稻瘟病菌CAAX蛋白酶MoRce1的功能研究

 蛋白质的翻译后异戊烯化修饰(CAAX修饰)能够介导真核生物中许多重要蛋白质的亚细胞定位以及蛋白与蛋白间的相互作用。稻瘟病菌(Magnaporthe oryzae)引致的稻瘟病是水稻最重要病害之一,造成全球水稻严重减产。为深入了解稻瘟病菌致病机理,更好地防控稻瘟病,我们研究了异戊烯修饰是否影响稻瘟病菌的生长发育和致病性。首先从稻瘟病菌基因组数据库中鉴定到一个稻瘟病菌的异戊烯蛋白酶MoRce1,同源比对发现MoRce1保守结构域在各物种之间变化较大,猜测在不同物种中该蛋白可能出现了功能分化。经同源重组方法敲除MoRCE1基因,发现MoRCE1缺失突变体在胁迫培养条件下细胞壁完整性明显缺陷,但是对营养生长、产孢、萌发以及致病性没有明显影响,说明MoRce1蛋白可能通过参与稻瘟病菌细胞壁合成相关蛋白的异戊烯化修饰进而影响该菌细胞壁的完整性,其具体机制还有待深入研究。     

布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0742基因的原核表达及功能分析

为构建布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0742基因的原核表达载体,并进行表达、鉴定。从羊种布鲁氏菌(Brucella melitensis)16M株的基因组中克隆BMEI0742基因片段,亚克隆到pMD19-T载体中并测序,克隆至表达载体pET-28a,构建重组质粒pET-28a-BMEI0742利用大肠杆菌进行表达,并进行Western-Blot检测,对该蛋白功能进行生物信息学分析。成功构建了pET-28a-BMEI0742原核表达载体,SDS-PAGE检测结果显示,重组蛋白的分子量约是50 ku,BMEI0742蛋白可与布鲁氏菌阳性血清发生特异性反应,表明其具有良好的反应原性。生物信息学分析显示,该蛋白无跨膜区结构,不存在信号肽,二级结构以α-螺旋为主并利用Phyre2服务器成功构建了该蛋白的三维模型。本研究成功表达了布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统蛋白BMEI0742基因,并成功获得了BMEI0742蛋白,该蛋白具有与布鲁氏菌自身蛋白相同的抗原性,为布鲁氏菌翻译延伸因子Tu,为进一步研究其免疫性和保护性以及在布鲁氏菌的致病机制奠定基础。     

利用CRISPR/Cas9技术敲除RNA甲基化酶TRDMT1基因及其功能初探

为构建TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系,利用CRISPR/Cas9系统在TRDMT1基因第1个外显子前插入BGH Ploy(A)转录终止序列,终止TRDMT1基因表达。利用重叠PCR方法合成sgRNA序列,构建TRDMT1-gRNA载体及含不同抗生素基因的同源重组载体TRDMT1-LOXN-Puro和TRDMT1-LOXP-Neo;将同源重组载体TRDMT1-LOXN-Puro、TRDMT1-LOXP-Neo及TRDMT1-gRNA、Cas9表达载体MLM3613共转染HEK293细胞;利用Puromycin和Neomycin抗生素筛选细胞,通过RT-qPCR检测TRDMT1基因转录终止效率。通过细胞生长曲线和划痕试验检测TRDMT1基因敲除对HEK293细胞增殖和迁移能力的影响。结果表明:成功构建了TRDMT1-gRNA载体及TRDMT1-LOXN-Puro、TRDMT1-LOXP-Neo同源重组载体;与正常HEK293细胞相比,试验组TRDMT1表达量仅为1%;TRDMT1基因敲除后显著影响HEK293细胞增殖和迁移。这一研究通过CRISPR/Cas9技术成功构建了TRDMT1基因敲除的HEK293细胞系(HEK293-TKO),为RNA甲基化研究提供了一种有效的工具;TRDMT1基因可能与细胞的增殖和迁移有关。     

特长果、特高产鲜食线椒新品种苏润001的选育

为适应市场对优质、长果、多抗、专用型的鲜食线椒品种需求,2011年秋以SR1301为父本、SR908为母本选育的杂交一代新品种苏润001,于2018年4月23日获得了农业部非主要农作物品种登记证书,证书编号为(2018)320462。该品种平均株高100 cm,株幅87 cm,鲜椒单果质量24 g,果长32 cm,果宽1.8 cm,肉厚0.2 cm;2018年生产试验前期平均产量为26 553.2 kg/hm~2,比对照8819线椒增产34.5%,总产量为64 918.8 kg/hm~2,比对照8819线椒增产33.3%,产量突出。2015-2018年试验中,苏润001病毒病、疫病、炭疽病平均病情指数依次为3.3、7.1、7.2,比对照8819线椒分别减少24.9%、12.3%、17.0%,适合贵州省春秋保护地及露地高效栽培。     

荞麦品种筛选试验初报

试验对引进西北农林科技大学的7个荞麦品种对比筛选,结果苦荞西农9909丰产性突出,平均产量2 824.5 kg·hm~(-2),增产显著。西农T1321花色桃红鲜艳,花期长,作为观光品种特色明显。     

宁夏泾源地区大红袍花椒秋栽技术及成活率观测

文章从园址选择、选种、栽植,以及后期管理、病虫害防治等方面介绍了宁夏泾源地区大红袍花椒秋栽技术要点,同时对其成活率进行了观测,旨在为大红袍花椒推广种植提供借鉴参考。     

食品营养与检测专业中高职课程衔接的探讨

中高职衔接是满足社会对高端技能型人才的需要,是完善现代职业教育体系的必然要求。分析中高职衔接模式、现状,重点探讨食品营养与检测专业中高职课程衔接。     

基于绿色冶金机械设计的关键技术初探

在社会经济的发展过程中,冶金制造行业拥有良好的发展前景。为了实现我国的可持续发展目标,冶金制造行业应该对机械设计技术进行不断的创新,结合绿色设计理念,以适应社会经济对冶金制造行业发展的新的需要。     

TNF-α基因表达量对大围山微型鸡及武定鸡股骨强度的影响

家禽骨质特性是家禽重要的经济性状指标,研究显示肿瘤坏死因子α(TNF-α)对人类及动物骨代谢有显著影响。为了揭示影响家禽骨强度的主效基因,研究以体重较轻、体型较小的大围山微型鸡以及大型鸡种武定鸡为研究对象,和艾维因肉鸡作对比,通过检测骨强度以及骨骼中TNF-α基因的表达量,研究TNF-α基因的表达量对大围山微型鸡和武定鸡股骨强度的影响。结果显示,4~16周龄大围山微型鸡股骨强度均显著高于武定鸡和肉鸡(P0.05),且武定鸡股骨强度高于肉鸡;每一阶段大围山微型鸡股骨软骨中TNF-α基因m RNA表达量显著低于其它两个鸡种(P0.05);相关分析显示TNF-α基因的表达水平与股骨强度指标呈负相关。可见,TNF-α基因对家禽的骨强度有重要影响,是影响家禽骨强度的重要候选基因。     

浅谈生猪腹泻病的原因及防治措施

随着时代的发展与进步,人们的生活水平在不断提高,对于生活各个方面的质量要求也越发严格,社会对于猪肉的需求也越来越多,并且由于我国生猪养殖产业的不断改革与发展,对于生猪养殖产业的关注也在增加,相关管理要求也越发规范和严格。但是,在生猪养殖中还存在许多问题,如现在我国生猪腹泻病十分严重,不但造成生猪大量伤亡,还给生猪养殖户带来很大的经济损失,导致猪肉市场供应出现问题,市场价格浮动过大,影响市场经济的稳定性。