牛坏死杆菌溶血素基因克隆、表达和抗原性分析

为了研制新型有效安全的牛坏死杆菌病亚单位疫苗和诊断试剂,试验利用PCR扩增技术获得了牛坏死杆菌H05菌株hly基因的全长及5个相互重叠的截短片段的核苷酸序列,并利用原核表达载体p ET-32a对hly基因的5个截短片段进行了表达和抗原性分析。结果表明:hly-2、hly-3和hly-4片段获得了成功表达,且hly-2(aa 278~567)、hly-3(aa 566~888)和hly-4(aa 887~1163)重组蛋白能够与牛坏死杆菌多克隆抗体反应。说明hly-2、hly-3和hly-4可以用于研制新型牛坏死杆菌病亚单位疫苗和诊断试剂。     

坏死杆菌白细胞毒素作为腐蹄病亚单位疫苗候选抗原的研究前景

腐蹄病（foot rot）是侵害反刍动物趾间皮肤及深层软组织为主的,严重影响奶牛生产性能和产奶质量的一种常见疾病。由于传统的灭活菌苗具有免疫效果差、副反应严重及大量生产困难等缺点,使腐蹄病基因工程疫苗的研究成为热点。笔者对坏死杆菌白细胞毒素作为腐蹄病亚单位疫苗候选抗原研究的最新进展进行综述,希望为腐蹄病亚单位疫苗的研究提供参考。     

牛腐蹄病坏死梭杆菌白细胞毒素重组亚单位疫苗诱导小鼠免疫保护效果的观察

以大肠杆菌表达系统表达并纯化的牛源坏死杆菌H05菌株5个截短的重组白细胞毒素蛋白PL1（1aa～174aa）、PL2（311aa～644aa）、1ktA3（1319aa～2026aa）、PL4（1960aa～2287aa）和PL5（3077aa～3241aa）为抗原分别免疫昆明系小白鼠,同时将灭活的天然坏死杆菌白细胞毒素和PBS作为免疫对照。ELISA结果显示,经4次免疫后5个重组蛋白和天然白细胞毒素均能介导小鼠产生抗白细胞毒素蛋白的特异性抗体,抗体效价分别为1：6400、1：12800、1：6400、1：12800、1：3200和1：800。免疫鼠活菌攻击观察结果和免疫鼠肝脏组织学变化结果一致证明,PL1、PL2、1ktA3、PL4、PL5重组蛋白和天然白细胞毒素对小鼠均具有保护作用,5个重组蛋白的免疫保护作用均优于天然白细胞毒素,在5个重组蛋白中PL1、1ktA3和PL4对鼠的免疫保护效果最好。     

加强实验室建设 提高《动物病理学》教学效果

随着我国教育教学体制的改革与发展,《动物病理学》作为高职高专院校兽医专业的必修课,提高该课程的教学质量成为亟待解决的问题之一。从2009年开始进行《动物病理学》课程的改革与探索,发现了病理解剖实验室中存在的若干问题,并从改善实验室教学环境、动物标本的建设和管理、实验室开放及队伍建设等方面进行了一系列的探讨,以期为提高《动物病理学》教学效果提供参考与借鉴。     

新农科背景下动物病理生理学实验教学改革探索

为探索出适应新农科建设下创新人才培养的实验教学新模式,本文通过分析传统教学中动物病理生理学实验教学中存在的问题,以提高学生综合素质和创新能力为导向对动物病理生理学实验教学内容、教学团队、考核机制进行了一系列的改革.经过4年的改革,形成了以学生为主体、教师为辅助的多层次全方位教学体系.在教师方面,通过学习、培训等使教师整...     

农业网络信息资源获取途径调查分析

通过多种调查方式,了解用户对网上农业信息资源的获取及搜索引擎的使用情况,提出建立满足用户需求、符合农业信息特点的农业专业搜索引擎,整合互联网上农业信息资源,以促进信息共享,并满足农业信息工作者多样化的信息需求,使农业专业搜索引擎能够提供大量经过分析后筛选出的、符合农业工作者需求的有效信息资源,为我国农业工作者及从事相关产业的人员在网上集中快速地查找农业信息提供高质量的服务,为我国农业科教事业的发展提供便利。     

以科学发展观为指导 加快林业经济建设

吉林省有着丰富的林业资源，是全国重要的林区之一。因此，加快林业经济的发展，对于合理安置剩余劳动力就近就业、改善农业生产条件、增加农民收入、促进全省农村经济全面发展、推进社会主义新农村建设，具有十分重要的推动作用。     

酵母铬对围产前期奶牛抗氧化能力的影响

研究在日粮中添加不同水平的酵母铬对围产前期奶牛抗氧化性能的影响。选用20头体况和预产期相近的中国荷斯坦奶牛,随机分为4组,对照组为基础日粮,3个处理组在基础日粮中分别添加2.4、4.8和7.2g/d的酵母铬。结果显示,与对照组相比,添加酵母铬可以提高血清中总抗氧化能力（T-AOC）,超氧化物歧化酶（SOD）和谷胱苷肽过氧化物酶（GSH-Px）的活力（P〈0.01）;在4.8g/d铬水平下,与对照组相比饲喂酵母铬奶牛血清丙二醛（MDA）含量显著降低（P〈0.01）。结果表明,基础日粮添加酵母铬,0.4mg Cr/kg干物质（DM）可提高围产前期奶牛抗氧化能力。     

牛腐蹄病坏死杆菌H05菌株白细胞毒素基因的克隆与序列分析

以黑龙江省分离的牛腐蹄病坏死杆菌H05菌株基因组DNA为模板,参考GenBank发表的羊腐蹄病坏死杆菌A25菌株白细胞毒素基因核苷酸序列,设计5对覆盖白细胞毒素基因完整开放阅读框(ORF)的线物,通过PCR扩增获得了H05菌株白细胞毒素基因5个相互重叠的DNA片段,将它们克隆到pMD18-T载体中.测序结果显示:牛腐蹄病坏死杆菌H05菌株白细胞毒素基因长为9 723bp,编码一个3 240个氨基酸的蛋白质,与羊腐蹄病坏死杆菌白细胞毒素蛋白的核苷酸和氨基酸的同源性分别为99.75%和99.63%,缺失了1 078位的天冬酰胺.     

牛乳铁蛋白肽基因LfcinB的合成及其在大肠杆菌中的表达

根据APD抗菌肽数据库报道的牛乳铁蛋白肽LfcinB氨基酸序列,合成编码LfcinB基因的两条互补的寡核苷酸链,退火后在5’端和3’端分别形成BamHI和XhoI位点的粘性末端。合成的LfcinB基因定向克隆到pET-32a原核表达载体,阳性克隆菌用TB培养基进行扩大培养,然后用终浓度1.0 mmol/L的IPTG进行诱导表达。SDS-PAGE结果显示,LfcinB基因在大肠杆菌中获得了大量表达,表达蛋白以包涵体形式存在,利用TGE透析液对纯化的LfcinB重组蛋白包涵体进行了复性,复性的LfcinB重组蛋白的纯度为96.6%。