基于特有基因VY93_RS02885为靶标的滑液支原体qPCR检测方法建立

利用CD-HIT-EST快速聚类分析和BLASTN同源性比对共鉴定出17个滑液支原体(Mycoplasma synoviae)特有基因,并从中选取保守基因VY93_RS02885作为分子诊断的靶标基因.根据该基因核苷酸序列设计了1对引物,建立了滑液支原体的SYBR green qPCR检测方法.结果表明,该方法对不同浓度的模板和对应的CT值具有较好的线性关系,R2值为0.9988;该方法的特异性较好,BLASTN比对,检测引物对仅能匹配滑液支原体的特有基因VY93_RS02885,结果显示,该方法能特异性地检测滑液支原体,与其他常见的引起禽关节炎的细菌/支原体性病原无交叉反应;该方法的敏感性较好,100％阳性检测的靶标基因最小拷贝数为10;该方法的重复性较好,对3个不同浓度的模板进行组间和组内重复检测,变异系数≤1.1727％.此外,该方法对临床样品的检出率与传统检测方法相符.因此,本研究建立的针对滑液支原体特有基因的SYBR green qPCR检测方法具有用时短、特异性高、准确性高、敏感性高、可重复性强的优点,可为滑液支原体的快速诊断和流行病学调查提供技术手段.     

基于GIS空间插值的降水分布模拟方法比较研究

为了获取区域最优插值方案,模拟降水空间分布信息,基于1960-2015年湖南省87个气象站点资料,利用ArcGIS 10.2软件平台,采用克里金法、反距离权重法、样条函数法和趋势面法对研究区近56 a年均降水量进行空间插值,通过比较各插值方法的插值精度获得适合区域的插值方法,并分析了研究区降水空间分布特征。结果表明:湖南省降水空间插值受多因素影响,具有不确定性。交叉验证显示幂值为4的反距离权重法插值精度较高,基于TENSION模型的样条函数法次之,基于三角函数模型的克里金法精度略差,阶为2的趋势面法插值精度最差,然而4种插值方法一定程度上均能反映湖南省年降水量的空间分布特征。此外,不同插值方法插值结果存在差异性,其中,普通克里金法插值面较为粗糙,反距离权重法和样条函数法插值面较为光滑,趋势面法插值结果较为单调。     

紫草素对IL-22诱导HaCaT增殖及S100A7、S100A8表达的影响

采用WST-1法检测紫草素对白介素(IL)-22刺激永生化角质形成细胞(HaCaT)增殖的作用;实时荧光定量PCR检测IL-22刺激24、48h以及加入紫草素后HaCaT分泌S100A7、S100A8水平变化情况,探讨紫草素对IL-22刺激HaCaT增殖及分泌S100A7、S100A8的影响。结果表明:紫草素可抑制IL-22引起的HaCaT增殖;IL-22可刺激HaCaT分泌S100A7、S100A8,但该效应可被紫草素阻抑。说明紫草素对IL-22介导的体外培养角质形成细胞增殖和分泌炎症因子S100A7、S100A8有抑制作用。     

复配生物农药防治大白菜病虫害田间药效试验

生物农药的复配能够克服单独使用苏云金芽孢杆菌(Bacillus thuringiensis,B t)不能防治农作物病菌的缺点,有利于提高生物农药药效,形成既能防治害虫又能抑制病菌发生的复配型生物农药。本文进行了6种复配生物农药的田间试验,结果表明:用量为1350 g/hm2的85%B t.15%阿维菌素和75%B t.25%井岗霉素处理杀虫效果最高。     

光敏核不育水稻花粉发育的细胞学研究与PCD检测

应用石蜡切片技术和脱氧核糖核苷酸转移酶介导的缺口末端标记法(TUNEL),对光敏核不育水稻农垦58S和可育水稻农垦58N的花粉及花药壁发育过程进行了研究。结果表明:农垦58S雄性败育起始于花粉母细胞形成期,在发育过程中持续进行,终结于单核晚期,形成典败型花粉;TUNEL检测显示,农垦58S的绒毡层细胞在花粉母细胞时期启动细胞程序性死亡(PCD),但解体过程缓慢,一直持续到花粉发育后期,使单核花粉无法获得所需的营养物质而败育。     

饲料中镉含量国标测定方法的改进研究

为确定饲料中镉含量测定的最佳条件，对国标GB／T13082-1991《饲料中镉的测定方法》做了改进，选择出最佳消解温度，缩短了消解时间，提高了工作效率，回收率达97.4％-102.4％。同目标法测定值相比较，该法应用于2008年饲料中镉国家能力验证（CNCA-08-07A），取得了满意的测定结果。     

基于变前视距离的四轮同步转向农机改进纯跟踪控制

路径跟踪控制是提高自主导航系统控制精度的关键。针对在复杂农田作业环境下转弯时纯跟踪算法跟踪精度不高的问题,本文提出了一种基于改进纯追踪模型的四轮同步转向农机路径跟踪控制算法。建立了基于四轮同步转向农机的运动学模型和纯跟踪模型,在此基础上考虑航向误差得到改进纯跟踪模型,进行RTK定位坐标修正,根据量化误差的评价函数搜索前视区域最优目标点,得到最优前视距离。本文算法能实时确定四轮同步转向农机改进纯跟踪模型中的前视距离,使航向误差和横向误差最小化,实现目标点的自适应优化。仿真结果表明,本文方法转弯时平均绝对横向误差减至0.035m,平均绝对航向误差减至0.212°;水田实验结果表明,当四轮同步转向农机作业速度为3.6km/h时,四轮转向农机轨迹跟踪平均绝对横向误差减至0.109m,平均绝对航向误差减至2.799°,转弯跟踪精度显著提高。     

基于滑模自抗扰的同步转向高地隙喷雾机姿态控制

为提高同步转向高地隙喷雾机转向机构对目标状态的响应速度与鲁棒性,提出了一种滑模自抗扰姿态控制策略。首先,基于同步转向结构建立喷雾机姿态控制模型;其次,将喷雾机的姿态控制模型进行解耦并转换为反馈系统标准型;然后,设计线性扩张状态观测器对模型总扰动进行实时补偿,并根据补偿后的模型推导出终端滑模控制律;最后,分别通过仿真试验以及场地试验对姿态控制器的性能进行验证。在场地试验中：当目标转角为5°时,喷雾机前、后转向角的响应时间分别为1.55 s和1.45 s,当目标转角为20°时,前、后转向角的响应时间分别为3.05 s和2.95 s。本文所提出的滑模自抗扰姿态控制器与传统PID姿态控制器相比,前、后转向角的响应速度分别提高8.42%与1.89%,稳态误差分别降低2.96%与3.15%。仿真试验与场地试验结果表明,滑模自抗扰姿态控制算法收敛速度快、鲁棒性强,能够满足喷雾机在不同环境下进行无人自主导航作业的需要。     

水氮调控对暗管农田土壤脱盐效果及向日葵产量品质的影响

为探究暗管排水条件下盐渍化农田最适宜的水氮制度，在河套灌区暗管布设区开展2年田间试验，设置低水(120 mm, I1)、中水(210 mm, I2)和高水(330 mm, I3)3个灌溉水平及低氮(0 kg/hm²,N1)、中氮(105 kg/hm²,N2)和高氮(210 kg/hm²,N3)3个追氮水平，分析不同水氮组合对土壤脱盐率及向日葵水氮利用效率和产量品质的影响。结果表明：暗管排水条件下，高水中氮(I3N2)的脱盐效果最佳，较其他水氮处理的脱盐率平均提高5.82%。高水(高氮)条件下，产量随着施氮量(灌水量)的增加而升高，其中高水高氮(I3N3)的产量最高，平均为5 129.72 kg/hm²。相同灌水量下，高氮(N3)水平的灌溉水利用效率最高，追氮量越大，肥料偏生产力越低。低水(I1)和中水(I2)条件下高氮(N3)水平最有利于籽仁蛋白质和必需氨基酸的合成。高水(I3)条件下，中氮(N2)水平有利于籽仁蛋白质和必需氨基酸的合成，低氮(N1)水平最有利于籽仁粗脂肪的合成。各灌水水平中，中水(...     

鸭圆环病毒ORF-C1基因的扩增及遗传进化分析

鸭圆环病毒(DuCV)感染能够引起鸭的免疫抑制，引起多种病原的继发性感染，在我国鸭群中广泛流行。为了解DuCV的遗传变异情况，对采自山东、江苏和贵州3个省份的19个鸭场的样品进行了PCR测定，并对DuCV的ORF-C1基因进行测序和遗传进化分析。PCR测定结果显示，19个鸭场中有9个鸭场的样品为DuCV阳性，总体阳性率为47.4%;ORF-C1基因序列测定结果显示，9株DuCV之间的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为93.4%～100%和82.2%～100%,与NCBI中已公布的DuCV毒株的核苷酸序列和氨基酸序列同源性分别为77.8%～99.5%和71.5%～-99.6%;遗传进化分析显示，9株DuCV全部属于DuCV-1b亚型，其中有7株在同一分支上，与D11-JW-001等韩国毒株遗传距离较近，另外2株则与山东、广西的毒株遗传距离较近；此外，与已公布的毒株相比，9株DuCV都在158位发生了氨基酸突变，由E/D变为L/P。上述结果表明，DuCV-1仍然为我国鸭群中的优势流行基因型，但病毒的基因也在不断地发生变异，应该对其进行持续监测。