扁桃属植物种质资源鉴定的SSR分析研究

利用SSR分子标记技术对国内外55份扁桃属植物材料的亲缘关系进行了鉴定,使用12对SSR引物组合共扩增出75条扩增条带,并对其进行聚类分析,结果表明:扁桃属植物不同种以及不同品种间的遗传距离不同,在相似系数小于0.68时,大多数栽培扁桃品种聚为一类,栽培品种中同一种源区的大多数栽培品种能聚类在一起。从聚类图上看,普通栽培扁桃与新疆野扁桃间的亲缘关系比长柄扁桃、蒙古扁桃、西康扁桃以及榆叶梅间的亲缘关系更近。进一步证明利用分子指纹图谱能够对扁桃属种质资源进行科学系统的遗传分类。     

ABA处理对不同柑橘种质汁胞中挥发性物质的影响

为揭示柑橘汁胞挥发性物质代谢谱与ABA含量变化的关系,采用100μmol/L ABA处理3对有籽/无籽宽皮柑橘、柚和甜橙共6个种质的柑橘果实的汁胞并进行离体培养,室温培养10 d后进行GC-MS分析。结果显示:ABA处理对华农红柚汁胞中倍半萜类物质代谢的影响具有双重效应,δ-榄香烯、β-荜澄茄油烯、β-榄香烯、β-衣兰烯的含量显著高于对照,而榄香烯异构体和石竹烯的含量显著降低;纽荷尔脐橙处理汁胞中β-可巴烯和表荜澄茄醇等倍半萜烯及其醇化物含量显著降低至低于检测限;ABA处理对国庆1号温州蜜柑汁胞中单萜和倍半萜物质含量均有显著影响,新生成β-月桂烯、γ-萜品烯、吉马烯D和(2Z,5Z)-2,5-十五碳二烯-1-醇,而D-柠檬烯及β-榄香烯含量提升10倍以上;ABA处理后无籽琯溪蜜柚汁胞中的β-月桂烯和二氢-3-亚甲基-2,5-呋喃二酮显著降低;ABA处理对华农本地早和早金甜橙汁胞中的挥发性物质代谢谱没有显著影响。结果表明,ABA处理可以影响柑橘汁胞中挥发性物质尤其是倍半萜和单萜类物质的代谢谱变化,对果实香气品质的影响因种质而异。     

毛霉诱导脐橙产抗病物质对指状青霉和酸腐菌的抑制

绿霉和酸腐是柑橘果实采后主要的病害,生产上迫切需要化学杀菌剂的替代方法。该研究对毛霉诱导脐橙果皮产生的具有抗病活性的红色物质(Citru Peel Red-substance Extract,CPRE)进行部分分离纯化,评价了CPRE对指状青霉和酸腐菌的抑菌活性,分析活性成分对两病原真菌菌丝细胞壁与膜功能的影响。结果表明,在50～200μg/mL的质量浓度下,CPRE对指状青霉和酸腐菌的孢子萌发,芽管伸长,菌丝生长有强烈的抑制作用,并且呈现剂量效应,最低抑菌浓度均为200μg/mL。进一步研究表明,与空白对照比较,50、100μg/mL抗菌活性成分处理明显改变指状青霉和酸腐菌菌丝细胞壁中几丁质分布,降低了细胞壁中几丁质含量、促进了质外体碱性磷酸酶的释放,表明CPRE严重损伤两致病真菌菌丝的细胞壁功能;CPRE处理还明显损伤两病菌菌丝的细胞膜通透性(P0.05),刺激菌丝膜外电导率显著上升(P0.05),加剧细胞内蛋白和核酸的丢失,降低了菌丝细胞膜总脂质含量,影响了细胞膜的正常功能。上述结果表明,红色抗菌成分在防控柑橘采后绿霉病和酸腐病中有潜在应用前景。     

替代柑橘聚乙烯薄膜单果套袋的涂膜剂研发及保鲜效果评价

【背景】 聚乙烯薄膜单果套袋是目前我国最为常用的柑橘贮藏期保鲜方式,近50年来在全国大范围应用。近年来聚乙烯薄膜果袋因使用后回收难带来的环境污染问题引起全社会广泛关注,且由于柑橘单果套袋主要依赖手工完成,导致劳动力日益紧缺、生产成本逐年上升等问题日益凸显。因此,研发一种能替代聚乙烯薄膜的新型涂膜材料,实现柑橘保鲜生产向全程机械化转型是产业的重大需求。【目的】 研发以小烛树蜡及蜂蜡为基础的“BC”（Beeswax-Candelilla Wax Coating）涂膜剂配方,并用于处理温州蜜柑果实,评价其保鲜效果以及替代聚乙烯薄膜单果套袋的可行性。【方法】 选择最优比小烛树蜡、蜂蜡和甘油组合涂膜剂,以成熟‘尾张’温州蜜柑果实为试验材料,进行套袋或涂膜处理。对处理后的果实在不同时间节点检测以下指标：果实失重率、硬度、色差、果汁总可溶性固形物（TSS）/可滴定酸（TA）含量、果皮总酚总黄酮含量、呼吸强度、果实内部气体成分和异味物质含量,并用气相质谱仪检测不同处理果皮初生代谢物含量。扫描电镜观察处理后果面蜡质形态;同时对光泽度、异味、风味、出汁量、甜度、酸度和总体满意度等指标进行感官评价。【结果】 BC涂膜剂处理温州蜜柑果实常温贮藏28 d后,果实失重率从22.62%显著降低到3.83%;同时延缓硬度与色差值的变化,延缓果实内部TSS和TA含量变化,提高果皮总酚、总黄酮及初生代谢物含量。果实内部CO₂浓度适度升高,呼吸强度从43.36 mL·kg^-1·h^-1显著降低到16.75 mL·kg^-1·h^-1;较对照处理而言,BC处理还增强了果实感官品质,总体满意度从3.09提升至3.69。除异味物质、呼吸强度外,其他各项指标检测结果均表明BC与套袋处理无显著性差异,但BC处理的果实中乙醇含量（777.9 mg·L^-1）显著低于人类感知阈值水平（1 500 mg·L^-1）及商业涂膜剂处理后的浓度（2 021.2 mg·L^-1）。【结论】 BC涂膜剂保水性能良好,涂膜处理后与套袋果实相比,果实的内部品质、外观品质以及测定的各项生化指标均无显著性差异。而且涂膜处理与果实采后加工分选线兼容性好,可实现在线打蜡处理,生产效率高,生产用工少。综上表明BC涂膜具备替代套袋保鲜作用。     

几种木本果树DNA的有效提取

提取高质量的ＤＮＡ是有效开展分子生物学研究的前提。多糖污染是木本植物ＤＮＡ提取中最常遇到的问题。多糖污染的ＤＮＡ呈粘稠的胶状 ,不但给实验操作带来不便 ,更重要的是多糖对反应体系中的酶活性产生抑制作用 ,严重影响分子生物学研究的下游工作[1～3] 。很多多年生木本果树 ,即使其幼嫩组织多糖的含量也明显高于大田作物 ,所以 ,常规的ＤＮＡ提取方法因不能有效除去多糖而在木本果树应用中受到限制。经典的ＣｓＣｌ梯度离心能有效除去柑桔等木本果树的多糖而得到高纯度的ＤＮＡ ,但由于梯度离心设备昂贵 ,涉及ＥＢ ,操作不便 ,且ＤＮ…     

柑橘果实贮藏期咪鲜胺和抑霉唑残留量的动态变化

用不同浓度的咪鲜胺及抑霉唑分别浸果处理柑橘果实,采用UPLC和气相色谱(gas chromatography,GC)检测咪鲜胺、抑霉唑在柑橘果实贮藏过程中的残留量。结果表明:咪鲜胺和抑霉唑在脐橙果皮中的残留量均高于椪柑果皮;咪鲜胺和抑霉唑在脐橙和椪柑果肉中的残留量均非常低。咪鲜胺在脐橙果皮中的降解趋势先慢后快,在椪柑果皮中的降解趋势则先快后慢;抑霉唑在椪柑果皮中的降解趋势与咪鲜胺在椪柑中的降解趋势类似。咪鲜胺(0.5、1.0、1.5mg/mL)和抑霉唑(0.5、1.0、1.5mg/mL)分别浸果2min后常温贮藏,柑橘全果中的残留量在整个贮藏期内均低于GB 2763-2014标准规定的5.00mg/kg最大残留限量(MRL)值,贮藏过程中柑橘可随时出库上市。     

赣南柑橘采后处理厂区空气中柑橘果实致病性微生物的分布及变化规律研究

为研究赣南柑橘采后处理厂病原菌菌落分布及其变化规律，本研究采用马铃薯葡萄糖琼脂培养基收集并培养病原菌的方法，分析赣南5个县境内具有代表性的柑橘采后加工厂区空气中能够引起柑橘采后腐烂的病原微生物类型、浓度及分布特征；同时对采后处理厂贮藏期间的果实腐烂率进行统计，分析病原微生物与柑橘果实腐烂之间的关系。通过对三年数据的分析，结果表明：赣南柑橘采后处理厂区的空气中病原菌菌落主要以青霉菌为主，数量呈逐年下降趋势，定期对厂区和贮藏库进行消毒杀菌可以大大降低厂区病原菌菌落的数量。另外，果实腐烂率与病原菌总数和青霉菌数量有显著的线性正相关，病原菌数量越多，果实腐烂率越高，且果实因青绿霉病导致果实腐烂最为严重。     

打蜡处理对温州蜜柑果实异味物质积累的影响

【背景】温州蜜柑（Citrus unshiu）是我国最重要的主栽鲜食宽皮柑橘,经洗果、打蜡、包装等采后商品化处理后,果肉异味物质快速积累,不仅影响果实口感、风味和消费者的购买选择,而且影响到果实的货架期和产品市场竞争能力。【目的】研究打蜡处理对温州蜜柑果实异味物质积累的影响,以期优化宽皮柑橘采后商品化处理技术和工艺,延长果实货架期,提高鲜果的市场竞争能力。【方法】以‘尾张’温州蜜柑成熟果实为试验材料,模拟生产中采用不同固体物含量的果蜡进行打蜡处理;扫描电镜观察各处理果实表面蜡质形态;气相色谱仪检测果实内部气体和异味物质含量;同时对光泽度、异味、风味、出汁量、满意度、甜度、酸度和总体满意度等消费者感官评价指标进行分析。【结果】打蜡处理能增加表面光泽度,同时使果实表面被人工合成蜡液覆盖,扫描电镜观察可见气孔被蜡液堵塞,果实内部O₂含量下降,CO₂含量上升。常温贮藏3周时,402D原液处理温州蜜柑果实内部CO₂浓度增加7.1%,比对照组增加1.0%;O₂浓度从1.6%降到1.4%。果肉乙醇和乙醛含量快速积累,产生异味,402D原液处理的果实内部乙醇含量1 773.8 mg·L^-1,商业果蜡（美国产402D果蜡）经过稀释可提高果心O₂含量,降低CO₂的含量,延缓果肉异味物质的积累速率。而1﹕1稀释后,果实内部乙醇含量560.5 mg·L^-1,感官评价由“高亮”到“较亮”,总体评价得分显著升高。果实打蜡处理后模拟低温冷链（4℃）贮运能有效抑制异味物质的积累,延长果实货架期。【结论】打蜡处理是导致温州蜜柑果实异味物质快速积累的关键原因,402D果蜡按1﹕1用水稀释后打蜡处理温州蜜柑果实在4℃下冷藏,能显著减少果肉异味物质积累,同时使果实货架期延长至4周。     

树冠覆膜对沙糖橘采后保鲜性能的影响

【目的】研究树冠覆膜对沙糖橘果实品质和保鲜性能的影响,为规范沙糖橘树冠覆膜技术的应用、合理采收和采后生产,以及延长沙糖橘的市场供应期提供理论依据。【方法】以桂林产区的沙糖橘为试材,树冠覆膜为处理组,未覆膜的留树果实为对照,分7个时期采样,测定果实的色差值、可溶性固形物、可滴定酸、初生代谢物、呼吸速率、激素水平、果面蜡质组分、蜡质合成相关基因表达量、失重速率及采后腐烂率。【结果】与对照相比,树冠覆膜延缓了果面光泽度下降速率,果皮颜色更红,果实可溶性固形物含量提高1.37%—3.37%,固酸比提高1.87—8.12,果实呼吸强度降低1.93%—16.45%,内源ABA含量提高13.48—15.04 ng·g^-1,蜡质总量提高1.14—3.47 μg·cm^-2,与蜡质合成相关基因如CER1、CER26等表达量高于对照、失重率降低22.24%—29.27%,采后腐烂率下降1.06%—17.65%。覆膜后随着采收期的推迟,沙糖橘果面光泽度及果实固酸比从12月底一直降至2月28日,3月份略有回升,果皮颜色也由鲜红色逐渐转黄并于3月份再转为红色,可溶性固形物含量和失重速率呈上升趋势;采后腐烂率逐渐增加,2月3日、2月28日和3月16日采后贮藏25 d的腐烂率分别为19.26%、32.06%和30.00%;且桂林产区的沙糖橘开花时间多为3月下旬,过晚采收可能会影响树体的开花坐果。【结论】树冠覆膜能显著提高沙糖橘脱落酸含量（ABA）和果面蜡质总量,降低采后腐烂损耗,改善沙糖橘的保鲜性能,但过晚采收会降低果实的保鲜性能,广西桂林产区的沙糖橘采收期最晚应控制在2月下旬前。     

虫胶松香涂膜对柑橘货架期品质的影响

以虫胶、松香结合羟丙基甲基纤维素（Hydroxypropyl methyl cellulose,HPMC）制备的虫胶松香（shellac rosin coating,SC）涂膜剂处理温州蜜柑与伦晚脐橙果实并评价其增亮与保鲜效果。结果表明：虫胶松香涂膜能够显著增强果实表面光泽度，减少果实货架期失重率，延缓果皮皱缩和颜色变化，降低果实呼吸强度，提升货架期可溶性固形物、可滴定酸含量，控制异味物质含量低于人类感知阈值。扫描电镜观察果皮发现虫胶松香处理果实表皮蜡质结构完整。