水稻OsNHO1基因cDNA序列分离及表达分析

OsNHO1是一种甘油激酶,受多种因素的诱导,在植物先天免疫反应中起着重要的作用。笔者采用同源序列法,根据已报道的拟南芥NHO1基因序列结合水稻基因组测序结果,筛选水稻OsNHO1基因,采用RT-PCR获得水稻OsNHO1基因全长cDNA(1 590 bp,529AA),并通过半定量RT-PCR方法分析OsNHO1基因在SA,PXO99刺激下的表达模式,结果显示OsNHO1基因的表达受SA,PXO99的诱导,为进一步研究OsNHO1的具体功能和作用机理奠定了基础。     

盐胁迫对水稻幼苗生长及生理生化的影响

采用不同浓度(0、30、60、90、120、150mmol/L)的NaCl溶液对银晶软玉水稻进行盐胁迫处理,结果表明,水稻在NaCl浓度为30mmol/L时生长状况良好,但随着NaCl浓度的增加水稻的生长速度减慢。在一定范围内,POD和SOD的活性与胁迫强度成正相关,游离脯氨酸和可溶性糖的含量也随着NaCl浓度的增加而增加,而CAT活性却没有显示出一定的规律。     

红掌细菌性叶枯病病原菌的分离与鉴定

采用组织分离法,从发病的红掌叶片上分离、纯化病原菌,对纯化的病原菌进行菌落形态、致病性、生化特性测定,并对细菌特异基因ABC transporter进行分离及序列分析.结果表明,分离得到的病原菌为地毯草黄单胞菌属细菌,为红掌的致病菌.     

转录调控基因GmLEC1转化大豆及转化方法的比较

以高油大豆中豆30开花后30 d的发育种子为材料,根据已报道的拟南芥脂肪酸合成相关转录因子LEC1序列设计简并引物,采用同源序列法从大豆种子中分离了大小为850 bp的cDNA片段;采用Gateway技术构建RNAi表达载体pHGlec;分别利用大豆子叶节和胚尖为外植体进行农杆菌介导的遗传转化;以抗性芽获得率,PCR检测阳性率为指标,对转化系统进行优化。确定了6.0 mg.L-1的6-BA为胚尖转化法最佳激素配比;经PCR鉴定,优化后的胚尖转化法阳性苗获得率为7.58%,子叶节转化法转化率为1.86%。     

转录调控基因GmLEC1的cDNA克隆及其植物表达载体的构建

以高油大豆中豆32 开花后30 d的种子为材料,根据已报道的拟南芥脂肪酸合成相关转录因子LEC1序列设计简并引物,采用同源序列法从大豆种子中分离了大小为850 bp的cDNA片段,测序结果表明,该片段与拟南芥中已克隆的脂肪酸合成基因高度同源,包含完整的读码框,采用酶切连接和gateway技术构建了该基因的超量表达和RNAi植物表达载体.为借助农杆菌介导法将LEC1基因转化到大豆再生植株中,对分离的LEC1基因进行功能验证,培育高油大豆新品种奠定了基础.     

番茄ACC氧化酶基因cDNA的克隆及三种植物表达载体构建

乙烯在植物生长发育过程中发挥着重要的作用.ACC氧化酶是乙烯生物合成途径的限速酶.通过反义基因工程调控ACC氧化酶基因的表达,进而起到调控乙烯的生成是乙烯研究的主要途径.本研究采用RT-PCR方法获得番茄ACC氧化酶基因cDNA序列1 018 bp,构建该基因的正义、反义、RNAi表达载体,通过电转化法导入农杆菌LBA4404中.     

水稻OsMAPK17-1基因的分离及转基因研究

OsMAPK17-1作为一种MAP激酶，受多种生物和非生物胁迫的诱导，且对病原菌的侵染有一定的防卫作用。为研究水稻OsMAPK17-1基因的功能，通过RT-PCR方法分离OsMAPK17-1基因全长cDNA，分别构建过表达与RNAi植物表达载体，采用农杆菌介导法以粳稻日本晴为受体进行遗传转化，PCR检测具有潮霉素抗性基因的转基因水稻植株，结果表明：OsMAPK17-1基因及RNAi片段均已整合到水稻基因组中。利用PCR和RT-PCR的方法对转基因后代进行筛选，获得过表达和RNAi转基因纯系各1个，模拟干旱处理结果表明，RNAi株系在干旱处理下比对照更有利于根的生长，这些结果为进一步研究OsMAPK17-1基因的功能奠定了基础。     

红树植物盐胁迫适应机制研究进展

综述了与红树植物相关的耐盐响应机制,包括了形态结构、离子平衡、渗透调节、活性氧清除和分子水平5个方面,并对红树耐盐适应性研究进行了展望.     

角果木根系盐胁迫的防御机理

以强耐盐性红树植物角果木为研究对象,采用不同浓度的NaCl溶液(0,150,300,450mmol·L-1)对角果木幼苗进行盐胁迫处理,测定角果木根部的SOD,POD,ASA,MDA等生理指标。结果表明:角果木在适应盐环境的过程中有新的蛋白产生,在盐胁迫早期(≤9h)MDA含量急剧上升,这种信号诱导了抗氧化防御系统的启动,使角果木根部抗氧化酶类及抗氧化物质均有所增加,说明角果木盐胁迫下通过启动抗氧化酶类、抗氧化物质以清除活性氧对根部的损伤,而后开始适应外界盐环境。     

Ca~(2+)对NaCl胁迫下黄瓜幼苗耐盐性的影响

研究了NaCl和CaCl2共同胁迫对3个黄瓜(Cucumis sativus L.)品种幼苗期的生长指标、游离脯氨酸及可溶性蛋白质含量的影响。结果表明,新津春的耐盐性强于津优1号及蔬春。在相同浓度的Na+胁迫下,Ca2+加剧了Na+对黄瓜幼苗生长的抑制作用,且随着Ca2+浓度的升高,抑制作用越来越大;而Ca2+的加入对干物质的积累、游离脯氨酸含量的影响不大,叶片可溶性蛋白质含量反而显著升高。这表明Ca2+的加入通过抑制生长、减少消耗、增加可溶性固形物含量等途径降低了盐胁迫对植株的危害,增强了黄瓜对逆境的适应性。