斜带石斑鱼肝细胞分离及原代培养方法的建立

本研究以斜带石斑鱼肝细胞为实验对象,在不同培养条件下进行原代培养,旨在探讨稳定可靠的斜带石斑鱼肝细胞分离及原代培养方法。采用组织块分离法和胰蛋白酶(含EDTA)消化法分离肝细胞,并通过密度梯度离心法分离纯化肝细胞,细胞悬液于DMEM/F-12、M199和L-15培养液中培养;细胞活力及数量采用血球计数板计数,并通过MTT法测定细胞增殖率;同时,测定不同时间培养上清液中乳酸脱氢酶(LDH)活性、白蛋白(ALB)和尿素氮(BUN)的含量,以分析肝细胞生长状态。结果表明,组织块方法不适于斜带石斑鱼肝细胞的培养,未见细胞从组织块中迁出,而胰蛋白酶消化法获得良好稳定的培养效果,细胞产量达到1.6×108个/g肝重,活细胞数达到95%;L-15培养基细胞生长明显优于DMEM/F-12和M199培养基;启动原代培养的48~72 h阶段肝细胞生长代谢旺盛,培养上清液中LDH活性显著降低,ALB和BUN含量显著升高。结果显示,0.25%的胰蛋白酶常温消化法适合斜带石斑鱼肝细胞的分离,斜带石斑鱼肝细胞原代培养的最适培养基为L-15培养基,肝细胞在启动原代培养的48~72 h生长代谢旺盛。     

西瓜与旱作水稻间作改善西瓜连作障碍及对土壤微生物区系的影响

 【目的】探讨西瓜与旱作水稻间作减缓西瓜连作障碍的可行性，并从微生物多样性与连作障碍关系角度阐释该方法的作用机理。【方法】盆栽方法研究西瓜与旱作水稻间作改善西瓜连作障碍的效果，传统微生物计数及磷脂脂肪酸（PLFA）法研究西瓜根际土壤微生物区系。【结果】西瓜连作土壤上单作西瓜其枯萎病发病率为 66.7%，死亡率为44.4%，与旱作水稻间作后西瓜生长正常。西瓜定植30 d后，间作处理西瓜根际的尖孢镰刀菌数量显著低于单作；50 d后，间作西瓜根际土中的真菌数量显著低于单作，而细菌、放线菌及总微生物数量均显著高于单作。磷脂脂肪酸（PLFA）法分析土壤微生物多样性发现，单作处理的西瓜根际土壤中真菌数量较多，细菌数量较少，而且主要是革兰氏阳性菌，而间作西瓜根际则含有较多的革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和放线菌。间作处理西瓜体内的丙二醛（MDA）含量及保护性酶类如根系及叶片中的过氧化氢酶（CAT）、过氧化物酶（POD）、多酚氧化酶（PPO）和根系中的苯丙氨酸解氨酶（PAL）活性均显著低于单作西瓜。【结论】西瓜与旱作水稻间作条件下西瓜根际尖孢镰刀菌数量显著降低，根际微生物区系向细菌与放线菌占主导的趋势发展，有效防止了西瓜枯萎病的发生，改善了西瓜连作障碍。     

复合酶制剂在反刍动物中的应用效果概述

本文探讨了复合酶制剂种类及其在反刍动物中的作用机制,并对其在反刍动物中的应用效果及前景进行分析和展望.     

新对虾等位酶的遗传控制

应用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术，对新对虾（Metapenaeus.spp）的养殖群体进行了7种等位酶的电泳检测和谱带遗传分析，确定了17个等位酶位点和22个等位基因，其中有4个位点是多态的，它是Esr-1、Sod-1、Me-4、Aat-1(P0.95f标准）。有一个等位基因的位点有Est-2、Lhd-1、Ldh-2、Sdh-1、Me-1、Me-2、Me-3、Me-5、Aat-2、Mdh-1、Mdh-2、Mdh-3、Mdh-4；有二个等位基因的位点有Sod-1、Me-4、Aat-1；有三个等位基因的位点有Est-1。本研究揭示了新对虾群体等位酶位点及其等位基因带谱的变异式样，为新对虾的遗传育种及遗传结构的研究提供了一批等位酶位点及其等位基因的参考图谱。     

中草药替代抗生素对肉鸡肉质风味的影响

试验选用1日龄健康长沙黄鸡（雌雄各半）240羽。采用单因素完全随机分组设计。随机将240羽健康混合雏鸡分成4组，I为基础日粮组；Ⅱ组为抗生素对照组；Ⅲ、Ⅳ组为中草药饲料添加剂组（Ⅲ组和Ⅳ组在基础日粮中分别添加030％和0．60％的方剂2）。每组设3个重复，每个重复20只鸡。结果表明：方剂2的0．30％及0．60％添加水...     

鸡离体小肠适宜培养时间的研究

文章用乳酸脱氢酶法探讨仔鸡肠囊的最佳培养时间。采用单因素试验设计，选择6只三黄公鸡并分别取其十二指肠、空肠和回肠肠囊，随机分配到锥形瓶中，每只鸡为1个重复。在培养的第0、20、40、60和80min时从每个锥形瓶瓶中取100μL培养液分析乳酸脱氢酶活力。结果表明，在0～60min，培养液中乳酸脱氢酶活力上升较缓慢，60min后上升幅度较快。结果提示，仔鸡肠囊的适合培养时间是40～50min。     

仔鸡外翻肠囊适宜培养时间的研究

<正>外翻肠囊法是在体外培养小肠肠环技术和刷状缘膜囊技术的基础上发展而来的,是指在动物麻醉无痛或屠宰状态下立即分离小肠,去掉肠系膜,用生理盐水或缓冲液冲洗干净,然后根据试验目的将所需肠段外翻使肠粘膜向外,结扎一端形成肠囊状,灌注人工培     

仔鸡外翻肠囊适宜培养时间的研究

试验旨在用乳酸脱氢酶法探讨仔鸡肠囊的最佳培养时间.采用单因素试验设计.将6只三黄公鸡的十二指肠、空肠和回肠肠囊随机分配到锥形瓶中,1只鸡为1个重复,每个肠段6个重复,然后在0,20,40,60和80 min用移液枪分别从每个锥形瓶中取100μL培养液分析乳酸脱氢酶活力.结果表明,在0～60min.培养液中乳酸脱氢酶活力上升较缓慢,60min后上升幅度较快;仔鸡肠囊的适合培养时间是40～50min.     

中草药替代抗生素对肉鸡抗氧化性能的影响

本文旨在饲养试验基础上,进一步研究由白头翁、马齿苋、大青叶、秦皮四种中草药所配伍的方剂对肉鸡血液生理生化指标的影响,为配伍定型提供试验依据。试验选用1日龄健康长沙黄鸡（雌雄各半）240羽作为实验动物,试验采用单因素完全随机分组设计方案。随机将240羽健康混合雏鸡分成4组,Ⅲ、Ⅳ组为中草药饲料添加剂组,Ⅲ组和Ⅳ组在基础日粮中分别添加0.3％和0．6％的方剂2;Ⅱ组为抗生素对照组;Ⅰ为基础日粮组,每组设3个重复,每重复20只鸡。结果表明：1．在肉鸡日粮中分别添加0.3％、0．6％水平的中草药可以提高肉鸡血清中T-SOD、GSH的含量;降低MDA从而提高肉鸡抗氧化性能的影响,而且与添加抗生素组相比,差异显著（P〈0．05）。2．中草药添加剂组方可以替代抗生素起到提高抗氧化的作用,降低ALT、AST含量,起到保护组织器官的作用,且提高了AST含量。通过对测定结果进行比较分析,得出该中草药方剂0．3％添加水平为推荐的使用剂量。     

动物检验检疫工作中存在的问题及应对措施

本文主要对动物检验检疫中存在的问题进行了分析,并针对动物检验检疫工作中存在的问题提出了应对措施。从而阻止了来自外部对我国动物健康以及人民健康的危险侵入,保护人民,维护国家利益,确保国家生态安全,促进贸易稳定和经济发展中的长治久安。