三黄连翘合剂对南美白对虾血淋巴细胞和生长性能的影响

试验旨在探究三黄连翘合剂对南美白对虾的安全性。选取南美白对虾1 500尾,随机分为5组,每组3个重复,每个重复100尾。空白对照组对虾投喂基础饵料,4个三黄连翘合剂组分别投喂最佳推荐剂量（20 mL/kg）的1、3、5、10倍剂量进行试验。试验期35 d,分别于试验第18、35 d测定各试验组南美白对虾生长性能以及生理生化指标,观察肝胰腺组织病理变化。结果显示：与空白对照组相比,第18和35 d时,1、3、5倍剂量组能够不同程度提高南美白对虾的各项生长指标和器官指数。第35 d,1、3倍剂量组南美白对虾的总血淋巴细胞数、碱性磷酸酶活性和总蛋白含量均显著升高（P<0.05）,半透明细胞数量显著降低（P<0.05）;1、3、5倍剂量组南美白对虾肝胰腺组织结构清晰、细胞分布均匀、排列有序。研究表明,南美白对虾连续饲喂35 d的三黄连翘合剂能够在一定程度上提高其生长性能和机体免疫功能,推荐剂量（20 mL/kg）的1、3、5倍剂量均具有良好的安全性。     

强效艾美耳牌鸡球虫疫苗免疫效果的研究

本实验研究了强效艾美耳牌鸡球虫疫苗免疫预防鸡球虫病的效果。实验结果表明：强效艾美耳牌鸡球虫疫苗是安全有效的，基保滴服免疫的效果优于拌料免疫，滴服免疫不仅对攻毒后鸡有100％的保护效果，而且能有效地控制球虫病的发生，对小鸡的生长也有明显的保护作用。与常用抗球虫药氯苯胍相比，强效艾美耳牌鸡球虫疫苗预防鸡球虫病的效果优于氯苯胍，其对小鸡增重率、料肉比显示的效果也优于氯苯胍。     

淫羊藿提取物对靶动物红螯螯虾的安全性评价研究

目的明确淫羊藿提取物对红螯螯虾生长性能的影响并对其安全性进行评价。方法将150尾健康红螯螯虾随机分为5组：空白对照组, 淫羊藿提取物临床推荐剂量1倍、3倍、5倍和10倍给药组。4个不同剂量给药组饲料中分别添加0.1%、0.3%、0.5%、1.0%淫羊藿提取物, 每组设3个平行, 每个平行10尾, 分箱饲养。混饲给药7 d, 观察临床症状, 测定红螯螯虾形态学参数、血液生理生化指标以及肝胰腺指数。结果与空白对照组比较, 淫羊藿提取物在临床推荐剂量10倍范围内, 对红螯螯虾增重率、特定生长率、肥满度均无显著（P>0.05）影响;1倍和3倍临床推荐剂量的淫羊藿提取物能极显著（P<0.01）提高红螯螯虾血细胞总数, 极显著（P<0.01）降低血清谷丙转氨酶（ALT）活性, 极显著（P<0.01）提高总蛋白（TP）水平;1 倍临床推荐剂量的淫羊藿提取物能显著（P<0.05）降低大颗粒细胞比例。各剂量给药组红螯螯虾血清TG、BUN、T-CHO水平以及肝胰腺指数与空白对照组比较均无显著（P>0.05）差异, 肝胰腺组织学结构均正常。结论淫羊藿提取物在临床推荐剂量的3倍量范围内连续给药7 d, 对靶动物红螯螯虾是安全的。     

苦白石颗粒靶动物(猪)安全性试验

为评价苦白石颗粒对靶动物(猪)的安全性,为临床应用提供依据。将苦白石颗粒按临床推荐剂量的1、3、5、10倍剂量连续拌料给药5d。从喂药第1天开始,连续观察14d;测定给药前、给药后第7天和第14天试验猪的体重、血液常规指标、血液生化指标。结果表明,苦白石颗粒按临床推荐剂量1、3、5、10倍剂量应用,猪的体重、血液常规指标、血液生化指标等与对照组相比较差异均不显著(P>0.05)。表明苦白石颗粒按临床推荐剂量的1倍~10倍范围内应用,对靶动物(猪)是安全的。     

蟾酥醇提取物的体外抗炎作用研究

为了考察蟾酥醇提取物的体外抗炎作用,用LPS诱导RAW 264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞建立细胞炎症模型,采用Griess法测定蟾酥醇提取物对细胞上清液中的NO水平,ELISA法测定TNF-α、ILlβ、IL-6含量,荧光法测定细胞内ROS水平。结果显示,蟾酥醇提取物对LPS诱导的RAW264.7细胞和小鼠腹腔巨噬细胞所分泌的炎症因子(NO、TNF-α、IL-1β、IL-6)有明显的抑制作用,与空白对照组相比明显降低,同时蟾酥醇提取物极显著降低LPS诱导的细胞内ROS水平(P0.01)。由此推测,蟾酥醇提取物通过抑制炎症因子、降低细胞内活性氧水平减轻细胞的炎症反应,具有良好的抗炎作用。     

猪圆环病毒2型体外诱导RAW264.7细胞氧化应激模型的建立

[目的]探讨猪圆环病毒2型(PCV2)感染量、感染时间与被感染RAW264.7细胞活性氧水平动态变化的相关性,为建立RAW264.7细胞氧化胁迫体外模型提供参考依据.[方法]PCV2原液调至5×106/mL,经10、102、103和104倍稀释(10-1、10-2、10-3和10-4释度)后,感染作用RAW264.7细胞2h,弃病毒液,加入含5% FBS的DMEM培养液继续培养,分别于第4、8、12、24和48 h收集细胞上清液或细胞,测定一氧化氮(NO)、活性氧自由基(ROS)、还原型谷胱甘肽(GSH)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)、黄嘌呤氧化酶(XOD)、髓过氧化物酶(MPO)和诱生型一氧化氮合酶(iNOS)等指标.[结果]10-1PCV2感染RAW264.7细胞后能有效升高细胞NO、ROS水平,降低细胞GSH水平和GSH/GSSG,升高细胞XOD、MPO和iNOS活性,表明以10-1pcv2感染RAW264.7细胞一定程度上能改变细胞氧化还原状态,诱导细胞产生氧化应激.[结论]PCV2感染能诱导RAW264.7细胞发生氧化应激,并确立10-1 PCV2(5× 105/mL)体外感染RAW264.7细胞4~24 h是建立RAW264.7细胞氧化胁迫模型的最佳条件.     

山豆根多糖对鸡脾脏淋巴细胞信号转导相关分子水平的影响

为探讨山豆根多糖(SSP)对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞信号分子的影响,采用终浓度为50、100、200、400μg/mL的山豆根多糖分4、8、12、24 h 4个时间段刺激培养鸡脾脏淋巴细胞,测定培养上清或细胞内环磷酸腺苷(cAMP)、环磷酸鸟苷(cGMP)、6-酮-前列腺素F1α(6-keto-PGF1α)、血栓素B2(TXB2)和一氧化氮(NO)信号转导分子水平。结果表明,山豆根多糖在终浓度为100μg/mL时与鸡脾脏淋巴细胞共同培养8 h后能显著升高cAMP(P0.01)、6-keto-PGF1α(P0.05)、TXB2(P0.01)水平,4种浓度的山豆根多糖对NO分子水平随时间的变化有不同程度的升高(P0.05),影响cAMP/cGMP和6-keto-PGF1α/TXB2信号体系。提示山豆根多糖可通过影响免疫细胞内的信号转导而影响机体的免疫功能。     

猪圆环病毒2型核酸疫苗的小鼠免疫保护试验

为了研究猪圆环病毒2型(PCV2)核酸疫苗在小鼠攻毒试验中的免疫保护效果,以PCV-2 GXWZ-1株为模板,扩增出ORF2基因及其截短基因8个片段(A(ORF2)、B(51-100aa)、C(101-150aa)、D(181-235aa)、E(151-200aa)、F(51-150aa)、G(101-235aa)、H(51-235aa)),将其插入到pcDNA3.0载体中,构建出真核表达质粒,并将其转染至PK-15细胞,用间接免疫荧光试验检测其瞬时表达情况。将试验小鼠随机分成9组,其中免疫组7组,阴阳性对照各1组,将纯化的真核表达质粒对小鼠进行组合免疫;二免后,用经处理过的PCV-2 GXWZ-2株阳性病料悬液腹腔注射免疫组和非免疫对照组小鼠,阴性对照组用生理盐水腹腔注射;其后进行体重记录、病理切片制作及PCR检测。结果表明:共有6个真核表达质粒成功在PK-15细胞中表达。在攻毒后的3周内,阳性对照组小鼠PCR诊断均为阳性;免疫组中,部分组小鼠在攻毒后第1周或在第2周为阳性,到第3周时各免疫组小鼠全部为阴性;阴性对照组始终为阴性。免疫组在病理保护学方面明显优于非免疫对照组,非免疫对照组的体重增长速率略低于免疫组和阴性对照组。由此可见猪圆环病毒2型核酸疫苗在小鼠攻毒试验中有明显的保护作用。     

体内外感染PRRSV处理下仔猪脾淋巴细胞增殖活性的变化

为了探讨体内或体外感染猪繁殖与呼吸综合征病毒（porcine reproductive and respiratory syndromevirus,PRRSV）的仔猪脾淋巴细胞在体外培养的增殖能力,本研究将PRRSV—GXA分离株经Mare-145细胞大量增殖培养,然后体内感染仔猪,接种病毒后分别于第11天、第14天和第21天从活体猪收获脾脏,分离脾淋巴细胞后用ConA和LPS于体外进行诱导增殖。研究结果显示第11天收获的T淋巴细胞增殖能力高于对照组,而B淋巴细胞增殖能力明显下降;第14天收获的T淋巴细胞和B淋巴细胞的增殖能力均极显著低于对照组;第21天收获的B淋巴细胞增殖能力略高于对照组,T淋巴细胞增殖能力略低于对照组。同时,用不同滴度的PRRSV体外感染PRRSV阴性的猪脾淋巴细胞,经ConA和LPS诱导增殖后,发现病毒滴度在10^3-10^6TCID50/mL范围内,能明显提高脾淋巴细胞的体外增殖能力;而病毒滴度在10^0-10^2TCID50/mL范围时,脾淋巴细胞增殖能力低于对照组。本研究结果说明PRRSV体内或体外感染对仔猪脾淋巴细胞增殖活性均有显著的影响,将为临床上PRRS的综合防治提供理论依据。