橘色双冠丽鱼黑色素细胞和黄色素细胞的分离、培养与鉴定

为探讨橘色双冠丽鱼(Amphilophus citrinellus)黑色素细胞和黄色素细胞的分离、培养与鉴定方法，观察鱼类色素细胞生长特征，本研究以橘色双冠丽鱼的尾鳍、鳞片、皮肤组织为材料，在25℃~28℃条件下，分别在胰蛋白酶溶液和胶原酶溶液中消化6 h和12 h，可有效分离出色素细胞团，细胞悬液经气孔尼龙网过滤后，于35%-45%-55% Percoll试剂中梯度分离和收集黄色素细胞和黑色素细胞。采用K-SFM培养基进行细胞原代培养和细胞纯化，抑制成纤维细胞和角朊细胞的生长，用十四烷酰佛波醇乙酸酯(TPA)、双抗、bFGF的DMEM培养基进行色素细胞传代培养；运用巴染色和透射电镜观察细胞形态，并用分子标记技术进行细胞鉴定。结果显示，细胞分离时，黑色素细胞位于Percoll试剂45%和35%浓度层之间，黄色素细胞位于Percoll试剂35%浓度层上，2种色素细胞均凝聚成絮状。透射电子显微镜观察发现，黑色素细胞内部含大量黑色素小体，而黄色素细胞内部含喋呤体和类胡萝卜素囊泡；黑色素细胞左旋多巴(L-DOPA)染色呈阳性；取第10代色素细胞进行体色相关基因黑皮素1受体(melanocortin receptor 1, MC1R)、酪氨酸酶(tyrosinase, TYR)和牛内皮素受体B(endothelin receptor B, EDNRB) PCR检测，显示基因扩增条带特异性强，表明获得的2种色素细胞具有良好的生物学活性。本研究建立了橘色双冠丽鱼黄色素细胞和黑色素细胞的分离培养与鉴定方法，为进一步开展鱼类体色细胞分化和体色形成的分子机理研究提供了细胞模型。     

不同施肥方式对设施番茄生理指标和品质的影响

以"粉太郎"番茄为试材,采用日光温室微区试验,设置5个不同施肥处理,即50％化肥N+50％有机肥N+改良剂组(HYG)、50％化肥N+50％有机肥N组(HY)、100％有机肥N组(Y)、100％化肥N组(H)和不施肥处理组(CK),研究了不同施肥方式对设施番茄生长、光合作用及品质的影响,以期为设施土壤提高番茄产量和合理施肥提供参考依据.结果 表明:HYG处理的根系总长度、总表面积、总体积、根尖数、平均直径和根干质量等性状表现上优于其它处理,表现为HYG＞Y＞HY＞H＞CK,与常规施肥(H处理)相比分别高出41.75％、39.57％、137.80％、60.66％、33.33％和49.65％;果实的可溶性糖和可溶性蛋白质含量也高于其它处理,与CK相比增加了7.26％和44.76％,果实中总酸含量得到了显著降低;同时番茄叶片的蒸腾速率、净光合速率、气孔导度和叶绿素含量的值也显著高于其它处理,并显著降低了胞间CO2浓度.因此,该试验条件下,采用50％化肥N+50％有机肥N+改良剂处理,能够促进设施番茄植株的生长,增强其光合作用及提高其品质.     

不同温度对淇河鲫胚胎发育的影响

淇河鲫(Carassius auratus),具有背宽体厚的特点,有较大的经济价值。[目的]探究温度对淇河鲫胚胎发育的影响。[方法]在繁殖季节通过干法授精的方法获得雌核发育淇河鲫胚胎,分别在不同的温度(室温(21℃)、24℃、27℃、30℃、33℃)下孵化,观察胚胎在不同温度下的发育情况,并统计不同孵化温度下胚胎的受精率与孵化率。[结果]根据外部形态特征可以将淇河鲫胚胎发育分为7个阶段,不同温度条件下各阶段经历的时间有显著性差异(P0.05),孵化速率与温度呈负相关,且温度过高会导致胚胎死亡;同时,温度对淇河鲫胚胎受精率和孵化率影响也较大,在21~27℃范围内,受精率与孵化率随着温度的升高而升高;在27~33℃范围内,受精率与孵化率随着温度的升高而降低。[结论]生产上为了提高胚胎孵化效率,可以在胚胎发育早期(受精关键时期)与后期分别采用不同温度以提高其受精率与孵化率。     

鱼类miRNAs研究新进展

正MicroRNAs(miRNAs)是一类内生性的、进化上高度保守的单链成熟非编码RNA,长度约21~25个核苷酸,广泛存在植物、动物及微生物中~[1-2],参与生物体的胚胎形成、个体生长发育、机体免疫、疾病防御以及繁殖和糖脂类代谢等生命过程~[3-8]。目前,基于生物信息学预测,miRNAs约占整个基因组的2%~3%~[9]。自Lee等~[10]利用定位克隆法从秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)中克隆到     

影响培育落叶松人工林的因素及对策

本文分析了影响培育落叶松人工林的不利因素,提出落叶松发展需要注意的问题及对策,使落叶松在培育过程中能充分发挥短期效益。     

MITFa及TYR基因在红色锦鲤体色发生不同阶段的表达分析

本研究描述了红色锦鲤从出膜到体色形成的过程,总结和归纳不同发育阶段体色变化异同点,筛选出6个体色变化较显著时期,分别为1、2、3、4、12、48日龄。利用荧光定量PCR分析MITFa及TYR基因在红色锦鲤6个体色变化时期的表达情况。结果显示,MITFa基因在1日龄时表达量最高,显著高于48日龄时(P0.05),极显著高于其他4个时期(P0.01)。48日龄时表达量次之,亦极显著高于2、3、4、12日龄4个时期(P0.01)。2、3、4、12日龄4个时期MITFa基因表达量较低且不存在显著差异(P0.05)。TYR基因在1日龄时表达量最高(P0.01),4日龄时表达量显著高于12、48日龄(P0.05),与2、3日龄不存在显著差异(P0.05)。TYR基因表达量在2、3、12、48日龄4个时期差异不显著(P0.05)。MITFa和TYR基因在红色锦鲤体色形成过程中,表达水平整体呈现降低的趋势,其中MITFa基因表达量表现为先降后升,TYR基因则先降后升再降。以上结果显示MITFa、TYR基因与锦鲤体色形成具有一定相关性,但MITFa和TYR基因在体色发生中的相互作用还有待进一步研究证实。     

浅谈开鲁县机械化深松技术的推广

本文结合开鲁县耕地的实际情况,阐述了实施机械化深松技术的重要性。总结了在实践推广工作中遇到的问题,分析了其原因,并提出了相应的解决办法。     

现代农机设计中的机械外观创新

本文对于现代农业背景下,对于农业机械设计中,外观的设计在形态和色彩上如何能够更好地满足农民在生产劳动中对于机械的智能化操作需求,安全心理需求和审美需求进行探究。