产青霉素G酰化酶工程菌的构建

【目的】构建表达巨大芽孢杆菌青霉素G酰化酶(PGA)的枯草芽孢杆菌工程菌.【方法】首先采用PCR从巨大芽孢杆菌基因组DNA中扩增出长度为2 409bp的PGA编码基因,经琼脂糖凝胶电泳检测及DNA测序验证后,再将其与枯草芽孢杆菌穿梭表达载体PMA5(7.5kb)连接后导入到枯草芽孢杆菌10397中表达,并通过聚丙烯酰胺琼脂糖凝胶电泳(SDS-PAGE)检验其能否表达.【结果】构建了9.9kb大小的PMA5-PGA重组质粒,经SDS-PAGE验证,青霉素酶基因在枯草芽孢杆菌10 397中作出表达.基因工程菌在37℃、220r/min培养36h发酵条件下,所产PGA的酶活可达到12.426U/mL,比巨大芽孢杆菌发酵产PGA酶提高了5.26倍.【结论】所构建的枯草芽孢杆菌是青霉素G酰化酶的高产工程菌.     

八种食用菌营养成分的测定与分析

采用氨基酸分析仪、荧光分光光度计等分析仪器,依据国标分析方法,测定并分析了甘肃省主栽的香菇、平菇、金针菇、双孢菇、阿魏菇、杏鲍菇、茶树菇、黑木耳等8种食用菌的营养成分。结果表明,所测食用菌中含有丰富的多糖、粗纤维、多种矿物质、蛋白质以及18种游离氨基酸,其中人体必需的8种氨基酸占氨基酸总量的40 % 以上,是营养全面、配比合理、具有很大开发利用价值的资源。     

姜醋饮料的研制及其稳定性研究

对以食醋、姜汁、白砂糖、葡萄糖酸钙和蜂蜜等为原料制作的保健姜醋饮料的配方进行了研究。通过正交试验。确定了姜醋饮料的配方,开发出了一种口味良好、具有一定保健功能的姜醋饮料,并通过使用稳定剂(黄原胶、海藻酸钠、CMC)对其稳定性进行了研究。结果表明:100 mL姜醋饮料的最佳配方是姜汁6 mL、香醋1．4 mL、糖7 g、丁香汁0．2 mL和葡萄糖酸钙0．08 g,最好的稳定剂添加量是黄原胶0．012％,CMC 0．06％。     

免疫亲和层析净化高效液相色谱法测定小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇方法的研究

本研究采用免疫亲和层析净化-高效液相色谱法测定小麦粉中脱氧雪腐镰刀菌烯醇的回收率、检出限、精密度等方法性能。结果表明:当加标浓度在1.0~10.0μg/ml时,回收率范围为89.1%~99.7%;用0.5μg/ml标准品进样时,检出限为0.017 9μg/ml;当添加浓度为10.0μg/ml时,该测定方法的精密度为0.9%。可见,免疫亲和层析净化-高效液相色谱法具有检出限低、精密度高、回收率接近真实值、重现性好、操作简便等优点。     

HPLC-ELSD法测定红树莓果实中水溶性糖含量

研究了红树莓果中水溶性糖含量的测定方法.采用HPLC-EISD法分别测定了红树莓果实中的葡萄糖、果糖和蔗糖的含量,测定值分别为37.81,40.19,2.88 mg/g.结果表明:葡萄糖、果糖和蔗糖分别在2.5～12.5,2.52～12.6,2.505～12.49 μg范围内线性关系良好,相关系数为葡萄糖r=0.999 9、果糖r=0.999 8、蔗糖r=0.998 9.该方法快速、简便、灵敏度高、重现性好,是测定红树莓中水溶性糖含量的理想方法.     

红枣酒的生产工艺

经过烘烤和皂土澄清,红枣酒具有浓郁的枣香和良好的稳定性。在所选用的3种澄清剂中,皂土的澄清效果最好,其最佳用量为0.08%。在红枣浸泡过程中加入30mg/LSO2,浸泡24h,加热蒸煮40min,以及在枣汁发酵过程中添加SO2120mg/L,在25~28℃下发酵约4d,可明显减少枣果中丰富的维生素C的损失,成品酒酒精度略有降低,滴定酸含量增加。     

重组枯草芽孢杆菌发酵产青霉素G酰化酶的条件优化

【目的】研究提高PGA酶活力及稳定性.【方法】以重组枯草芽孢杆菌10397(pMA5-PGA)产PGA酶活力为研究对象,在单因素试验基础上,采用响应面设计,对重组菌发酵产PGA的培养基及发酵条件进行了研究.【结果】以葡萄糖20.39g/L、胰蛋白胨15.48g/L、糊精6.1g/L为培养基,在三角瓶装液量16.23%、接种量4.32%、温度35.43℃、时间48.34h、摇床转速220r/min的条件下,所产PGA的酶活力为14.167U/mL,比初始发酵条件下发酵重组菌产PGA的酶活提高了1.14倍.【结论】通过条件优化,可提高重组枯草芽孢杆菌PGA的酶活力,并为工业化生产PGA提供科学依据.