湖羊胚胎和精液超低温保存效果的评价

【目的】 检验长期保存在国家家畜基因库的湖羊冷冻胚胎和冷冻精液的质量,评价超低温冷冻保存技术保种的效果。【方法】 对保存于国家家畜基因库的冷冻胚胎（保存20年）和冷冻精液（保存20和30年）进行复苏,进行相应鉴定后分别进行胚胎移植和人工授精,同时以0年冷冻精液和新鲜精液为对照,测定其受胎率和后代的羔皮性能、生长性能及繁殖性能,检验保存效果。【结果】 本试验共解冻胚胎36枚,其中,A级胚胎22枚,B级胚胎7枚,C级胚胎5枚,D级胚胎2枚,冷冻胚胎复苏利用率达到94.44%（34/36）,A级胚胎率达到61.11%（22/36）,移植34枚,产羔17只,冷冻胚胎复苏移植产羔率达50.00%;保存30年的冷冻精液复苏后平均精子活力达35%,受胎率为58.57%,平均产羔1.90只;保存20年冷冻精液复苏后平均精子活力达31%,受胎率为53.66%,平均产羔1.95只;胚胎复苏移植羊、30和20年冷冻精液后代体型外貌鉴定均符合纯种湖羊特征,没有畸形个体;羔羊一级羔皮率分别是31.25%、42.03%和23.81%,保持了当年湖羊的羔皮特性;生长发育及繁殖性能与现有湖羊群体性能基本保持一致。【结论】 利用超低温冷冻技术长期保存湖羊冷冻胚胎和冷冻精液的方法是可行的,对地方品种保种具有重要意义。     

湖羊不同花纹羔皮毛囊组织学研究

为研究湖羊不同羔皮花纹(大花和小花)毛囊间的差异性,本实验采集出生后2 d的羊背侧部皮肤,利用组织学和显微观测的方法,分析湖羊羔皮初级毛囊数、次级毛囊数、初级毛囊直径、次级毛囊直径等组织学特性。结果表明:在相同视野中,湖羊小花毛囊总数多于大花(P>0.05),小花组初级毛囊、次级毛囊直径(P<0.01)均小于大花组,初级毛囊数与次级毛囊数比值小花显著高于大花组(P<0.05);在单位面积中,小花组毛囊总数、初级毛囊数与次级毛囊数比值大于大花组,表明小花组产绒量高,由次级毛囊产生的无髓毛少,羔皮质量优。皮肤毛囊的这些组织学特性是决定湖羊大花、小花羔皮品质差异的重要因素,本研究可为选育优良羔皮奠定理论基础,为进一步筛选导致大花、小花羔皮差异的功能基因提供资料。     

涪陵水牛mtDNA D-loop区遗传多样性研究

利用测序技术和生物信息学分析技术,对涪陵水牛27个个体的线粒体DNA D-loop 915 bp全序列的遗传多样性及系统进化进行分析,检测到16种单倍型,其核苷酸多态位点48个,约占所测核苷酸总长的5.24%,其中有43个转换,5个颠换。涪陵水牛mtDNA D-loop区核苷酸多样度(π值)为0.0196±0.0020,单倍型多样度(H)为0.9060±0.0460,表明涪陵水牛mtDNA遗传多样性丰富。根据单倍型构建了涪陵水牛的NJ分子系统树,发现存在沼泽型水牛支系A和B,表明涪陵水牛具有2个母系起源。     

猪肺炎支原体P97单抗的生物学特性鉴定及初步应用

对已成功制备的猪肺炎支原体P97原核表达产物单抗进行生物学特性鉴定。鉴定结果为:两株单抗的免疫球蛋白亚类均为IgG1,亲和常数分别为52 mg/L,46 mg/L。单抗腹水中的间接ELISA效价分别为1×106和1×105。两株单抗特异性的识别猪肺炎支原体168株97kD左右的抗原成分。在Dot-ELISA试验中,两株单抗均与猪肺炎支原体反应,而与猪鼻支原体(Mh)、猪絮状支原体(Mf)和鸡毒支原体(Mg)无交叉反应。进一步将该单抗用于单抗阻断ELISA中,检测了36份血清样,其中9份呈阳性,检测结果与IDEXX公司猪肺炎支原体抗体检测试剂盒的结果基本吻合,从而为猪肺炎支原体诊断试剂盒的研制及猪气喘病早期诊断方法的建立奠定了基础。     

安徽省凤阳县小岗村跨越式发展模式探究

凤阳小岗村作为中国农村改革的发源地,三十年来,尽管纵向比较取得了长足的进步,但横向相比还存在较大差距。探究小岗村“先行”未能“先富”的深层次原因,提出实现小岗村跨越式发展的模式,不仅对小岗村的发展而且对全国农村改革和发展都具有借鉴价值。     

湖羊羔皮候选基因在不同花纹间的表达与毛囊发育特性关联的研究

【目的】研究5个候选基因在不同花纹组间的表达量与毛囊各指标的相关性,进一步了解候选基因与毛囊发育特性间的关联,筛选用于后期功能验证的基因。【方法】利用荧光定量PCR技术检测5个基因在不同组别间的表达量,结合组织学与显微观测技术,分析5个基因与毛囊发育间的关联。【结果】湖羊毛囊成群分布,湖羊大花、小花、中花多以3毛囊群居多,直径较大的为中心初级毛囊,直径相对较小的为侧部初级毛囊。湖羊大花与中花、小花初级毛囊直径呈极显著差异（P＜0.01）,小花与中花初级毛囊直径差异不显著（P＞0.05）。中花次级毛囊直径与大花、小花次级毛囊直径呈极显著差异（P＜0.01）,但小花次级毛囊直径与大花次级毛囊直径差异不显著（P＞0.05）。初级毛囊数大花、中花、小花间差异均不显著（P＞0.05）,但相同视野中大花初级毛囊数多于中花、小花。中花次级毛囊数与大花、小花次级毛囊数呈极显著差异（P＜0.01）,但大花、小花次级毛囊数差异不显著（P＞0.05）;MMP2基因在中花皮肤组织中的表达量与大花、小花分别呈极显著差异（P＜0.01）,在大花皮肤组织中的表达量与小花差异不显著（P＞0.05）;BMP7基因在大花皮肤组织中的表达量与小花呈显著差异（P ＜0.05）,在中花皮肤组织中的表达量与大花、小花分别差异不显著（P＞0.05）;SFXN1基因在小花皮肤中的表达量与大花、中花分别呈显著差异（P＜0.05）,在大花皮肤组织中的表达量与中花差异不显著（P＞0.05）。其余基因在3组个体间差异不显著;MMP2基因相对表达量与大花次级毛囊数呈显著正相关（P＜0.05）。BMP7基因相对表达量与小花初级毛囊直径呈显著正相关（P＜0.05）,与小花次级毛囊数呈极显著正相关（P＜0.01）,与中花初级毛囊直径、次级毛囊数呈显著负相关（P＜0.05）;SFXN1基因相对表达量与大花初级毛囊呈显著负相关（P＜0.05）,与小花初级毛囊直径、小花次级毛囊直径分别呈显著正相关及极显著正相关,与中花初级毛囊直径呈极显著负相关。在BMP7基因表达量相同情况下,小花初级毛囊直径比中花初级毛囊直径大,小花次级毛囊数比中花次级毛囊数多,这与切片结果相符。MMP2基因在表达量相同情况下大花毛囊数多于小花,中花最少,这与切片结果一致。此外,在SFXN1基因表达量相同情况下,小花毛囊直径最大,大花次之,中花最小,这虽与切片结果不相符,但大花、小花次级毛囊数相差很小,总体来说趋势相同,结果基本相符。其余基因虽与毛囊相关指标存在关联,但在大中小花组表达差异不显著,【结论】BMP7、MMP2、SFXN1三个基因可作为湖羊早期羔皮选育的重要候选基因。     

黄酮类化合物抑菌抗病毒活性的研究

近年来,天然抑菌抗病毒药物的研究与开发成为热点,尤其是低毒广谱的黄酮类化合物更是引起研究者的重视。综述了黄酮类化合物的抑茵抗病毒活性研究进展及其可能的作用机制,以期为黄酮类化合物在抑菌抗病毒新药开发领域的应用提供参考。黄酮类化合物抑菌活性抗病毒活性     

绵羊YAP1基因全长cDNA克隆及生物信息学分析

【目的】克隆绵羊YAP1基因cDNA并分析其序列及其蛋白的遗传特性及其在不同组织中不同程度的表达情况。【方法】以湖羊为研究对象,利用RT-PCR和RACE技术获得绵羊YAP1序列,并结合生物信息学方法对绵羊YAP1的序列进行深入分析。【结果】从湖羊背最长肌中克隆YAP1基因的全长cDNA序列;利用生物信息学技术,对绵羊YAP1基因与其它物种的同源性,蛋白质序列的跨膜区,亚细胞定位,亲水性,潜在信号肽剪切位点,糖基化位点,磷酸化位点,编码产物进行功能预测分析,及其编码蛋白的二级结构,三级结构等进行分析。【结论】克隆获得绵羊YAP1基因序列全长为1 712 bp,包括1 212 bp的编码区序列,编码403个氨基酸。同源性分析发现,绵羊YAP1核苷酸序列与推测氨基酸序列与灰仓鼠的同源性最高,分别达到78.77%和92.51%,而与人、黑猩猩的一致性差异较小。氨基酸序列分析发现该基因编码蛋白为水溶性蛋白,相对分子量为44079.0Da,理论等电点为4.91,无信号肽序列和跨膜区;亚细胞定位主要在细胞核,不属于分泌蛋白;预测含有33个磷酸化位点,7个糖基化位点,具有两个WW结构域,二级结构以无规则卷曲为主,三级结构显示,YAP1结构域区构成弯曲状螺旋结构。预测YAP1蛋白主要在调节功能过程中有着关键作用。以上研究为进一步探讨YAP1基因在肌肉生长过程中的功能研究奠定了遗传信息基础。     

马齿苋黄酮抗氧化活性研究

为探讨马齿苋黄酮清除自由基、抑制油脂的脂质过氧化反应等体外抗氧化活性,分别采用Fenton体系法和邻苯三酚自氧化法及碘-硫代硫酸钠滴定法测定了马齿苋黄酮对羟基自由基、超氧阴离子的清除能力,以及对猪油氧化的抑制作用。结果表明,马齿苋黄酮对羟自由基、超氧阴离子有较好的清除效果。在供试浓度范围内对羟自由基的清除效率与黄酮浓度有一定量效关系,当黄酮浓度达0.56mg/ml时,清除率可达68.33%;而当黄酮浓度达0.56mg/ml时,对超氧阴离子的清除作用也最大,达82.26%。此外,马齿苋黄酮对油脂也表现出较强的抗氧化作用,可极显著地抑制猪油POV值的升高。