谷子转录因子SiNAC18通过ABA信号途径正向调控干旱条件下的种子萌发

【目的】谷子(Setaria italica L.)具有显著耐旱性。研究旨在通过反向遗传学方法分析并鉴定在干旱条件下影响植物萌发过程的重要调控因子,为研究作物干旱条件下种子萌发的调控机制创造条件。【方法】使用Clustal X 2.0和MEGA 5.05软件对谷子SiNAC18蛋白序列及其同源序列进行多序列比对,并构建系统进化树;利用real-time PCR方法检测SiNAC18在不同胁迫条件下的表达模式;通过瞬时转化的方法分析SiNAC18蛋白亚细胞定位;在拟南芥中过表达SiNAC18,分析SiNAC18的生物学功能;分析SiNAC18在转基因拟南芥中可能控制的下游基因。【结果】SiNAC18全长1 074 bp,编码由357个氨基酸组成的亲水性蛋白,分子量约为38.8 k D;系统进化树分析表明SiNAC18属于NAC转录因子家族第Ⅰ组的NAP亚组,与拟南芥基因At NAC29同源性最高;氨基酸序列比对结果显示,SiNAC18与其他物种包括水稻、拟南芥、大豆和玉米中同源性最高的NAC类转录因子蛋白的N端都具有A、B、C、D和E这5个保守结构域,蛋白C端具有高度多态性,证明SiNAC18的N端序列与其结合下游基因启动子元件相关;real-time PCR结果显示,SiNAC18在干旱(PEG)、ABA、高盐(Na Cl)及过氧化氢(H2O2)处理条件下的表达量明显上升;亚细胞定位结果表明SiNAC18蛋白定位于细胞核中;基因功能分析结果显示,在ABA和PEG胁迫处理下,SiNAC18转基因拟南芥与野生型种子的萌发率存在明显差异:在正常生长条件下,野生型拟南芥WT和SiNAC18转基因拟南芥的萌发率基本一致,在PEG浓度为10%和15%的MS培养基上,SiNAC18转基因拟南芥的萌发率显著高于WT。在2和5μmol·L-1 ABA处理条件下,转基因拟南芥的萌发率显著低于WT;下游基因表达分析结果显示,ABA信号途径相关基因At RD29A,脯氨酸合成相关基因At P5CR和At PRODH以及过氧化物酶基因At PRX34在SiNAC18转基因株系中的表达量高于WT中的表达量,表明SiNAC18通过调控这些下游基因影响转基因植物在干旱条件下的萌发率。【结论】谷子NAC类转录因子基因SiNAC18可能通过ABA信号途径、氧化胁迫调控等途径正向调控植物在干旱条件下的萌发过程。     

一起奶牛腐蹄病的诊断与防治

1发病情况2006年2～4月,海原县李旺镇团庄村某奶牛场先后有10头奶牛发生腐蹄病,其中轻症的8例,重症的2例,占全场成年牛的7%。     

氨化小麦秸秆对绵羊的饲喂效果试验

本试验用２０只当地滩羊进行氨化小麦秸秆和普通小麦秸秆饲喂试验，结果表明，喂以２５０ｇ基础日粮时，自由采食氨化麦秸比自由采食普通麦秸平均日增重提高５６．６７ｇ，差异显著（Ｐ＜０．０５）；而喂以４００ｇ基础日粮时，自由采食氨化麦秸比自由采食普通麦秸平均日增重减少４．１７ｇ．差异不显著（Ｐ＞０．０５）。因此，对于体重３０ｋｇ左右的滩羊，用氨化麦秸作粗饲料时，每日每只补饲２５０ｇ混合精料（含消化能１５．９６ＭＪ／ｋｇ，粗蛋白质１０．８％）是有效可行的。     

谷子转录因子基因SibZIP42在拟南芥中对高盐和ABA的响应

【目的】分析谷子抗逆相关转录因子基因Sib ZIP42的特性和生物学功能,探讨Sib ZIP42提高植物耐盐性的调控途径,为作物抗逆分子育种提供新的候选基因。【方法】利用生物信息学方法分析谷子Sib ZIP42的特性:使用Clustal X 2.0和MEGA 5.05软件对谷子Sib ZIP42蛋白序列及其同源序列进行多序列比对,并构建系统进化树;从数据库Phytozome获取谷子Sib ZIP42上游2 000 bp作为启动子序列,在PLACE数据库对Sib ZIP42启动子顺式作用元件进行分析;使用Net Phos 2.0 Server数据库预测Sib ZIP42蛋白磷酸化位点;利用实时荧光定量PCR检测Sib ZIP42在不同胁迫条件下的表达模式;将Sib ZIP42与绿色荧光蛋白GFP融合表达,检测Sib ZIP42蛋白的亚细胞定位情况;构建植物表达载体p BI121-Sib ZIP42,转化拟南芥并检测转Sib ZIP42拟南芥的耐盐性及对ABA处理的敏感性。分析转Sib ZIP42拟南芥中ABA及脱水响应相关基因表达变化,分析Sib ZIP42调控植物耐盐性的作用机制。【结果】谷子Sib ZIP42全长546 bp,编码由181个氨基酸组成的亲水性蛋白,分子量约为20.3k D,基因编码区包含1个外显子;系统进化树分析表明该基因位于b ZIP基因家族的S亚组;Sib ZIP42与拟南芥Atb ZIP42序列同源性最高;启动子元件分析表明,Sib ZIP42包含ABRE、MYB、MYC等多种逆境胁迫应答相关元件;磷酸化位点分析结果显示Sib ZIP42含有14个丝氨酸、4个酪氨酸和1个苏氨酸磷酸化位点;实时荧光定量PCR结果显示,Sib ZIP42对多种非生物胁迫均有不同程度的响应,在高盐、干旱(PEG)和ABA处理条件下表达量明显上升,Sib ZIP42在根部的表达量显著高于在茎及叶子中的表达;亚细胞定位结果表明,Sib ZIP42蛋白定位于细胞核中;基因功能分析结果显示,在正常MS培养基上,野生型拟南芥WT和Sib ZIP42转基因拟南芥的萌发率基本一致,在Na Cl浓度为90、120和150 mmol·L~(-1)的MS培养基上,转基因拟南芥萌发率显著高于WT,在90 mmol·L~(-1) Na Cl处理条件下,转基因拟南芥的绿化率显著高于WT;在ABA浓度为0.5、1和2μmol·L~(-1)的MS培养基上,转基因拟南芥的绿化率显著低于WT;下游基因检测结果表明,HIS1-3、RD29B和RAB18等ABA胁迫响应相关基因以及脱水响应相关基因At PIP2A在转基因植株中表达量显著高于在WT中的表达,表明Sib ZIP42可能通过ABA信号途径提高植物对高盐胁迫的耐性。【结论】与WT相比,Sib ZIP42转基因拟南芥株系在种子萌发时期耐盐性显著提高。同时,在种子萌发后期Sib ZIP42转基因株系相比于WT对ABA处理的敏感性增强,Sib ZIP42可能通过ABA信号途径正向调控植物的耐盐性。     

猪气喘病的诊断及防治措施

猪气喘病又称猪霉形体肺炎,是由猪肺炎支原体引起的慢性呼吸道传染病。这种病的特征主要以咳嗽和气喘为主。病变的特征是肺脏的尖叶、心叶、中间叶和膈叶前缘呈肉样或虾肉样实变。     

如何增强林区木材检验员的业务素质

木材检验工作是林区木材生产、流通、销售等各环节环节的基础工作，增强木材检验员的业务素质，是实现企业经济利益最大化的需要。本文从明确木材检验员的职责范围、规范木材检验员的行为管理、建立木材检验监督长效机制、执行木材检验员责任追究制度、强化木材检验的组织领导这五个方面重点论述了提升木材检验员素质的措施。     

母猪繁殖障碍综合症的诊断与防制

2006年,笔者及兽医工作人员先后对宁夏海原县关庄乡和其它10个养殖场及养猪专业户出现的母猪繁殖障碍性疾病进行了调查.在调查的基础上进行了分析研究,并对病猪进行了综合诊断,表明母猪繁殖障碍综合症主要是由细小病毒和乙脑等传染病引起,热应激也是不可忽视的因素.在查清病因的基础上,制定了针对性的预防措施.2006年对这些猪场和养殖户饲养的3 200头母猪进行了预防接种,使母猪发病率下降到2%,仔猪死亡率降到0.9%,取得了良好的效果,获得了显著的经济效益.     

奶牛生产瘫痪的发生与诊疗

生产瘫痪又称乳热症，是母畜分娩前后突然发生的一种严重代谢性疾病。其是由于奶牛缺钙而知觉丧失及四肢瘫痪，分娩后不能起立，以截瘫昏迷和低钙血症为主要特征。主要发生于营养良好，第3-6胎的高产奶牛。在顺产后的三天内多发，少数在分娩前数小时发病。春季节多发，是威胁奶牛生产较为严重的疾病之一。     

牛恶性卡他热、传染性角膜结膜炎与牛病毒性腹泻-黏膜病的鉴别诊断

牛恶性卡他热是牛的一种致死性淋巴增生性病毒性传染病,以高热,呼吸道、消化道黏膜的黏脓性坏死性炎症为特征。临床上常伴有眼结膜急性炎症,有脓性粪便排出,和牛的角膜结膜炎及牛病毒性腹泻黏膜病的临床症状极其相似,临床上容易造成误诊,笔者根据二十多年来的诊疗经验,将三者的鉴别诊断介绍如下：