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产肠毒素性大肠杆菌K99菌毛蛋白抗原基因的克隆与表达 总被引：4，自引：0，他引：4
应用PCR从产肠毒素性大肠杆菌（ETEC）中扩增出不含信号肽序列的K99菌毛蛋白基因片段，克隆测序后，将该片段连接到E.coli表达载体pET28a( )中，转化E.coli表达菌株BL21（DE3），筛选得到可诱导表达K99抗原的工程菌株。经IPTG诱导，分离纯化K99重组蛋白，以其免疫新西兰大白兔，获得重组蛋白的兔抗血清；免疫印迹分析表明，此重组蛋白制备的抗血清能与标准的K99强毒株姓明显的抗原抗体反应。 相似文献
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K88菌毛蛋白亚基基因克隆、表达及重组蛋白抗血清制备 总被引：5，自引：1，他引：4
利用ＰＣＲ技术,从仔猪黄痢的致病菌中扩增出不含信号肽序列的Ｋ８８菌毛蛋白亚基基因片段,将其克隆到Ｅ．ｃｏｌｉ表达载体ｐＥＴ２８ａ（＋）中,构建了该基因的原核表达载体ｐ８８２８,导入Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１（ＤＥ３）,得到工程菌株。ＤＳＤ－ＰＡＧＥ分析结果显示,经ＩＰＴＧ诱导,该亚基基因高效表达出重组Ｋ８８菌毛蛋白,约占菌体总蛋白的３０％。用含重组蛋白的凝胶作为抗原,免疫新西兰大白兔,首次制备Ｋ８８菌毛 相似文献
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