农杆菌vbp1基因表达调控分子机理的研究

为了提高农杆菌介导的T-DNA转化效率,本研究在实验中采用了生物信息学的方法,来研究农杆菌的vbp1基因表达调控的机理。利用TESS网站和Prokaryote Promoter Prediction网站,检索到tgntataat、fnrbsub、sigma A_breve、crp和sigma38这些调控因子可以调节vbp1基因,因此vbp1基因启动子的大小可以确定下来。然后通过插入绿色荧光基因(gfp)作为标记基因构建三个重组质粒PSET1、PSET2和PSET3来分析这些转录因子的调控序列,将调控序列进行突变,判断vbp1启动子是否能够启动荧光基因的表达。结果是sigmaA_breve的结合位点去除后会削弱荧光基因的表达,而tgntataat、fnrbsub、crp和sigma38这几个调控因子结合位点突变之后,一种可以增强荧光基因的表达,另一种不能表达荧光基因。因此,我们可以通过调节vbp1基因启动子的调控提高农杆菌的转运效率。     

不同品种小麦籽粒中苜蓿素含量的比较研究

为了了解苜蓿素在不同品种小麦中的含量特征,采用溶液浸提法和紫外分光光度计法测量来自山东省、安徽省、河南省、江苏省和河北省5个省份的26个品种小麦的苜蓿素。结果表明,在26个小麦品种中苜蓿素含量最高的是山农20,为32.793μg/g,淮麦32中苜蓿素的含量最低,为6.290μg/g。有10个品种小麦苜蓿素的含量分布在6～10μg/g,14个品种小麦苜蓿素的含量在10～20μg/g,仅有山农20和良星77中苜蓿素的含量在20μg/g以上。不同品种小麦苜蓿素的含量变化较大,且存在显著性的差异。     

几种烟田除草剂对比试验药效评价

为筛选安全高效烟田除草剂，在全国烟草农药药效试验网中的7个点进行除草剂药效评价试验敌草胺50％可湿性粉剂（利尔化学股份有限公司）、精喹·异嗯松29％乳油（山东鸿汇烟草用药有限公司）、50％敌草胺水分散粒剂（江苏快达农化股份有限公司）、二甲戊灵450克／升微囊悬浮剂（巴斯夫公司）对烟田安全，对杂草有较好的防除效果，施药后20d杂草株数、40d杂草株数和鲜重防效，与烟草上推荐使用的敌草胺50％可湿性粉剂（印度联合磷化物有限公司）效果相当。建议推荐使用。     

烟草上列当研究现状

烟草上列当研究现状王凤龙王劲波钱玉梅（中国农业科学院烟草研究所中国烟草总公司青州烟草研究所山东青州２６２５００）段启斌史庆（河北省蔚县烟草公司）张根发戴勇（河北省烟草公司列当是我国的进境植物检疫对象，韩晓东等于１９８６年报道列当在新疆烟草上发生为害。...     

枯草芽孢杆菌Tpb55抗烟草普通花叶病毒活性研究

利用三生-NN烟测定Tpb55菌悬液对烟草普通花叶病毒(TMV)钝化、预防和治疗作用结果表明,Tpb55菌悬液对TMV具有较好的钝化、预防和治疗效果,枯斑抑制率分别为96.15%、79.72%和65.71%。为进一步揭示Tpb55抗毒机理,选用易感TMV烟草品种K326为实验材料,研究以Tpb55对烟草花叶病毒(TMV)进行预防和治疗处理,测定烟草中与抗病毒性相关的部分生理生化指标的变化。结果表明,先用Tpb55菌液再接种毒液处理的烟株,对TMV的抑制作用优于先接种毒液再接种菌悬液处理,说明Tpb55对TMV的预防具有积极效果;不论在烟株接种毒液前或后,用Tpb55菌液处理烟株的叶片与只接种毒液的相比,叶片内过氧化物酶(POD)、多酚氧化酶(PPO)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性均显著提高,以接毒前Tpb55菌液处理的烟株活性水平最高。从本试验结果来看,Tpb55具较强的抗TMV活性,可通过直接接触钝化作用及诱导烟草抗病性提高来抑制TMV侵染。     

葡萄种质资源的RAPD分析

对15个葡萄品种进行RAPD分析。从60条随机引物中筛选出10个多态性引物用于DNA扩增,共扩出71条DNA带,其中多态性DNA带47条,占总数的66.2%。通过聚类分析,分成4大类,美洲葡萄类群康可、奇妙无核自成一类,与欧亚种、欧美杂种分开;其中森田尼无核、无核白遗传关系近,最先聚在一起。该结果显示,欧亚类群遗传差异较大,具有丰富的遗传多样性,证明RAPD技术能在DNA分子水平上揭示葡萄遗传背景及亲缘关系。     

贮前温度处理对草莓果实贮藏特性的影响

研究了贮前不同温度处理对草莓果实贮藏特性及软化的影响。结果表明，以贮前50℃预热处理30min和5℃预冷处理30min的果实腐烂率最低；2种处理均能抑制果实呼吸强度的上升、果实中脱落酸（ABA）的生成、生长素（IAA）的下降、纤维素酶活性的上升，并延缓果实硬度的下降。     

叶绿素荧光测定技术的研究

[目的]规范叶绿素荧光测定程序。[方法]以4个美国山核桃品种的实生苗为材料,在田间测定叶片基部、中部、尖部的F0、Fm、Fv/Fm和Fv/F0值,并在0、5、10、20、40、60min时间段中选择最佳的暗适应时间。[结果]美国山核桃叶片不同部位的F0值几乎无差异,Fm、Fv/Fm、Fv/F0值有一定的差异,Fv/Fm、Fv/F0均表现为叶基部>叶中部>叶尖部,差异不显著。美国山核桃叶片除F0外,Fm、Fv/Fm、Fv/F0均在暗适应5min后测得最大值,与未暗适应的处理在品种间有显著或极显著差异,但品种Elliot暗适应10min的Fm比5min的稍大。田间测定并不是暗适应时间越长越好,测试品种表现一致。[结论]美国山核桃苗期叶片不同部位Fv/Fm、Fv/F0表现为叶基部>叶中部>叶尖部。夏季田间测定荧光参数时,测定前叶片暗适应5min即可。     

"黑比诺"葡萄不定芽离体再生的研究

研究多种因素对欧亚种酿酒葡萄品种"黑比诺"叶片、叶柄和茎段不定芽再生的影响.不同生长调节物质及浓度对其再生影响显著,其中以茎段在MS+BA 5.0 mg·L-1+NAA 0.1 mg·L-1培养基上再生效果最好,再生率为62.5%;叶柄在MS+BA 5.0 mg·L-1+IBA 0.1 mg·L-1培养基上再生率达到20%,而叶片始终未能诱导出芽.另外,暗培养时间及不同节位对茎段不定芽再生有明显影响.     

一株裂解性青枯雷尔氏菌噬菌体的分离及生物学特性分析

【目的】分离并纯化出一株裂解性青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)噬菌体,并测定其各项生物学特性,为开发新的抗烟草青枯病制剂提供依据。【方法】取烟草青枯病重病田中健康烟株的根际土壤制成土壤悬浮液,并通过在青枯雷尔氏菌菌液中加入过滤后的土壤悬浮液富集噬菌体,用双层平板法验证噬菌体的存在后挑取单个最大噬菌斑进行反复纯化,直到得到单一清晰的噬菌斑。纯化后的单个噬菌斑加入对数早期的青枯雷尔氏菌菌液中进行增殖培养,将增殖液按常规方法进行噬菌体颗粒浓缩后,取20μL浓缩液用磷钨酸染色并通过电子显微镜观察噬菌体的形态特征;同时将浓缩液进行SDS-PAGE电泳,观察蛋白条带大小和数量;用λ噬菌体DNA提取试剂盒提取噬菌体增殖液中的噬菌体核酸进行琼脂糖凝胶电泳,确定其基因组片段大小;最后用常规方法测定噬菌体的滴度、最佳感染复数、一步生长曲线,并通过比较加入噬菌体液前后青枯雷尔氏菌菌液的OD600值变化测定其对温度、p H、紫外线、氯仿的敏感性。【结果】分离并纯化出了一株裂解性青枯雷尔氏菌噬菌体,命名为∈RS-1,噬菌斑为圆形,清晰透明,边缘光滑,直径1—2 mm,经电镜观察其形态为蝌蚪状,头部为二十面体的立体对称,直径约为94 nm,并有一带伸缩尾鞘的长尾大约为27 nm×100 nm,按照国际病毒分类委员会分类标准,其属于有尾噬菌体目(Caudovirales),肌尾噬菌体科(Myoviridae)的裂解性噬菌体,核酸性质为ds DNA;噬菌体浓缩液经SDS-PAGE分析至少可以观察到25条蛋白条带,相对分子质量在10—100 k D,说明其蛋白外壳至少含有25个结构蛋白;将提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳显示其条带大于48 kb,符合肌尾噬菌体科基因组大小范围(31—317 kb);生物学特性的测定显示该噬菌体对青枯雷尔氏菌的最佳感染复数为0.01;其吸附和感染青枯雷尔氏菌时的潜伏期约为30 min,爆发期约为80 min,裂解量约为156;该噬菌体的裂解活性在28℃时最高,在28—50℃均较强,但在温度超过60℃后活性基本丧失;其对酸碱的耐受力较强,在p H 3—8的范围内均有较强的裂解活性,当p H值超过9后活性开始降低;其对紫外线有一定的耐受能力,经紫外线照射0—9 min后裂解活性依然较强,12 min后活性开始下降,21 min后活性基本丧失;其对氯仿不敏感,5%浓度的氯仿对其活性基本没有影响。【结论】分离到了裂解性的青枯雷尔氏菌噬菌体,属于有尾噬菌体目,肌尾噬菌体科,经过测定其各项生物学特性可知其潜伏期较短,裂解能力较强,具有很好的杀菌效果,且其裂解活性持续时间长,并能在不同温度、不同酸碱性的环境内有较强的适应能力,具有开发为抗青枯雷尔氏菌菌剂的潜力。