板栗针叶小爪螨体内Wolbachia的wsp基因序列测定与分析

以板栗针叶小爪螨为试虫,采用PCR扩增法,应用Wolbachia的wsp基因特异引物对我国部分板栗产区(北京密云南达峪村、山东泰安赵峪村与山东临沂柳条峪村)板栗园针叶小爪螨进行了检测,以期为通过分子生物学手段检疫鉴定针叶小爪螨提供参考依据。结果表明:在北京密云南达峪村与山东泰安赵峪村板栗园针叶小爪螨体内扩增出593bp Wolbachia的wsp基因;在山东临沂柳条峪村板栗园针叶小爪螨体内未检测到Wolbachia特征基因片段。利用所测序列和其它已发表的序列建立系统树,发现针叶小爪螨体内Wolbachia属于B大组的Epo小组。     

河南省刺槐良种调查报告

<正> 刺槐(Robinia Rseudoacacia、L.)生长迅速,木材坚韧、纹理细致、有弹性、耐水湿、抗腐朽,是我省主要速生用材树种之一。尤其对保持水土,防风固沙、改良土壤和“四旁绿化”更是理想的优良树种。目前,我省的剌槐仅在平原和“四旁”栽植就多达六亿五千万余株,仅次於杨树、株数居     

六省市刺槐考察报告

为了深入开展对刺槐优良品种的选育和推广,加快我省刺槐良种化的步伐,我们在各级党委的领导和支持下,于一九八一年十月中、下旬、考察了河南、安徽、江苏、山东、河北、北京等六个省市的刺槐良种选育概况,实地考察了良种坚定     

大力发展养羊业 迈出开发草山的第一步

<正> 我区是个人均四分田、六分地、五亩山的穷山区。过去我们靠700万亩耕地养活了700多万人口。但随着国民经济的不断发展。人口的不断增加,人民生活水平的不断提高和耕地的不断减少,仅仅依靠这700万亩耕地已经不行了,不得不在占     

在中温高湿地区大量引进和饲养新疆细毛羊取得成功

<正> 巫溪县红池坝畜牧场,1960年开始养殖甘孜藏系绵羊,1972年引种甘肃新疆细毛羊,1986年底存栏新藏杂种羊361只,1987年以来,先后从新疆、内蒙共引进新疆细毛羊2150只。1990年底存栏绵羊3765只,其中新疆细毛羊2700只。笔者从1987年开始对该场绵羊进行系统的适应性和生产性能观测研究。现将研究结果报告于后:一、牧地自然生态简况红池坝畜牧场地处大巴山东段南侧,地处东经103°53′～109°11′,北纬对31°30′～30°41′;海拔1780～2530米;年均气温7～11.5℃,月均最低-6.8℃,月均最高17.4℃;年降水量1756～2338毫     

李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP基因的克隆、原核表达及其抗血清制备

本研究通过RT-PCR技术获得了包含李属坏死环斑病毒怀柔分离物CP蛋白基因的DNA片段,构建了针对pET29a载体的两种表达质粒;〖JP2〗转化大肠杆菌BL21(DE3),并经IPTG诱导表达了带不同融合肽段的PNRSV1（25 ku）〖JP〗和PNRSV2（29 ku）融合蛋白。经过Ni NTA亲和柱与SDS PAGE分离纯化,获得大量表达融合蛋白,并免疫家兔制备了融合表达蛋白的特异性抗体。间接ELISA测定其效价分别为8×103和3.2×104。     

引进种质西瓜中黄瓜绿斑驳花叶病毒的检测

从日本引进的西瓜种子隔离种植后,采用生物学、双抗体夹心酶联方法及反转录PCR(RT-PCR)技术对其幼苗样品进行了黄瓜绿斑驳花叶病毒(Cucumber green mottle mosaic virus,CGMMV)的检测,结果表明:生物学试验接种的黄瓜健康植株全部发病;双抗体夹心酶联试验结果均为阳性;RT-PCR反应后进行1%琼脂糖凝胶电泳检测,结果出现预期的715 bp特异性扩增产物。3种方法均表明此次从日本引进的西瓜种质已经受到黄瓜绿斑驳花叶病毒的侵染,须做销毁处理。试验结果表明,采用3种方法中的2种对样品进行检测,即可以根据检测结果确诊被检对象是否带有CGMMV病毒。     

一种快速提取烟草病毒的方法

为寻找高效快速提取植物总RNA的检测方法,以白肋烟叶片为材料,用Trizol试剂盒提取总RNA。依据黄瓜花叶病毒和马铃薯X病毒的外壳蛋白保守序列设计特异性引物,进行RT-PCR检测,从感病叶片中分别扩增出326bp、392bp的目的片断,而对照叶片中无此扩增带。将PCR产物连接pGEM-T载体上,转化大肠杆菌DH5α,得到了含有目的片断的重组子。序列分析表明,与Gene Bank中报道的这两种病毒核苷酸序列进行比较,同源性均达到96%以上。从而证明Trizol试剂盒可以在1 h内提取到纯度高、含量高、完整性好的总RNA,快速、简便、可靠。     

地黄病毒病的检测与初步鉴定

利用DAS-ELISA和RT-PCR等检测方法,对感染地黄病毒病的地黄进行检测和初步鉴定,并结合该病毒地黄分离物CP基因的克隆及序列分析进行验证。结果表明,烟草花叶病毒（TMV）为侵染地黄的主要病毒;扩增产物序列测定结果表明：TMV地黄分离物CP基因的核苷酸序列与GenBank上已登录的TMV其他株系CP基因核苷酸序列的同源性在85％～98％之间,氨基酸序列同源性在84％～98％之间,同源性较高。根据不同株系CP基因氨基酸序列进化树分析,推测该分离物可能为TMV的已有株系。