敌敌畏、敌百虫高效降解菌株DDB-1的分离鉴定及降解特性研究

从长期受有机磷农药污染的土壤中分离到一株能同时高效降解敌敌畏、敌百虫的菌株DDB-1，经过一系列生理生化实验和16SrDNA序列同源性分析，将该菌株鉴定为鞘氨醇单胞菌属（Sphingobiumsp．）。降解特性试验结果表明，菌株DDB-1能以敌敌畏和敌百虫为惟一碳源生长，初步推断菌株对敌百虫的降解有一条异于敌敌畏的降解途径；在25～42℃，pH6．5～8．5时降解性能良好，pH的变化对敌百虫降解效果的影响要小于敌敌畏，对敌敌畏、敌百虫的降解有着较广的pH范围和温度范围，在较高浓度的污染环境下同样能进行降解；在pH7、37℃时，100mg·L^-1敌敌畏和敌百虫分别经过15和30h降解至检测不出，降解率达100％。在灭菌土壤的农药降解试验中，100mg·L^-1敌敌畏和敌百虫分别经过5和7d降解至检测不出，降解速率远远超过不接菌土壤的敌敌畏、敌百虫降解速率，降解率达100%。该菌株在实际应用中有着很好的应用价值。     

钙和钙调素拮抗剂对高温胁迫下茄子幼苗抗氧化系统的影响

 以耐热性不同的农友茄和二苠茄幼苗为材料，研究了钙、钙调素拮抗剂三氟拉嗪（TFP）和W7[N-（6-aminohexyl）-5-chloro-1-naphthalene sulfonamide]预处理对高温胁迫下（40℃/40℃，昼/夜）茄子幼苗丙二醛（MDA）、超氧阴离子（O2-·）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化物酶（POD）、谷胱甘肽（GSH）和脯氨酸（Pro）含量的影响。结果表明，随着高温胁迫时间的延长，TFP和W7浸种处理显著提高了茄子幼苗MDA含量和O2-·产生速率，同时，对SOD和POD活性产生抑制作用，加剧了GSH的破坏和Pro的积累；而Ca2+处理显著降低了高温胁迫下茄子幼苗MDA含量和O2-·产生速率，提高了SOD和POD活性，减轻GSH的破坏，延缓了Pro的积累。相同处理条件下，耐热品种农友茄较热敏感品种二苠茄伤害程度轻，这表明Ca2+-CaM信使系统可能通过提高抗氧化酶活性、调节抗氧化剂含量、降低膜质过氧化水平来调节茄子幼苗对高温逆境的适应性。     

一株毒死蜱降解菌株Sphingomonas sp.Dsp-2的分离鉴定及降解特性

从长期受毒死蜱污染的污水处理池中分离到一株毒死蜱高效降解菌株,命名为Dsp-2。经生理生化和16S rDNA序列同源性分析,鉴定其为鞘胺醇单胞菌属(Sphingomonas sp.)细菌。该菌株能在24 h内完全降解100 mg L-1的毒死蜱,降解特性的研究表明:随着农药浓度的加大,绝对降解量也增大,但高浓度的毒死蜱会导致不能完全降解;起始接种量和降解毒死蜱的速率呈正相关;外加氮源营养能够明显促进降解;1 mmol L-1的Fe3 和Ni2 等对其降解性能有抑制作用。研究了Dsp-2在土壤中降解毒死蜱的效果。结果表明,Dsp-2在三种供试土壤中都能有效的降解毒死蜱,其中在潮土中降解的速率最快,且当毒死蜱的浓度范围在1~100 mg kg-1内Dsp-2都能有效的降解毒死蜱,7 d降解率达到85%~98%。     

土壤蜡蚧轮枝菌DNA提取方法的改进及其应用效果

土壤真菌分子生态学研究需要大量和高效地提取真菌的DNA。应用市售的一般试剂盒提取土壤虫生真菌DNA,常常存在得率和质量低的问题,甚至根本提取不到土壤真菌的DNA样品。针对这一问题,本研究对细胞破碎方式及后续DNA提取参数进行了一系列的改进和优化,建立了一套针对性的提取方法。该提取法对虫生真菌—蜡蚧轮枝菌纯培养物的灵敏度极高,可在10个孢子的条件下提取到DNA,而市售的试剂盒则不能提取到(试剂盒在107个孢子条件仍提不到DNA);该提取法对人工投菌土样的DNA提取灵敏度达到102个孢子/克土,所得的DNA纯度高,无明显抑制后续PCR扩增的物质;施用过蜡蚧轮枝菌的田间土样所得DNA样品可成功扩增出蜡蚧轮枝菌特异片段,而未施用过蜡蚧轮枝菌的田间土样所得DNA样品不能扩增出蜡蚧轮枝菌特异片段。本提取方法具有灵敏度和纯度高的特点,适用于土壤虫生真菌的分子生态学样品制备。