禽脑脊髓炎研究进展

禽脑脊(Avian encephalomyelitis，AE)是由禽脑脊髓炎病毒(AEV)引起的主要侵害中枢神经系统的一种禽类传染病，又称为流行性震颤(Epidemic Tremor)。该病主要侵害中枢神经而呈现非化脓性脑脊髓炎的病理变化和特怔性的临床症状，呈世界性分布。现就禽脑脊髓炎的研究进展作一综述。     

单核增生性李斯特杆菌感染和李氏溶血素

单核增生性李斯特杆菌病能引起绵羊、人和其他很多动物疾病,在免疫学检测上有重要意义,在研究胞内菌感染的分子机制上也是一个重要的模型。但由于当前血清学试验上的非特异性和非敏感性,使李氏杆菌病的诊断和流行病学调查存在困难。在所有致病性的李斯特杆菌中,李斯特溶血素是主要致病因子,现已经有用其做诊断抗原的报道。文章论述了近年来单核增生性李斯特杆菌及李氏溶血素的最新进展,对研究李氏杆菌病的发病机理有一定作用。     

新余市天然阔叶林高调查分析

通过对新科市天然阔叶林的调查和分析提出了保护和培育天然阔叶林的对策。     

IPTG诱导浓度对重组李氏溶血素表达的影响

单核增生性李斯特杆菌(L.monocytogenes)的主要毒力基因hly与融合表达载体pGEX-6P-1相连,转化大肠杆菌BL-21。在摇床条件下,利用异丙基硫代-βD-半乳糖苷(IPTG)为诱导剂,分析比较不同IPTG浓度对表达产物的影响,以确定最佳的IPTG浓度。结果表明,在装有LB培养基的三角瓶中,在37℃情况下,当IPTG终浓度为0.6mmol.L-1时,hly基因的表达量最大。当再增加IPTG的浓度时,抑制重组蛋白的表达。Western-blot分析,所表达的蛋白具有抗原特异性。实验为重组李氏溶血素的工业化生产提供依据。     

新余市天然阔叶林调查分析

通过对新余市天然阔叶林的调查和分析提出了保护和培育天然阔叶林的对策     

基于重组李氏杆菌溶血素的阻断ELISA检测病原菌的研究

为建立利用重组李氏杆菌溶血素(LLO)检测单核细胞增生李氏杆菌的ELISA方法,试验首先优化了重组李氏杆菌溶血素的表达条件,获得纯度较高的包涵体之后,用亲和层析法纯化重组李氏杆菌溶血素蛋白,并用纯化蛋白免疫试验兔获得诊断抗体,然后建立阻断ELISA检测单核细胞增生李氏杆菌的方法,并分析最低检测菌数.结果表明:在振摇培养条件下,当IPTG浓度为0.6 mmol/L、诱导温度为37 ℃、菌液OD600值为0.25时开始诱导,诱导时间为150 min,重组李氏杆菌溶血素的表达量最大;纯化蛋白浓度为480 μg/mL,具有免疫活性.说明建立的检测方法特异性好,最低检测菌数为4.8×106个/mL.提示利用重组李氏杆菌溶血素检测单核细胞增生李氏杆菌的ELISA方法是可行的,具有潜在的应用价值.     

一例梅花鹿腹股沟阴囊疝的诊治报告

2004年7月2日，笔者等3人在黑龙江省森林工业总局平山养鹿场进行麻醉试验研究时，遇到这起病例。     

一例梅花鹿腹股沟阴囊疝的诊治报告

2004年7月2日,笔者等3人在黑龙江省森林工业总局平山养鹿场进行麻醉试验研究时,遇到这起病例。1 临床状况 平山养鹿场实行半散放式养殖方式,圈养的鹿群于锯茸后全部放归482hm~2的水泥柱铁丝网结构的大圈内。该鹿即为已经锯过茸的鹿群中的1头。放归圈中后,因为眷恋饲养点儿时常投放的精料,所以在附近徘徊不去。近期饲养员在饲喂过程中发现该鹿的阴囊明显肿大,表皮发红,行走不便。我们经视诊后初步确认为腹股沟阴囊疝,决定采取手术疗法。2 手术     

猪流行性腹泻病毒M基因及其片段原核表达效果分析

将猪流行性腹泻病毒的M基因及编码M蛋白膜外区M基因片段（M’）分别亚克隆到原核表达载体pJLA605和pGEX-6p-1中，构建了重组质粒pJLA605-M、pGEX-6p-M-GST、pGEX-6p-M和pGEX-6p-M’，转化大肠杆菌后。探索了M蛋白在N端和C端不带有谷胱苷肽巯基转移酶（GST）、N端和C端均带有GST、只在N端带有GST以及只含有M蛋白的膜外区M’蛋白的表达情况。SDS-PAGE分析结果表明，N端和C端带有GST的pGEX-6p-M-GST和只含有膜外区M’基因的重组质粒pGEX-6p-M’获得了高效表达，经Bandscan5．0软件分析，其表达产物分别以融合蛋白GST-M和GST-M’形式存在，表达量分别为20％和45％。在对重组质粒pJLA605-M转化的大肠杆菌诱导表达过程中发现菌体生长的抑制现象，说明M蛋白对宿主菌有一定的毒性，进一步提取包涵体进行SDS-PAGE发现M蛋白以包涵体的形式得以表达。猪流行性腹泻病毒M蛋白的毒性作用可能与M蛋白具有的出芽功能有关，因而表现出对大肠杆菌的细胞壁的破坏作用。     

巴斯德毕赤酵母(P pastoris)表达系统

近年来，基因工程菌被广泛用于商业化生产外源蛋白。原核生物作为基因工程表达系统简单而易培养，有其一定的优点，但也存在着一定的缺陷，如不能对表达蛋白进行糖基化等翻译后修饰，特别是对核基因的表达，可能导致产物失去生活活性。自1981年Hitzeman等首次在酿酒酵母中表达了人重组干扰素基因后，相继又有多种外源基因表达成功。与大肠杆菌不同的是，酵母可对异源蛋白进行修饰，采用有信号肽的质粒时，蛋白能被正确折叠和加工，然后分泌到培养基中；与哺乳动