鸡传染性支气管炎病毒介导的细胞内受体及抗病毒基因的表达

[目的]研究传染性支气管炎病毒对细胞模式识别受体(PRRS)及天然抗病毒基因转录的激活作用.[方法]IBV M41毒株感染DF-1细胞,应用荧光定量PCR测定细胞内受体(MDA5、LGP2、MAVS和NLRC5)和抗病毒相关基因(IRF7,IFN-a/β,NF-κB1)在禽传染性支气管炎感染过程中不同时间点的转录水平表达变化.[结果]在感染的细胞中几种细胞内受体在感染不同时间点均有不同程度的升高.IFN-α、IRF7和NF-κB1的表达在感染后显著升高,而IFN-β在感染36 h内被抑制,48 h被激活.[结论]鸡传染性支气管炎病毒体外感染DF-1细胞后能显著激活细胞内受体及抗病毒基因的表达.     

连翘酯苷对人工感染传染性支气管炎病毒雏鸡肺组织JAK/STAT信号通路的调节作用

探讨连翘酯苷对人工感染传染性支气管炎病毒雏鸡的肺组织JAK/STAT信号通路的调节作用,分别设连翘酯苷预防组高、中、低和治疗组高、中、低6个剂量组,并设利巴韦林阳性对照组、空白对照组和病毒对照组。提取雏鸡肺组织总RNA,用相对荧光定量RT-PCR的方法测定雏鸡体内干扰素-α,JAK,STAT-1mRNA的相对表达量。结果表明连翘酯苷预防组高剂量100 mg/kg、中剂量50 mg/kg和治疗组中剂量100 mg/kg对雏鸡体内干扰素-α的mRNA水平表达有诱生作用（P〈0.01）,治疗组中剂量显著上调JAK及STAT-1的表达,与JAK/STAT信号通路一些因子的上调相关,其机制部分与肺组织的JAK/STAT信号通路激活和相关信号的表达有关,这是连翘酯苷发生抗病毒作用的机制之一。     

兽医学研究生教育面临的机遇与挑战

概述了国内外兽医学的研究对象,培养目标,市场需求等现状,提出了北京农学院都市型兽医教学改革的思路,呼吁应将动物福利内容贯穿于动物实验始终。意在为北京农学院刚起步的兽医学教育提供参考。     

雌二醇残留检测方法的建立

雌二醇（estradiol，E2）是雌激素中生物活性最强的一种，掺在预混料及饲料添加剂中喂养畜、禽，或埋入耳根及家禽翼下，可以大大加快禽类的繁殖和生长，但雌二醇及其衍生物却可滞留在畜禽体内，通过食物链危害人类健康。因此，在食品安全方面，加强对农产品和食品中的雌二醇残留监测不容忽视。     

Smad泛素化调节因子2siRNA的筛选及转染原代肾小管上皮细胞条件的优化简

试验旨在优化Smad泛素化调节因子2（Smurf2） siRNA最佳转染条件,筛选最佳siRNA干扰片段,进而实现对Smurf2基因的瞬时沉默,为研究Smurf2基因在马兜铃酸肾病（aristolochic acid nephrohathy,AAN）中的作用奠定基础。本研究通过培养小鼠原代肾小管上皮细胞（renal tubular epithelial cells,RTECs）,并以脂质体Lipofectamine^TM 2000为转染介质,将Smurf2 siRNA转染入RTECs;通过观察绿色荧光的表达量及Real-time PCR反应优化转染条件,转染后Real-time PCR检测mRNA表达抑制率。CCK-8法检测Smurf2 siRNA复合物对RTECs活性的影响;同时,用Real-time PCR和Western blotting检测不同位点Smurf2 siRNA对Smurf2 表达的影响。结果显示,当Lipofectamine ^TM 2000与siRNA比例为1.5 μL∶30 pmol时,转染效率最高,为70%～80%;Smurf2-619 siRNA干扰效果最明显;与正常组相比,转染siRNA组的Smurf2蛋白表达水平显著下降（P<0.05）。最终确定了Smurf2 siRNA最佳转染条件,其中Smurf2-619 siRNA对Smurf2 表达的抑制率最高。     

黑熊血清蛋白与磺胺对甲氧嘧啶的结合率测定

本文用平衡透析法测定了黑熊血清蛋白与磺胺对甲氧嘧啶（ＳＭＤ）的结合率（ｆｂ）为４１．７７±１１．６６（５．３８～２５．８７）％．数据经Ｗｏｏｌｆ作图法处理、直线回归后，得到结合参数βｐ和Ｋｄｐ分别为：８．８５±１．７８μＭ／ｇ，６４７．２０±２４２．８４μＭ／Ｌ．黑熊的ｆｂ均随药物浓度的增高而降低，高浓度的呈现饱和现象．不同浓度间的ｆｂ差异极显著（Ｐ＜０．０１），不同个体间的ｆｂ差异极显著（Ｐ＜０．０１）．     

氨苄青霉素单抗鉴定与酶联免疫检测方法的初步研究

利用碳化二亚胺(EDC)法将氨苄青霉素(AMP)与匙孔嘁血蓝蛋白(m cKLH)偶联制备免疫原免疫Balb/c小鼠,应用杂交瘤技术将免疫鼠脾细胞与小鼠骨髓瘤细胞(SP2/0)融合,建立分泌氨苄青霉素单克隆抗体的杂交瘤细胞株。杂交瘤细胞染色体数目为97~104条,3D12株亚型为IgG2 a,用其制备的腹水ELISA效价达到2×106。亲和常数为3×10-10mol/L,抗体相对分子质量为1.54×105,与其他抗生素的交叉反应率小于0.01%。采用间接竞争ELISA方法建立检测AMP的标准曲线,在0.5~100 ng/mL范围内呈线形相关,回归方程为Y=0.056 9X+0.130 8,相关指数R2=0.994 8,以10%抑制率对应的浓度计算,该方法对AMP的检测限为0.3 ng/mL,对市售消毒纯牛奶模拟样品最低检测限为0.4 ng/mL。     

蛋鸡热应激中代谢指标的动态变化及相关性

通过 32 0日龄的海赛褐蛋鸡连续 11天 2 7～ 38℃热应激 ,对持续高温下蛋鸡血清、肝脏、心脏中葡萄糖、乳酸、α -酮戊二酸的含量进行测定 ,结果表明 :葡萄糖、乳酸、α -酮戊二酸在热应激中均有不同程度的变化 ,其中葡萄糖水平在血液、肝脏中的动态变化趋势为先升后降 ,血清与肝脏r=0 .49;与心脏中的变化趋势r=0 .6 81。乳酸在热应激中体内动态变化规律为心肌缓慢的先升后降 ,血清与肝脏的变化水平与之接近。血清与肝脏动态变化过程的r=0 .416 ;血清与心脏的动态变化r=0 .5 2 6。α -酮戊二酸在热应激中血清中的含量先降后升 ,与肝脏中的动态变化趋势相同 ,但相对滞后。动态变化相关r=0 .388。     

磺胺甲口恶唑残留快速检测胶体金试纸条的研制

磺胺类药物(sulfonamides, SAs)其抗菌谱广,能抑制大多数革兰氏阳性菌和阴性菌[1],但其半衰期较长,通过任何途径摄入均会在人体中蓄积,对人体造成潜在危害.我国、美国以及欧盟等规定动物性食品中总磺胺以及单种磺胺药的MRL为0.1 mg/kg[2].     

磺胺甲噁唑人工抗原的合成及多克隆抗体的制备

将磺胺甲噁唑以重氮化方法使之分别与人血清白蛋白(HSA)、卵清蛋白(OVA)载体蛋白连接,分别作为免疫原与包被原进行抗血清制备及ELISA试验,结果产生了特异性抗体。交叉试验表明:产生的特异性抗体与磺胺甲口恶唑反应明显,与其他类似物交叉反应不明显。