防御酶系对山茶灰斑病诱导抗性的响应

为揭示水杨酸(SA)诱导山茶产生抗病性反应机制,采用琼脂平板法测定了SA对山茶灰斑病菌Pestalotiopsis guepinii ( Desm.) Stey的影响.结果表明,浓度为0～5 mmol/L的SA对该菌的生长没有抑制作用.用SA喷雾涂布叶片诱导山茶抗性,其植株内过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO )、过氧化氮酶(CAT)、苯丙氛酸解氨酶(PAL)等防御酶时山茶灰斑病菌诱导信号有不同响应.诱导并挑战接种处理的植株体内上述酶活性比只诱导不接种处理上升速度快,不同浓度的SA诱导及诱导后挑战接种植株体内的POD,PPO,CAT,PAL活性与SA浓度呈正相关.各防御酶活性与感病指数的相关性分析表明,CAT活性与感病指数显著负相关(r = - 0.9730),除PPO与感病指数的相关系数很低外,其它酶均较高,尽管未达到显著水平,但仍说明POD,PAL在诱导山茶抗病性中具有重要作用.     

努比亚山羊LMCD1基因生物信息学分析、真核表达载体的构建及表达

【目的】 扩增努比亚山羊LIM结构域基因1（LIM domain gene 1,LMCD1）并进行生物信息学分析,构建真核表达载体并检测LMCD1基因的表达情况,为研究努比亚山羊LMCD1基因功能及探究LMCD1基因在山羊骨骼肌肉发育中的作用提供依据。【方法】 从努比亚山羊背最长肌组织中提取总RNA,应用RT-PCR方法扩增LMCD1基因CDS区序列,并进行生物信息学分析;将LMCD1基因以同源重组的方式连接pEGFP-N1载体,经酶切、测序鉴定后重组阳性质粒命名为pEGFP-N1-LMCD1;将pEGFP-N1-LMCD1重组质粒转染至山羊骨骼肌卫星细胞,通过实时荧光定量PCR检测努比亚山羊LMCD1基因的表达情况。【结果】 努比亚山羊LMCD1基因CDS区序列全长1 092 bp,编码363个氨基酸。LMCD1蛋白分子式为C₁₇₇₅H₂₈₁₈N₅₀₈O₅₃₃S₂₉,分子质量为40.73 ku。努比亚山羊LMCD1基因CDS区序列与山羊相似性最高（99.8%）,与斑马鱼相似性最低（55.4%）,与其他物种的相似性在87.0%~98.8%之间。LMCD1蛋白无信号肽,不存在跨膜结构域,为亲水性蛋白。通过构建努比亚山羊pEGFP-N1-LMCD1真核表达载体并转染至骨骼肌卫星细胞,过表达LMCD1基因,产生绿色荧光信号。【结论】 试验成功扩增LMCD1基因CDS区序列,构建了pEGFP-N1-LMCD1真核表达载体,并分析了生物学功能,为后续开展LMCD1基因在山羊骨骼肌肉发育中的机制研究提供了理论基础。     

饲粮中添加白藜芦醇对“杜×长×大”猪空肠抗氧化能力及紧密连接蛋白表达的影响

试验旨在研究饲粮中添加白藜芦醇(resveratrol,RES)对"杜×长×大"猪空肠抗氧化酶活性及抗氧化基因指标和紧密连接蛋白相关基因表达水平的影响。试验选用12头体重约为65 kg的育肥猪分为2组,每组6头。对照组育肥猪饲喂基础饲粮,试验组育肥猪饲喂在基础饲粮中添加400 mg/kg的RES的饲粮,试验期41 d。结果表明,与对照组相比,饲粮中添加400 mg/kg的RES显著提高了育肥猪空肠过氧化氢酶(CAT)、总超氧化物歧化酶(T-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的活性及总抗氧化能力(T-AOC)(P<0.05),显著降低丙二醛(MDA)的含量(P<0.05);显著提高育肥猪空肠抗氧化基因铜/锌超氧化物歧化酶(Cu/Zn-SOD)、锰超氧化物歧化酶(Mn-SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶-1 (GPx-1)和谷胱甘肽过氧化物酶-4 (GPx-4)活性(P<0.05);显著提高育肥猪空肠抗氧化酶活相关基因CAT、T-SOD和GSH-Px的表达水平(P<0.05),显著降低MDA的表达水平(P<0.05);显著提高育肥猪空肠紧密连接蛋白咬合蛋白(Occludin)、闭合蛋白-1 (Claudin-1)和链接黏附分子A (JAM-A)的表达水平(P<0.05)。研究表明,饲粮添加400 mg/kg的RES能够显著提高育肥猪空肠抗氧化能力及紧密连接蛋白的表达,改善动物肠道健康。     

大麻素Ⅰ型受体基因(CNR1)特异性siRNA表达载体的构建及稳定干扰阳性L6细胞克隆的筛选

大麻素Ⅰ型受体(CNR1)是介导内源性大麻素发挥作用的关键分子,在食欲和能量代谢调控中发挥着重要作用.为了更深入研究CNR1的基因功能,本实验旨在构建和筛选有效沉默CNR1基因的干扰表达载体,并筛选出稳定转染干扰质粒的阳性细胞系.设计合成3对CNR1基因的特异性发夹小干扰RNA(siRNA)干扰引物,将其连接入干扰载体pYr-1.1,构建可沉默CNR1基因的siRNA表达载体CNR1-1、CNR1-2和CNR1-3.并采用LipofectamineTM(Lip)2000介导质粒转染L6细胞,绿色荧光蛋白的表达和流式细胞仪监测转染效率,通过实时荧光定量分析siRNA表达载体的干扰效果.并进一步用G418进行了稳定转染细胞筛选.结果显示,CNR1基因的siRNA表达载体构建正确,瞬时转染L6细胞的转染效率分别为10.45％(P＜0.01)、8.57％(P＜0.01)和8.71％(P＜0.01);干扰效率为39％(P＜0.05)、64％(P＜0.01)及68％(P＜0.01).稳定筛选的最佳G418浓度为800 μg/mL,稳定筛选后干扰效率分别为43％(P＜0.05)、78％(P＜0.01)及91％(P＜0.01).干扰效率较高的CNR1-3表达载体和稳定转染CNR1-3的细胞系为构建筛选成功的siRNA表达载体和阳性细胞系.本研究提供了一种有效沉默CNR1基因表达的方法,同时稳定沉默的阳性L6细胞系成功筛选为进一步研究大麻素Ⅰ型受体的基因功能提供了基础资料.     

饲喂含常规大豆蛋白代乳料对犊牛生长性能和血液生化参数的影响

选择18头刚出生的荷斯坦奶犊牛,分为A、B、C组,每组6头,公母各半。研究去皮豆粕(DSM)和全脂大豆(FFS)替代50%乳源蛋白对犊牛血液生化指标和犊牛生产性能的影响。结果表明,36d时犊牛血清总胆红素、直接胆红素、间接胆红素含量以及γ-谷氨酰转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶活性趋势为DSM替代组(A组)>FFS替代组(B组)>全乳组(C组)(P>0.05);与C组比较,A、B组血清白蛋白含量极显著降低(P<0.01),A组碱性磷酸酶活性显著升高(P<0.05);同期A组和B组犊牛的体重分别比C组低8.08%和5.33%,C组犊牛的胸围、体高、体斜长均大于A、B组,可见DSM和FFS对36d犊牛的肝脏功能和生长性能有一定的不良影响。96d时,各组犊牛血液生化指标无显著差异。365d时,A、B组犊牛的各项生长指标与C组相近,犊牛的补偿生长作用足可弥补DSM和FFS对犊牛早期生长造成的影响,哺乳期用含DSM、FFS的代乳料可低成本培育犊牛。     

184柱花草作家兔饲料的营养价值评定

184柱花草,原产南美洲,1973年由国际热带农业中心(CIAT)农艺学家采集并保存于种子库中,编号CIA T184。1982年引入我国,1988年由广西牧草工作站引入我区种植。该草喜潮湿的热带气候,在南宁以北为一年生,南宁以南为多年生。耐酸性瘦土,能在pH5～5.5的各类土壤中生长。耐干旱,抗炭     

陆川猪DGAT2基因克隆、序列分析及表达水平研究

为了获得广西陆川猪二脂酰甘油酰基转移酶2(DGAT2)基因编码区(CDS)序列,并探讨该基因在陆川猪和杜长大猪肌肉中的表达水平差异,试验以陆川猪背最长肌组织总RNA为模板,克隆获得DGAT2基因CDS序列并利用生物软件进行序列分析,同时采用实时荧光定量PCR技术检测150日龄陆川猪和杜长大猪背最长肌中DGAT2基因的相对表达量。结果表明:陆川猪DGAT2基因CDS序列长度为1 086 bp,与GenBank中的野猪、虎鲸、双峰骆驼、羊驼、佛罗里达海牛、野驴、马和家猫的同源性分别为99. 8%、93. 1%、93. 0%、92. 9%、92. 1%、91. 8%、91. 7%和91. 5%;陆川猪与野猪的遗传距离最近;陆川猪DGAT2蛋白由361个氨基酸组成,其中亮氨酸含量最高,半胱氨酸含量最少,DGAT2蛋白具有较弱的疏水性;在DGAT2蛋白高级结构中,α-螺旋占比39. 34%,无规则卷曲占比43. 21%,延伸链占比17. 45%; 150日龄陆川猪背最长肌中DGAT2基因相对表达量极显著高于同日龄的杜长大猪(P0. 01)。说明DGAT2基因在猪肌肉脂肪沉积过程中发挥了一定作用,但其作用于肌内脂肪的沉积机制尚不明确,可将DGAT2基因作为开展陆川猪肌内脂肪沉积分子机制研究的主要候选基因之一。     

蟛蜞菊作为兔料的初探

为开发蟛蜞菊作为家兔的饲料,本试验对蟛蜞菊进行了一年的栽培实验,观察其生长状况、测定产量和分析其不同季节、不同生长阶段、不同部位的营养价值;同时用肉用断奶仔兔分别喂鲜蟛蜞菊(试验组)与肉兔常用青料桂牧1号(对照组)进行饲养实验.其结果如下:(1)蟛蜞菊每年可刈割4～5次,年亩产鲜草量在7337 千克以上;(2)干物质中粗蛋白12.33%、粗纤维15.00%、粗脂肪4.4%、钙1.92%、磷0.31%,其叶营养价值比茎高,最佳收割阶段是营养期.(3)试验组与对照组的增重分别为21.18千克、21.84千克(P＞0.05);试验组料重比为3.730∶1,对照组料重比为4.187∶1;试验组每千克增重相对于对照组可节约成本0.82元人民币.     

蟛蜞菊对肉兔的饲用价值

选择24只体重相近的40日龄肉兔,随机分成2组,每组12只,基础日粮相同,青饲料分别饲喂桂牧1号象草与蟛蜞菊,两组在平均日增重、平均日耗基础料量、平均日耗青料量间均无显著差异(P>0.05),表明肉兔采食蟛蜞菊可正常生长发育。同时,两组肉兔的血液指标和内脏重量无显著差异,表明蟛蜞菊与桂牧1号的饲用价值相似,可用于肉兔生产。     

热带地区街旁小游园建设特征研究——以湛江为例

城市街旁小游园的可达性和灵活多变性使其在城市景观环境空间中成为具有重要意义的过渡空间。以湛江市为例,选取3个具有代表性的街旁小游园,通过对其区位特点、空间处理、地域性景观体现和游憩特色4个方面的建设特征进行调查分析,提出热带地区街旁小游园的建设应做到以人为本、体现热带园林景观地域性特色、注重地方文化的传承与更新的观点。