溶性固形物为11.33%～12.53%,依次为普通冰糖橙＞红肉冰糖橙＞红肉脐橙;可滴定酸为0.20%～0.78%,依次为红肉脐橙＞普通冰糖橙＞红肉冰糖橙;维生素C为58.36～63.39 mg/100mL,依次为红肉脐橙＞普通冰糖橙＞红肉冰糖橙;β-胡萝卜素为3.34～70.98 μg/g,依次为红肉脐橙＞红肉冰糖橙＞普通冰糖橙,番茄红素为0.74～3.19 μg/g,依次为红肉冰糖橙＞红肉脐橙＞普通冰糖橙,类胡萝卜素为69.72～212.87 μg/g,依次为红肉脐橙＞红肉冰糖橙＞普通冰糖橙,各品种间3种色素含量均差异显著;引物合成后经PCR扩增,红肉冰糖橙在100～250 bp出现特异性条带,与普通冰糖橙在DNA水平存在差异。【结论】红肉冰糖橙果实为红肉、低酸、早熟、无籽或少籽,其品质较普通冰糖橙明显提升,引物合成后经PCR扩增,在100～250 bp出现特异性条带,与普通冰糖橙在DNA水平存在差异,具有成为新品种的遗传基础。     

乳化植物甾醇促鹌鹑生长

将100只体质量为(70±4)克的26日龄雄性日本鹌鹑分为4组,每组5个重复,每只鹌鹑每天灌喂含0、0.1、0.2和0.4毫克/毫升植物甾醇的乳化液0.2毫升。21天后,采食量、体质量增加和饲料转化率均无显著变化,但饲料转化率随植物甾醇灌喂量的提高呈下降趋势。植物甾醇乳化液均显著提高了鹌鹑血清中生长因子的含量,但不影响皮质酮水平,血清丙二醛含量也无显著变     

湖南省柑橘主要病虫发生情况及防控现状

为提升柑橘病虫害的防控能力,对湖南省13个主产县(市)柑橘病虫害发生情况进行调查,明确了该省柑橘主产区主要病虫害的发生规律及防控现状.结果表明:湖南省柑橘主产区大范围发生的病虫害有柑橘黑点病、红蜘蛛、潜叶蛾和柑橘大实蝇,其中黑点病和柑橘大实蝇对果实的危害最为明显,直接影响果园的经济收入;柑橘黄龙病和柑橘木虱主要局限在湘南地区发生,柑橘溃疡病集中在甜橙和柚主产区发生;不同地区的黑点病、潜叶蛾和柑橘大实蝇发生规律存在一定差异.目前,湖南省柑橘病虫防治以化学药剂防治为主,农业防治和物理防治等绿色防控措施为辅,需加快绿色防控措施的推广应用.     

特早熟温州蜜柑大分4号贮藏条件分析

以特早熟温州蜜柑"大分4号"为材料,研究不同温湿度对其贮藏效果的影响。结果表明,在通风库贮藏条件下,果实容易发生失重和腐烂,品质和风味下降等现象,不利于大分4号的贮藏。在冷藏条件下,不同的低温和高湿度条件能对大分4号的外观性状、失重以及内在品质产生不同的影响。10℃比5℃有利于果皮转色,相对湿度85%~90%比80%有利于减缓果皮失水皱缩;在10℃低温情况下,相对湿度85%~90%比80%更加加重果实失重,其失重主要体现在果肉内耗;较高温度(10℃)或较高湿度(RH≥85%)均能促进果实可滴定酸含量的下降,而对可溶性固形物和Vc含量的变化影响不大,这将有利于果实风味品质的改善。综合分析,对于大分4号冷藏3周,温度宜选择10℃,相对湿度宜选择85%~90%。     

柑橘衰退病毒基因RNAi载体的构建

基于转化病毒基因介导抗性,通过在植物表达载体p CAMBIA 2301上插入启动子–内含子–终止子的方式,构建一种含有发夹结构的、通用型强的RNAi载体骨架结构;以柑橘衰退病毒(citrus tristeza virus,CTV)的p25、p20和p23基因保守序列为模板设计正向片段和反向片段,先后与骨架载体连接,成功构建了3个RNAi载体(分别命名为ds2301–p25、ds2301–p20和ds2301–p23),并将载体ds2301–p23注射入墨西哥莱蒙叶片。制作p23基因的地高辛标记探针,用Northern杂交检测是否有si RNA产生。结果表明:用Northern杂交可以检测到p23特异的si RNA,在墨西哥莱蒙叶片中瞬时表达的农杆菌ds2301–p23可以发生RNAi,表达有效的si RNA。本研究中构建的骨架载体可以广泛用于RNAi载体的构建,含有柑橘衰退病毒基因片段的3个载体可以用于基因功能分析及具有CTV抗性的柑橘种质资源获得。     

枸橼C-05抗柑橘溃疡病相关PRR基因LYK5的初步鉴定

为筛选出抗溃疡病病菌相关PRR(Pattern Recognition Receptors)基因,本研究以接种了溃疡病菌Xcc的抗病种质枸橼C-05(JY C-05)和感病种质冰糖橙(BTC)、酸橙(SC)及早蜜椪柑(ZM)为研究对象,利用荧光定量PCR分析PRR基因的表达,结果显示PRR基因中的LYK5(LYSIN MOTIF-CONTAINING RECEPTOR-LIKE KINASE5)基因在枸橼C-05中表达上调而在其它感病种质中表达下调,表明LYK5基因可能与枸橼C-05抗溃疡病相关;对枸橼C-05和感病种质LYK5核酸序列及氨基酸序列进行差异分析,发现枸橼C-05 LYK5基因与冰糖橙、来檬(LM)有差异,但是与大香橼(DXY)和爪哇柠檬(ZWNM)LYK5基因相似度为100%,说明基因结构差异不是枸橼C-05的LYK5基因参与抗溃疡病的原因;进一步对其蛋白关键结构域进行比较分析,显示LYK5蛋白质信号肽第16位氨基酸、LysM基序区域(第203号氨基酸,第209号氨基酸)和蛋白激酶结构域(第394位,第449位,第468位,第492位,第647位氨基酸)存在差异;同时,对其三级结构进行比对发现枸橼C-05 LYK5蛋白结构与感病种质冰糖橙、来檬、爪哇柠檬和大香橼并无差异,进一步表明LYK5基因参与枸橼C-05抗溃疡病的过程不是由其蛋白结构差异所致。分析枸橼C-05和其他柑橘种质的LYK5启动子,大多数元件的差异不能区分抗病和感病柑橘种质,只有枸橼C-05缺失激活分生组织特异性调控元件,其他柑橘种质均有该元件,这是不是LYK5在接种Xcc的不同柑橘中表达差异的原因还有待进一步探究。