粮食污染物残留免疫分析技术研究与示范

随着人们对粮食安全问题的重视,政府部门不断加强对粮食安全的监测工作。针对粮食生产、加工、储运过程中的化学污染物安全性问题,研究粮食污染物快速监测技术,研究污染物免疫分析方法通过利用抗原、抗体的特异性反应来检测农药含量,设计并筛选吡虫啉、多溴联苯醚、功夫菊酯、氰戊菊酯4种半抗原,制备相关高特异性的抗体,分析吡虫啉、多溴联苯醚、功夫菊酯与气相色谱法(GC)相比,稻谷、大米、玉米样品通过相关性分析均高度相关,操作简便、快速。     

人工雌性激素己烯雌酚单克隆抗体的制备及表征

合成了己烯雌酚的半抗原CP-DES,并将半抗原与牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)共价偶联制备免疫原和包被原。将免疫好的Balb/c小鼠脾脏细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,筛选出了1株能稳定分泌己烯雌酚单克隆抗体的杂交瘤细胞株2D87C412C7。分析该杂交瘤细胞的染色体,并以间接酶联免疫吸附分析法(iELISA)检测了单克隆抗体免疫球蛋白的类型。获得的杂交瘤细胞的平均染色体数目为45-50对左右,它分泌IgG1亚类的单克隆抗体。该细胞株体外传代和冻存复苏后抗体分泌稳定,细胞上清效价大于640,诱导腹水效价大于108,该单克隆抗体的检测限IC20=2.3ng/ml,与己烯雌酚结构类似物存在一定的交叉反应,与两种载体蛋白(BSA,OVA)无交叉反应。本研究为己烯雌酚ELISA检测方法的建立提供了条件。     

水体的多氯联苯(PCBs)污染及其分析方法评价

多氯联苯(PCBs)的生物毒性对生态环境和人体健康造成极大的威胁,国内外许多水体都不同程度地受到PCBs的污染。在介绍PCBs污染研究的分析方法包括色谱分析法、生物分析法和免疫分析法的基础上,对各种分析方法的优缺点进行了评述,并提出我国今后PCBs分析方法的研究方向,为建立高效快速的PCBs分析方法提供了依据。     

农药免疫分析技术的发展及应用

介绍了国内外农药免疫分析技术的发展及应用状况,同时指出了农药免疫分析存在的一些问题及应用前景。     

1961—2015年各国化肥消费量与人均GDP相关性分析

我国已经连续30年成为世界化肥消费量最大的国家，单位面积化肥施用量也长期居世界高位水平，化肥的过量施用既造成严重的农业面源污染，也制约着我国农业的可持续发展。本研究收集了美国、加拿大等12个典型国家1961—2015年的人均GDP和化肥消费量的时间序列数据，通过回归分析法得出各国人均GDP与化肥消费量显著相关（P<0.05），发达国家的人均GDP在8000~13 000美元区间时，化肥消费量由增长阶段进入稳定或降低阶段。从我国目前人均GDP（>8000美元）的发展水平与世界发达国家化肥的历史消费轨迹来看，我国的化肥消费量已经具备了从增长阶段转变到稳定阶段的条件。     

动物性产品中硝基呋喃类抗生素残留检测方法研究进展

对动物性产品中硝基呋喃类抗生素及其代谢物的残留及其危害进行综述,分别介绍了高效液相色谱、液相色谱质谱联用、液相色谱串联质谱和酶联免疫吸附分析等目前检测硝基呋喃类抗生素及其代谢物的残留的常用方法,同时对此类检测方法的发展趋势进行了展望。     

己烯雌酚多克隆抗体的制备研究

合成了具有己烯雌酚基本分子结构特性并带有一个羧基活性基团的半抗原CP-DES,用混合酸酐法将其与BSA偶联后免疫6只BALB/c雌性小鼠,获得了特异性的己烯雌酚多克隆抗体。以所得抗体建立间接竞争性酶联免疫吸附分析法(cELISA)用于己烯雌酚的检测,最低检测限为0.04 ng.mL-1。交叉反应表明,己烯雌酚的特异性抗体与其结构类似物无明显交叉反应。     

气相色谱-质谱法测定水-沉积物系统中39种农药残留

建立了气相色谱-质谱(GC-MS)同时测定水体和沉积物中39种农药残留的检测方法。水体样品由乙酸乙酯萃取,无水硫酸钠干燥;沉积物样品经乙腈超声提取,采用N-丙基乙二胺(PSA)和石墨化碳黑(GCB)净化,选择离子监测模式(SIM)进行检测,外标法定量。结果表明:39种农药在10~1 000 μg/L范围内线性关系良好,决定系数(R2)均大于0.9950。空白水样在0.25、0.5、5.0 μg/L 3个添加水平下的平均回收率在72%~111%之间,相对标准偏差(RSD,n = 5) 在1.1%~10%之间,检出限(LOD)为0.02~0.06 μg/L,定量限(LOQ)为0.04~0.18 μg/L;空白沉积物在5.0、20.0、100.0 μg/kg 3个添加水平下的回收率在65%~119%之间,RSD (n = 5)在2.1%~12%之间,LOD为0.7~1.5 μg/kg,LOQ为2.1~4.3 μg/kg。该方法灵敏、准确,结果可靠,可满足水体和沉积物中39种目标农药的残留分析要求。     

杀虫剂西维因特异性多克隆抗体的制备及鉴定

采用室内实验方法,合成了保留有西维因分子结构特性的半抗原———6-(1-萘氧基甲酰胺)-己酸,将其与BSA偶联后免疫两只兔,获得了特异性的西维因多克隆抗体。对抗体进行纯化及鉴定,在优化条件下,用间接酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测了西维因的浓度,西维因的最低检测限达14ng·mL-1。     

粮食安全监测免疫分析技术研究

研究建立了吡虫啉与噻虫嗪的间接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)方法,并用于粮食样品中农药残留检测,采用杂交瘤技术制备了吡虫啉和噻虫嗪的单克隆抗体,用方阵法筛选包被抗原与抗体的浓度,在优化条件下建立了两种杀虫剂的间接竞争抑制曲线,吡虫啉间接竞争ELISA方法的抑制中浓度IC50 =6.5 ng/mL,最低检测限IC10=0.68 ng/mL,噻虫嗪间接竞争ELISA方法的抑制中浓度IC0 =0.57 ng/mL,最低检测限IC10 =0.08 ng/mL,粮食样品中吡虫啉和噻虫嗪的添加回收率在87％～112％之间.对本试验所采集的12个粮食样品进行检测,均未检测到农药残留.在实际生产、生活中,粮食中的有机磷农药污染已经对人们的身体健康构成了严重的威胁,有必要采取有效检测有机磷农药的手段,加强对粮食中农药残留检测的力度,能控制、预防人员中毒,对保障人们的安全有重要意义.