正常和隐形乳房炎状态下围产期娟姗奶牛与荷斯坦奶牛能量状态、脂溶性维生素、急性期蛋白质的变化研究

通过一项严格控制条件的观察试验,建立了判定临产期能量负平衡、血脂、脂溶性维生素浓度以及急性期蛋白质含量与亚临床乳房感染之间的相关性。根据奶牛品种进行分组,并预计分娩日期,自奶牛断奶后观察8周。如果能在产后乳腺内分离到与预产期的前9周不同的病原菌,则判定为新形成的乳房感染。在前9周时奶牛的体况评分为3.71±0.12。共有15头娟姗奶牛与荷斯坦奶牛符合本文的标准。与正常奶牛相比,新的亚临床乳房炎奶牛具有较高的体况评分、体重和体重损失。处于新的亚临床乳房炎的娟姗牛临产期时,其血浆β-胡萝卜素含量比正常娟姗牛要高,同时高于同种状态下的荷斯坦奶牛。然而,与正常的娟姗牛相比,亚临床乳房炎的娟姗牛其血浆中β-胡萝卜素含量上升的较迟。正常奶牛在临产期体内血浆α-生育酚,乳清蛋白和维生素A结合蛋白浓度较高。新的亚临床乳房炎奶牛,其乳蛋白含量、乳糖含量以及乳尿N比正常奶牛要低,但体细胞数要高。如果临产期时奶牛组织能量贮备较高,且血浆蛋白、β-胡萝卜素以及血浆α-生育酚含量降低,则该奶牛在该时期患乳房感染的几率较高。     

奶牛plgR基因5''侧翼区SNP检测及其与IgA和IgM含量的相关性研究

本试验研究了pIgR基因5'侧翼区的多态性及其对IgA和IgM含量的影响.从NCBI上的MaP Viewer数据库下载牛pIgR基因的5'侧翼区的序列(NW_174143),长度为3.2 kb,设计4对引物进行PCR扩增,通过对25头奶牛的PCR产物直接测序发现并确定SNP位点,并用SNP Stream标签微列阵基因分型系统对189头牛进行基因分型,将其与牛奶和血液中的IgA和IgM的含量进行关联分析.结果表明,pIgR基因在-3128、-3072、-2834、-2348和-515位发现了5个SNP位点,其中SNPI和SNP2为A/G突变,SNP3、SNP4和SNP5为T/C突变.方差分析结果表明,SNPI对牛奶IgM和血液IgA含量有显着的影响(P<0.05),SNP3和SNP5对血液IgM含量有显着影响(P<0.05),其他SNP位点与单倍型组合对乳及血液中IgA和IgM的含量均没有显著影响(P<0.05);多重比较分析表明,SNPl位点的基因型AB个体与BB个体的牛奶IgM和血液IgA含量的最小二乘均数差异显著(P<0.05),SNP3和SNP5的不同基因型对血液IgM含量的最小二秉均数分别达到了显著水平(P<0.05).因此得出,牛pIgR基因5'侧翼区的多态性影响牛奶和血液中的IgA和IgM的含量,这为进一步研究牛奶中IgA和IgM分泌转运机理提供了理论依据.     

动物多聚免疫球蛋白受体研究概况

多聚免疫球蛋白受体（polymeric immunoglobulin receptor,pIgR）是主要组织相容性复合物（MHC）家族中的重要成员,是分泌性免疫系统（SIS）的重要组成成分,在IgA/IgM的转运和黏膜免疫中发挥着重要的作用。作者结合近年来的研究综述了pIgR的分子结构、生物学功能和研究概况。     

埋植抗原缓释剂ARD后牛乳特异性抗体效价评价

对奶牛埋植抗原缓释剂ARD(antigen release devise)生产免疫乳的高效性进行评价,随机选择40头成年健康荷斯坦奶牛,试验组20头奶牛于右侧髋内淋巴结处埋植3种释放时间不同的ARD,分别在埋植当天、14 d和28 d释放抗原,通过ELISA检测血清和乳清中特异性抗体的效价及消长规律。研究表明:埋植ARD免疫后,奶牛血清中特异性抗体滴定效价均明显升高,ELISA滴定效价平均为2×106。埋植后9 d便可检测到乳清中特异性抗体,其应答规律与3种ARD的释放一致,ELISA滴定效价平均可以达到4.1×104,可以达到2~3 d初乳的水平。试验结果说明了ARD生产免疫乳的高效性;通过比较血清和乳清中特异性抗体含量变化,发现在血清效价相同的情况下,奶牛个体对IgG的转运存在差异;ARD的缓释技术较为精确,缓释误差仅为2~3 d。     

不同热处理方式对牛奶中IgG和乳铁蛋白的影响

功能乳制品的加工失活是目前乳制品工业中的重要难题。本试验旨在研究不同热处理方式对于乳中活性物质免疫球蛋白(IgG)和乳铁蛋白(Lf)的影响。本研究参照目前乳品工业中常用的热处理方式,共选用12种温度和时间组合。结果表明,乳品加工过程中的均质化处理提高了乳中IgG以及Lf的活性;不同的温度与时间的热处理方式组合可以显著的影响乳中IgG和Lf的活性;综合考虑乳中IgG和Lf活性变化,本研究表明70～75℃,15s的加工工艺适合于这两种功能性蛋白的大规模工业化生产。     

免疫刺激后小鼠肝脏内参基因稳定性研究

实时定量PCR技术现已广泛应用于细胞或组织mRNA转录水平的检测和半定量。选择合适的内参基因可以消除不同标本在RNA的产量、质量以及逆转录效率上可能存在的差别,从而获得目标基因特异性表达的真正差异。本试验应用实时定量PCR技术,研究小鼠在经过免疫刺激后,B2M、ACTB、GAPDH、SDHA、HPRT1和ARBP共6个内参基因在肝脏中的表达情况。结果表明,这6个内参基因表达存在差异。经过geNorm程序统计学分析,确定了ACTB、GAPDH两个看家基因适用于校正目标基因的表达量,为研究小鼠免疫刺激后肝脏目标基因的表达奠定基础。     

常发性乳房炎对奶牛死亡率和淘汰率的影响

奶牛临床乳房炎可以影响奶牛场的经济效益,这不仅是因为造成产奶量降低和治疗费用增加,同时也会引起奶牛的淘汰。本试验的目的是检验常发性乳房炎对奶牛死亡率和淘汰率的影响。试验共从5个大型、高产奶牛场中选出16145头奶牛,其中在产后10个月内,发生1次乳房炎的有3036头,发生2次乳房炎的有758头,发生3次乳房炎的有288头。忽略个体效应,利用通用混合模型来分析临床乳房炎对奶牛死亡率和淘汰率的影响,同时考虑奶牛胎次、泌乳阶段和其它疾病等控制变量的作用。试验结果表明,临床乳房炎的发生显著提高了所有胎次奶牛的死亡率。在头胎奶牛中,1次乳房炎、2次乳房炎和3次乳房炎的比值比和95%的置信区间分别是5.6(1.7,18.0)、23.3(7.1,76.2)和27.8(3.7,209.9)。在经产奶牛组中,分别为9.9(7.4,13.2)1、2.0(8.0,18.0)和11.5(6.1,21.4)。临床乳房炎显著提高了乳房炎发生后2个月内奶牛淘汰的风险。在不考虑其它因素的情况下,这一研究不仅给奶农提供了奶牛乳房炎与奶牛死亡率和淘汰率关系的信息,同时也可以作为乳房炎控制方面的经济分析。     

埋植抗原缓释剂(ARD)对奶牛生产性能及乳品质的影响

对奶牛埋植抗原缓释剂ARD(Antigen Release Device)生产免疫乳的安全性进行评价。随机选择40头成年健康荷斯坦奶牛,试验组20头奶牛于左侧髋内淋巴结处埋植3种释放时间不同的ARD。通过测定产奶量、体细胞数和乳成份等研究ARD埋植对生产性能的影响;通过ELISA检测牛奶中特异性和总抗体的产生规律,研究表明:埋植手术后伤口愈合较好,没有引发奶牛乳房炎;埋植后5～10d奶牛平均产奶量下降16%(P>0.05),乳脂率、乳蛋白率等乳成分没有明显变化,牛奶中体细胞数差异不显著(P>0.05);埋植后9d便可检测到乳清中特异性抗体,牛奶中总IgG含量提高25%。ARD具有细胞免疫刺激作用,埋植ARD生产免疫乳使奶牛的细胞免疫得到一定程度的提高,因此ARD是一种高效安全的新型免疫乳生产技术。     

牛初乳、常乳和免疫乳乳清中主要蛋白的SDS-PAGE分析

采集荷斯坦奶牛初乳、常乳和免疫乳,通过SDS-PAGE电泳对其乳清中的主要蛋白进行分析.结果表明:从SDS-PAGE电泳图谱上可见有5个清晰的条带,自上而下分别为乳铁蛋白、牛血清白蛋白、IgG重链、β-乳球蛋白和α-乳白蛋白.其中32d免疫乳和0～3d初乳可见有IgG轻链,其他乳样IgG轻链条带较弱.0～7d初乳乳清蛋白含量随泌乳天数的增加而逐渐下降,0～5d初乳乳清蛋白含量差异显著,并维持较低水平.免疫乳15和32d各乳清蛋白含量均高于常乳.     

不同加工方式对牛奶中乳铁蛋白的影响

乳铁蛋白是一种铁结合性糖蛋白，广泛存在于哺乳动物的分泌物中。研究报道，乳铁蛋白具有多种生物学功能。本文就不同加工方式对牛奶中乳铁蛋白的影响进行简要评述。