大白菜开花基因 LFY的克隆及dsRNA抑制载体的构建

以中国大白菜花蕾为材料，通过RT-PCR方法，参照GeneBank公布的序列克隆了Leafy(简称LFY)基因片段，测序分析结果表明，该基因与国外已经报道的序列具有94％的同源性。将此序列以相反方向插入到植物表达载体pROK2 35S启动子之间，并在2反向重复片段之间插入小麦乙酰辅酶A羧化酶的第20内舍子，从而构建了dsRNA抑制双元载体，该载体的构建为通过农杆菌介导转化大白菜进而解决早春扣反季栽培大白菜的先期抽薹问题创造了条件。     

中国萝卜皮色遗传的初步研究

通过对中国萝卜（ＲａｐｈａｎｕｓｓａｔｉｖｕｓＬ．ｖａｒ．ＬｏｎｇｉｐｉｎｎａｔｕｓＢａｉｌｅｙ）不同皮色试材的杂交，Ｆ１、Ｆ２自交，研究了皮色遗传表现。初步结果表明，皮部绿色（即绿皮）依不同杂交组合，可能有不同的遗传模式，即可由１对基因控制，也可由２对连锁的基因或独立分配的基因对控制。若为连锁的２对基因控制时，它们还受到细胞质基因组（可能主要是质体基因组）的互作，表现出明显的偏母遗传现象。皮部红色（即红皮）似有３对独立遗传的基因控制，这３对基因还有相互作用，其中１对可能与绿色控制基因连锁。这样，红皮与绿皮试材杂交时，参与遗传的基因可达４～５对，它们之间出现复杂的相互作用，而使Ｆ２代出现暗紫、洋红、绿色、紫绿等众多不同颜色。其中有的基因还可能影响到肉质色的遗传，使暗紫色Ｆ２代个体自交，Ｆ３代分离出少数紫皮红心萝卜，将其再自交，则能分离出绿皮红心萝卜，从而在实验过程中证实和重演了绿皮红心萝卜的起源。     

根结线虫诱导型启动子RKNIP的克隆及序列分析

通过对烟草根特异性基因TobRB7调控序列的分析，构建了受根结线虫诱导的特异性表达启动子RKNIP的克隆载体，其中RKNIP500已于GenBank注册，注册号为DQ486886。模序分析表明，RKNIP500具有双向启动子的功能，而RKNIP300不具有启动子的功能，但存在大量与启动子功能相关的元件，特别是存在25个根特异性表达的元件。     

抗南方根结线虫和抗黄瓜花叶病毒南瓜材料的初步筛选

采用田间自然感病与人工接种南方根结线虫试验的方法,对10个南瓜材料进行了抗南方根结线虫病和抗黄瓜花叶病毒病初步筛选。结果表明,1~8号材料对黄瓜花叶病毒病均高度敏感,田间表现为植株矮化、叶片黄化、主根短小、侧根少;9号材料常青藤和10号材料黑籽南瓜对黄瓜花叶病毒均具有抗性,且黑籽南瓜对黄瓜花叶病毒病的抗性达到高抗水平。对于抗南方根结线虫病材料的筛选表明,所有参试材料对南方根结线虫均高度敏感,病级指数均达到5。     

薄皮甜瓜自交系高效组织培养技术的研究

以薄皮甜瓜自交系为试材,探讨了不同部位外植体、苗龄、激素组合等因素对植株离体再生的影响。其结果是以4~6日龄的无菌苗的子叶柄、下胚轴上端外植体适于不定芽的较高频率分化;两种外植体分化存在明显极性现象,近生长点处为感受外源激素的敏感部位;MS、6-BA 1.5~2.5 mg/L、ZT 1.0~3.0mg/L、NAA 0.1~0.2 mg/L之间配比适于不定芽的分化,分化率达60%~70%;MS+KT 1.5~2.5 mg/L+GA 2.0 mg/L利于丛生芽的伸长生长;高效生根培养基为MS+IBA 1.0 mg/L。     

大白菜pol CMS育性恢复基因的表达分析

 为进一步探明pol CMS育性恢复基因作用的分子机理,利用数字基因表达谱技术,选用不育系与恢复系杂交的F₂代分离群体,对大白菜polCMS育性恢复相关基因的差异表达进行了分析,并选取部分基因进行了实时荧光定量PCR验证。共有2 826个基因差异表达,其中441个上调表达,2 385个下调表达。GO功能注释表明,差异表达基因显著富集的细胞位置为细胞质、细胞器及大分子复合物等位置,细胞器包括线粒体、叶绿体及质体等,分子功能主要为核酸外切酶的活性,参与的生物过程是花粉壁的形成和组装。与pol CMS显著相关的通路主要是核糖体、糖和氨基酸代谢、核苷酸切除和修复、RNA降解等通路。表达谱和RT-PCR结果表明恢复基因主要通过下调表达调控育性恢复,有4个差异表达基因与育性恢复密切相关。     

番茄果实酸性转化酶基因cDNA片段的克隆

根据酸性转化酶基因的保守序列设计引物 ,采用RT PCR方法 ,从番茄果实总RNA中扩增出目标cDNA片段 ,克隆到pMD18 T载体中。在所测的 10 38个核苷酸中 ,与GenBank中登记号为M810 81的番茄果实酸性转化酶基因高度同源 ,同源性为 99%。该基因片段在GenBank中已登记 ,登记号为AF4 90 5 30。     

小麦体细胞杂种山融3号耐盐相关SSR标记的筛选和初步定位

 【目的】寻找并定位与小麦耐盐性有关的SSR标记。【方法】选取耐盐性强的体细胞杂交新品种山融3号为试验材料。以山融3号为母本，盐敏感的常规品种济南17为父本，配制杂交组合（01组合）。利用SSR-BSA（bulked segregant analysis）方法对01组合F2代分离群体苗期耐盐性进行鉴定，并结合小麦SSR图谱分析，标记其耐盐相关位点。【结果】通过遗传分析和χ2检验表明：01组合中的耐盐性状可能由一个主效基因控制。应用SSR标记技术，筛选到了与山融3号耐盐性状连锁的SSR标记Xgwm304。【结论】SSR标记Xgwm304位点与主效耐盐基因间的遗传距离为24.41 cM，该主效耐盐基因定位于5A染色体的短臂上。     

萝卜雄性不育系个体发育中的同工酶研究

 利用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳对四个萝卜雄性不育系和保持系营养生长期的叶片和生殖生长期的花药进行了过氧化物酶同工酶、细胞色素氧化酶同工酶和脂酶同工酶的分析，结果表明：在生殖生长期，雄性不育系的过氧化物酶同工酶，细胞色素氧化酶同工酶均比其保持系酶带数目多，酶活性强，而且这种差异最早可发生在单核早期，并随着发育的进程不断加强，其保持系则相对稳定。营养生长期这两种同工酶的表现类同。至于脂酶同工酶在生殖生长期和营养生长期的表现都较为复杂。     

牛胸腺DNA与酪蛋白基因导入花生栽培种引起性状变异的研究

通过花萼管注射技术，将牛胸腺ＤＮＡ与酪蛋白基因导入花生品种白少１０１６与鲁花１０号、Ｄ１代株形、分枝、果形、热性、育性等性状出现了较大的分离，总变异率为３４．１％－９４．１％，高于野生种ＤＮＡ导入后代及诱变处理后代的变异率。表明超远缘物种ＤＮＡ在促使花生栽培种产生广泛的遗传变异方面可能具有更大的利用价值。