鸡传染性支气管炎病毒分子生物学研究进展(上)

鸡传染性支气管炎(Infections Bronchitis of chickens缩写为IB)是鸡的一种急性、高度接触性呼吸道和泌尿生殖道传染病.临诊上以气管罗音、咳嗽和打喷嚏为主要特征,幼鸡感染可致死亡,产蛋鸡群感染则导致蛋的产量和质量下降.主要侵害鸡的呼吸系统、泌尿系统、消化系统、生殖系统.传染性支气管炎病毒(IBV)属冠状病毒科,其血清型极为复杂,目前已知IBV有30多个血清型,不同血清型及变异株间抗原性差异很大,且不断变异,这就给IBV的诊断、免疫及IBV血清型分型带来很大的困难.该病对养鸡业危害极大,从而引起了国内外禽病工作者的高度重视.分子生物学研究进展(上).     

鸡传染性支气管炎病素分子生物学研究进展(下)

4 IBV基因组RNA的结构特征及生物学特性 IBV基因组为一线状单股RNA,5'端有帽子结构,3'端有聚(A)尾,具有感染性,故为正链,大小约20kb.Boursnell等(1987)测定了IBV的基因全序列,共有27608个核苷酸组成[包括聚(A)尾,不同毒株可能有差异],分子量为8md,它比目前所知的任何稳定的RNA病毒要大很多,IBV基因组被分为6个区域,至少有10个开放读码框架(ORF).     

影响鸡IBV血凝因素及HI试验抗原制备的研究

选择没有自然血凝性的三个标准IBV毒株(M41、Gray、T株)和四个由西北农大禽病研究室分离的陕西省地方株[X、Fu、W和H株(有自然血凝性)]，在非免疫鸡胚上增殖后，用蔗糖透析法浓缩10倍，再分别采用三种方法处理，制备IBV-HA抗原：1)用浓缩4倍的兔A型魏氏梭菌培养液滤液(R．W．F．C4)处理IBV；2)用2．5U／mlI型磷酸酯酶C(PLC1)处理IBV；3)用1％胰酶处理IBV。结果显示，除T株仍不具有血凝性外，其余毒株都有了较高的血凝价。IBVM41株、X株HA效价株高达2^8，Fu、Gray、W、H株的HA效价也达2^7—2^9。但是，用方法3)来制备HA抗原没有任何实用价值。因为1％胰酶本身具有非常强的非特异性凝集作用，非特异性HA价高达8log2。而采用R．W.F．C4和2．5U／ml PLC1处理IBV浓缩毒制得的IBV—HA抗原，除T株外，均能凝集鸡红细胞，且该凝集作用可被特异的IBV抗血清所抑制，而不能被ND、EDS—76、IBD等其它鸡病阳性血清所抑制，说明该抗原具有较强的特异性。本试验还对影响IBV血凝试验和血凝抑制试验的各种因素进行了研究。比较了用R．W．F．C4和用2．5U／ml PLC1处理IBV制备HA抗原血凝价，结果显示二者的血凝价是一致的，所以完全可以用廉价的兔A型魏氏梭菌培养液代替昂贵的PLC1作为抗原处理液。本试验还采用IBV—M41株和陕西省地方肾型株X株制备IBV—HA双价抗原，结果表明，用上述IBV—HA二价抗原所测出的各毒株抗血清的HA效价和用各毒株所制得的IBV—HA单价抗原所测出的相应毒株抗血清的HI效价差异不显著，说明IBV二价HA抗原的抗原交叉性广泛，可用于IB的免疫监测和诊断。本试验还将在同一条件下获得的免疫鸡血清分别采用HI和CEKC—SN二种方法所测得的抗体效价进行了比较，结果经统计学分析表明：HI效价与CEKC—SN效价呈正相关，相关系数为0．6585，且HI法比ECKC—SN法省时、省力。     

O型口蹄疫病毒VP1基因原核表达及蛋白纯化

以O型FMDV重组质粒pMD18T-O-VP1为模板，利用PCR技术扩增得到O型FMDV-VP1基因片段，将此基因片段与原核表达载体pET32a连接构建重组表达载体pEq32a-O-VP1，经PCR和测序鉴定后，用WIG诱导归1基因的表达，收集不同诱导时间的菌液，进行SDS-PAGE电泳，摸索掌握最佳诱导时间，切取最佳诱导时间电泳胶片做Westem-blotting，分析检验表达产物与其抗血清的反应性。结果显示，分子量约为45ku的蛋白条带反应显著，能被口蹄疫阳性血清识别，表明FMDV-VP1基因在大肠杆菌中得到高效表达，纯化复性的表达蛋白有望开发为诊断抗原和多肽疫苗。     

基因芯片及其在病原微生物检测中的应用

基因芯片是近年来迅速发展的一门生物高新技术,它以其能够快速、高效、大规模地同步检测生物遗传信息的卓越功能而得到发展。在基因测序、基因表达分析、药物筛选、基因诊断等领域显示出重要的理论和实用价值。作者就基因芯片技术的原理、技术要点以及在病原微生物检测中的应用作一综述。     

地方风味猪肉香肠中细菌的分离鉴定和环境因素对细菌繁殖的影响

香肠是将新鲜猪肉切成块后加入酱油、香辛料、白糖等配料制成馅,灌入肠衣,经风干或晾晒制成的一种风味食品。经过一定时间的日晒和晾挂过程,在适当的温度和湿度下,由于微生物和酶的作用,可使香肠中的蛋白质发生分解,促使香肠产生一种独特的     

鸡传染性支气管炎病毒实验室诊断技术研究进展

鸡传染性支气管炎病毒(ＩＢＶ)存在多种血清型,至今全世界至少已分离出３０个血清型和更多的突变株,而不同血清型甚至不同毒株之间的交互免疫力差,给该病的防治带来了极大的困难,使此病成为危害世界养禽业的主要疫病之一,如     

牛病毒性腹泻一黏膜病（BVD—MD）研究进展

本病是由牛病毒性腹泻黏膜病病毒引起牛、羊和猪的一种急性热牲传染病。牛羊发生本病时的临床特征黏膜发炎、糜烂、坏死和腹泻；猪则表现为怀孕母猪的不孕、产仔数下降和流产，以及仔猪的生长迟缓和先天性震颤等。     

多聚酶链反应及其在检测病原微生物上的应用

多聚酶链反应及其在检测病原微生物上的应用舒黛廉杨增岐（西北农业大学动物医学系陕西杨陵７１２１００）随着分子ＤＮＡ重组技术的发展，１９８５年Ｓａｉｋｉ等建立了一种称为多聚酶链反应（ＰＣＲ）的ＤＮＡ扩增新技术，这种方法近几年来在分子生物学和临床医学领域中...