昆明10种草坪草的ISSR指纹图谱构建

草坪业在发展过程中出现一些种的混淆,为了区分不同草坪草,采用昆明常见的10种草坪草为样本,利用简单重复序列(inter-simple sequence repeat,简称ISSR)分子标记技术构建昆明地区常见草坪草的指纹图谱。从28条引物中筛选出15条特异性较好的引物,对其进行退火温度筛选。结果表明,引物UBC834、UBC842、UBC844退火温度分别为58、58、55℃时多态性较好。对引物UBC834、UBC842、UBC844的电泳图谱进行0、1读带,构建了3个草坪草的数字指纹图谱,可以将供试的10种草坪草全部区分开来。     

云南大围山金花茶种质资源的ISSR分析

为了研究云南大围山金花茶种质之间的亲缘关系,以及云南大围山金花茶与广西金花茶种质之间的亲缘关系,本研究采用ISSR分子标记的方法,对云南大围山金花茶及广西金花茶种质资源进行分析。分析显示,13条ISSR引物共扩增出264条DNA条带,其中多态性条带262条,平均多态性百分率为99.2%。聚类分析将云南大围山金花茶与广西金花茶分为两类,广西金花茶与云南金花茶亲缘关系较远,云南大围山金花茶可进一步分为两个亚类。     

紫果西番莲种子萌发及根部诱导愈伤组织研究

以西番莲种子为试验材料,在不同的赤霉素浸种时间及不同种子处理方式条件下,进行西番莲种子萌发试验,并利用发芽种子的根进行愈伤组织诱导.结果表明,将西番莲种子剥壳后置于MS培养基中萌发,是西番莲种子萌发的最适方式.根部愈伤组织诱导的最适培养基为MS +0.5 mg/L2,4-D,诱导出的愈伤组织多为浅绿色,颗粒状,质地疏松.     

5种植物花瓣ACS基因的克隆与分析

分析已发表的植物1-氨基环丙烷-1-羧酸（ACC）合成酶（ACS）基因序列,设计一对简并引物,在随机选择的非洲菊、月季、桂花、茶梅和山茶等5种植物花瓣cDNA中进行PCR扩增．结果表明,在5种植物花瓣中都能扩增出约800bp的特异片段,登录GenBank发现均未被注册,因此将序列提交到GenBank并获得了序列号．在NCBI上进行Blast比对,发现所克隆的5个Acs基因均与其他植物花瓣的ACS基因有一定的序列相似性,最高达94％,最低为80％．将5个ACS基因的片段进行多序列比较分析,发现茶梅ACS基因与山茶ACS基因的序列差异最小,序列相似性达99％．本试验设计的ACS基因简并引物在植物中有一定的通用性,后续可以适当调整引物的简并度,以得到高通用性的简并引物．     

3种杨梅种子发芽的比较试验

研究比较了浓硫酸预处理不同时间对3种杨梅种子离体条件下发芽率的影响,为建立杨梅组织培养快繁体系奠定基础。结果表明:云南野生杨梅种子在不用浓硫酸处理下的发芽率最高,达83.33%;荸荠种和东魁2种杨梅种子发芽率较低,分别为27.78%、5.56%。云南野生杨梅种子及东魁杨梅种子不经浓硫酸处理可以完成发芽,荸荠种杨梅种子通过浓硫酸处理6 min可以促进萌芽。     

基于葡萄柚叶片离体再生体系的研究

以10个葡萄柚品种种子萌发的无菌苗叶片为外植体,研究葡萄柚的离体再生体系。结果表明:在MS+1.0 mg/L 2,4-D+6%蔗糖培养基上,8个葡萄柚品种能诱导出愈伤组织,其中"星路比"品种诱导率最高为46.67%,将诱导的愈伤组织转移至相同培养基中可继代增殖;"帕利斯"、"星路比"、"泰国种"3个品种的叶愈伤组织接种于MS+3.0 mg/L 6-BA分化培养基上可分化出丛生芽,这些丛生芽在MS+0.2 mg/L 6-BA培养基上平均可增殖4~6个芽;丛生芽在1/2 MS+1.0 mg/L IBA生根培养基上可诱导出不定根。炼苗后,田间移栽成活率为78.18%。为后续葡萄柚良种选育及遗传转化体系的建立奠定基础。     

西双版纳海巴戟炭疽病和病原菌分生孢子萌发、附着胞形成条件的研究

对西双版纳海巴戟炭疽病进行调查和病原菌鉴定。结果表明,海巴戟炭疽病周年发生,8月的发病率和病情指数最高,分别为40.76%和8.9。根据病原菌形态特征,将其鉴定为瓜类炭疽菌［Colletotrichum orbiculare (Berk. &; Mont)］。有关温度、pH、光照和碳源对病原菌孢子萌发和附着胞形成影响的研究显示,20～35 ℃,海巴戟炭疽病菌分生孢子萌发率高,20 ℃是形成附着胞的最适温度;最适合海巴戟炭疽病菌分生孢子萌发和形成附着胞的pH为4～8;在日光灯连续光照、12 h光暗交替和自然光照射条件下分生孢子萌发率在90%以上,光照对此病原菌附着胞形成的影响差异不大;1%葡萄糖、麦芽糖、蔗糖、D果糖和α 乳糖溶液中孢子萌发率都不高。     

诺丽Actin基因片段克隆及实时荧光定量PCR方法的建立

为了解决诺丽实时荧光定量PCR(q RT-PCR)检测中无内参基因的现状,根据其他植物Actin基因的保守序列设计一对简并性引物,以诺丽果实总RNA反转录成c DNA为模板,进行PCR扩增,扩增出的基因片段克隆到p MD-18T载体,阳性克隆经PCR鉴定后测序。序列结果表明:该片段长393 bp,编码131个氨基酸;所得序列与麦蓝菜actin 1有最高的一致性(96%)和相似性(98%)。q RT-PCR结果表明,诺丽Actin基因在诺丽的各个组织、果实不同发育时期都能稳定表达,且表达水平基本一致,适合在诺丽基因表达研究中作为内参基因。     

油用牡丹凤丹种子休眠解除及组织培养研究

以油用牡丹凤丹种子为材料,分析微波辐射及赤霉素浸泡处理对其休眠解除的影响,并在此基础上探讨在组培离体再生中不同激素配比对解除休眠处理种子的胚萌发、丛生芽诱导以及生根率的影响。结果表明:在1000 mg·L^-1赤霉素(GA 3)浸泡24 h后,凤丹种子的萌发效果最佳培养基为WPM+1 mg·L^-1 PVP+5 mg·L^-1 GA 3+1.5 mg·L^-16-BA+5 mg·L^-1 Ca(NO 3)2;丛生芽诱导增殖培养基为WPM+1.5 mg·L^-1 IBA+2 mg·L^-16-BA+2 mg·L^-1 PVP+250 mg·L^-1 Ac,增殖系数为2.20;诱导丛生芽生根培养基为WPM+2 mg·L^-1 IBA+1.5 mg·L^-1 NAA,生根率为55.56%。