杏鲍菇采后木质化相关基因实时定量PCR中内参基因的选择

【目的】筛选出合适的内参基因,为分析不同贮藏时期杏鲍菇(Pleurotus eryngii)子实体中木质化相关基因的表达提供支持。【方法】以4℃低温贮藏0,3,6,9,12,15和18d的杏鲍菇子实体为材料,采用实时荧光定量PCR(Quantitative real-time PCR,RT-qPCR)技术,分析了β-actin、18SrRNA、β-tubulin、ELF和GAPDH 5个候选内参基因在不同贮藏时期杏鲍菇的表达情况;通过GeNorm和NormFinder 2种软件筛选出最稳定的内参基因;选取最佳内参基因,采用相对表达定量法对木质素合成途径中的关键酶,即苯丙氨酸转氨酶(Phenylalanina ammonia-lyse,PAL)基因的表达进行定量分析。【结果】5个内参基因均能特异扩增,其中GAPDH基因表达丰度较低,不适合用作内参基因;经GeNorm软件分析计算,β-actin、β-tubulin、ELF、18SrRNA表达稳定度平均值M分别为0.527,0.527,0.584,0.875,最适内参基因组合为β-actin、β-tubulin和ELF;由NormFinder软件分析计算,β-actin、β-tubulin、ELF、18SrRNA稳定值S分别为0.221,0.356,0.583,1.092,β-actin稳定性最高;综合分析认为β-actin的表达稳定性最高,为最佳内参基因;以β-actin为内参基因,发现4℃低温贮藏3,6,9,12,15和18d的杏鲍菇子实体中PAL基因表达量分别比新鲜样品(0d)增加了11.3%,10.8%,11.3%,11.5%,11.4%,10.7%。【结论】β-actin可作为杏鲍菇子实体采后贮藏条件下品质变化相关基因表达研究的内参基因。     

高校知识产权管理规范实践与成效——以华南农业大学为例

为提升高校知识产权管理能力,广东省知识产权局选定华南农业大学为广东省高校知识产权管理规范贯标试点单位,针对农业高校的特点和知识产权管理中存在的问题,华南农业大学采取了开展贯标培训、成立贯标试点小组、制定知识产权管理及运营政策、成立知识产权运营及服务机构、建立院部的知识产权管理机制等措施,取得了规范知识产权管理、增强师生知识产权保护意识、提高知识产权申请质量、促进知识产权快速转化和提高知识产权影响力等工作经验,以期为同类型高校的知识产权管理提供借鉴。     

采后处理对杏鲍菇贮藏品质及抗氧化酶系统的影响

【目的】探讨采后不同处理方式对杏鲍菇贮藏品质及抗氧化酶系统的影响,为杏鲍菇贮藏保鲜技术的应用与发展提供理论指导。【方法】以新鲜采收的杏鲍菇为试验材料,分别采用0.03 mm的聚乙烯（PE）薄膜袋封口包装、0.05 mm的PE薄膜袋封口包装和1.5%壳聚糖涂膜3种处理,以0.05 mm PE保鲜袋不封口为对照,于4℃、相对湿度85%-95%的条件下贮藏,通过测定失重率、色差值、硬度、可溶性固形物（TSS）、还原糖及可溶性蛋白质含量等理化指标,以及过氧化物酶（POD）、超氧化物歧化酶（SOD）和过氧化氢酶（CAT）等3种抗氧化酶活性以及相对电导率、丙二醛（MDA）、超氧阴离子（）、过氧化氢（H₂O₂）的含量,研究不同采后处理方式对杏鲍菇贮藏品质及抗氧化酶系统的影响。【结果】与PE不封口处理相比,两种厚度的PE保鲜袋处理能显著降低杏鲍菇子实体失重率（P＜0.01),在贮藏18 d时,两种处理的失重率仅为0.35%和0.20%;两种PE处理的菇体硬度显著高于对照（P＜0.05）,且在贮藏期间两种处理均分别在第3天和第12天出现了两个硬度峰值;PE处理不易发生褐变,但在贮藏末期,0.03 mm PE处理的褐变程度显著增加（P＜0.05）。两种PE处理均能显著抑制贮藏期间TSS和可溶性蛋白的增加,减缓还原糖的消耗。1.5%壳聚糖涂膜处理在0-9 d菇体硬度显著增加（P＜0.05）,随后硬度快速下降;其失重率较高,与对照无显著差异（P＞0.05);贮藏期间褐变指数低,但在贮藏末期的褐变程度显著（P＜0.05）;贮藏的中期与后期,TSS、还原糖和可溶性蛋白含量的变化均显著低于对照。3种处理在一定程度上提高了杏鲍菇的抗氧化能力,与对照处理相比,3种处理均能显著降低膜透性和脂膜过氧化产物MDA的含量（P＜0.05）,但在贮藏中、后期,壳聚糖处理的电导率和MDA含量均显著高于两种PE处理。0.03 mm PE和1.5%壳聚糖涂膜处理能显著降低超氧阴离子产生速率和过氧化氢的含量（P＜0.05）,0.05 mm PE处理能显著降低过氧化氢的含量（P＜0.05）,但其超氧阴离子产生速率则在3-12 d内显著高于对照（P＜0.05）;在贮藏前期与末期,3种处理均具有较高的POD活性和CAT活性（P＜0.05）,但在整个贮藏期间,SOD的活性变化与对照无明显差异（P＞0.05)。【结论】在整个贮藏过程中PE处理表现出较好的贮藏效果;其中0.05 mm PE包装处理效果更为明显,有效保持了杏鲍菇的品质。