链霉菌B221降解角蛋白的扫描电镜观察

应用扫描电子显微镜直接观察链霉菌B221在固体发酵条件下,菌丝与羽毛的相互作用,对比酶作用后羽毛结构,深入了解菌状微生物降解角蛋白机制及菌丝在降解过程中的作用.结果显示,灭菌处理过程有助于降解启动,链霉菌B221菌丝穿透作用在降解前期明显,菌丝穿透羽毛表面,沿羽毛纵向生长,大面积剥落羽毛表面.角蛋白酶活力在前4 d较高,生物最在第4天达到最高,水溶性物质与可溶性蛋白在整个降解过程中的变化与酶活力变化不完全一致.链霉菌B221降解角蛋白过程中机械作用起重要作用,菌丝的生长压力穿透且剥落羽毛表层结构,更多酶作用位点暴露出来,极大提高酶解效率.     

饲用复合酶制剂高温耐受性研究

将复合酶制剂于95 ℃加热5 min,结果显示中性蛋白酶、酸性蛋白酶和纤维素酶的酶活下降百分率小于16%,表明复合酶制剂对于高温具有一定的耐受能力.利用孢子粉作为粗酶,添加麸皮、酵母,可以有效降低高温作用下3种酶的酶活损失率;利用液体发酵产酶试验,获得了相同的结果.研究证实复合酶制剂中含有的培养基质(如麸皮、酵母膏等)能够起到保护剂的作用,这些基质的存在使得复合酶制剂的有效受热面积降低,对于酶的耐高温能力起到了促进作用.     

羊毛角蛋白降解菌的筛选鉴定及液体发酵条件优化

从长年堆积羊毛的土壤中筛选获得3株具有角蛋白降解功能的菌株,经形态观察和16S rRNA测序初步鉴定,并分别命名为链霉菌NJU-05、金黄杆菌NJU-07、地衣芽孢杆菌NJU-10.同时,进行液体发酵工艺优化,得到NJU-05菌株实验室水平的最佳液体发酵条件:温度为40℃,pH值为9.0,发酵周期为3 d;NJU-07菌株:温度为35℃,pH值为9.0,发酵周期为4 d;NJU-10菌株:温度为35℃,pH值为9.0,发酵周期为4 d.     

链霉菌B221与地衣芽孢杆菌NJU-1411-1固体发酵废弃羊毛角蛋白工艺优化和工业化产品分析

采用地衣芽胞杆菌NJU-1411-1和链霉菌B221,通过固体发酵降解羊毛角蛋白,研究培养基含水量、培养基初始pH值、发酵温度、发酵周期等发酵条件的优化。结果表明,2株菌的最佳固体发酵工艺条件相同,培养基起始含水量为15 mL/10 g羊毛粉,培养基最佳起始pH值为8～9,最适发酵温度为40℃,发酵周期为5 d。工业化发酵产品的氨基酸含量、体外消化率、动物消化率等方面研究结果表明,发酵产品的氨基酸含量为52. 34%;发酵后体外消化率由67. 44%提高至82. 20%;动物体内消化率达到85. 43%。这些结果表明发酵角蛋白产品作为饲料蛋白添加剂完全可行,可用于替代或部分替代鱼粉、豆粕等蛋白饲料原料。     

地衣芽孢杆菌nju-1411-1降解羽毛角蛋白过程中含硫化合物的变化

利用自行筛选到的1株角蛋白降解细菌--地衣芽孢杆菌nju-1411-1发酵羽毛角蛋白,发酵2 d时角蛋白降解率、角蛋白酶活、生物量等指标就达到了最大值.降解率的变化和角蛋白酶活力的变化基本是一致的,并且酶的活力明显高出笔者所在实验室筛选的其他2株角蛋白降解菌--链霉菌B221和真菌C281.发酵过程中,硫元素以硫酸根、亚硫酸根、硫离子、硫代硫酸根、巯基化合物、二硫键化合物、半胱氨酸、胱氨酸以及S-磺酸半胱氨酸类物质等9种形态存在,没有检测到过硫化物、多硫化物、连多硫酸盐、芳基类硫代磺酸盐、烷基类硫代磺酸盐等其他形式的含硫化合物.其中硫酸根、亚硫酸根、硫代硫酸根和S-磺酸半胱氨酸类物质是主要形态,而其他5种物质含量相对较少.硫酸根和硫代硫酸根是硫元素代谢的终产物,其中硫酸根在自然状态下和氧化酶的作用下都可以产生,而硫代硫酸根是微生物代谢的产物.亚硫酸根和S-磺酸半胱氨酸类物质出现相互消长的关系,表明硫解作用的存在.发酵液的可溶性物质中,二硫键主要以胱氨酸的形式存在;除了少量的半胱氨酸以外,巯基还存在于多肽和寡肽中.     

苏北海岸带互花米草盐沼土壤微生物的空间分布

2005年8月在江苏盐城新洋港海岸带盐沼碱蓬带、米草带、光滩带等3个地带采集样品,采用稀释平板法进行微生物分离计数,结果表明苏北盐沼地不同地带的微生物优势群落不同,且土壤微生物群落存在一定的空间分布规律。细菌的种类最为丰富,主要有芽孢杆菌属、微球菌属、金杆菌属、色杆菌属、球杆菌属、固氮菌属和假单胞菌属等,其中总体数量上芽孢杆菌占最大优势。米草带细菌种类最为繁多,碱蓬带次之。真菌种类较少,主要为曲霉属、青霉属、辐枝霉属、毛霉属、木霉属以及酵母等。米草带真菌含量略高于碱蓬带,光滩带最少。放线菌主要以链霉菌属为主,土壤中放线菌的类群在米草跟碱蓬两个地带并无显著的差异,相对光滩,在数量上具很大优势。     

羽毛角蛋白分解菌的富集培养和分离筛选

以羽毛角蛋白为唯一氮源，采用观察培养物中完整羽毛的腐烂程度和培养液的双缩脲反应，从６０多个土样的富集培养物上分离到７０００余个菌株，初筛得到具有一定分解利用羽毛角蛋白能力的６００余个菌株。通过进一步摇瓶复筛，获得了分解利用羽毛角蛋白能力很强的一株放线茵Ｓ－２２１和一株真菌ｎｆ－８２。它们在含有８％羽毛粉发酵基质中，３４℃摇瓶发酵９６ｈ，使发酵液的可溶性蛋白达４～５ｇ／１００ｍＬ，蛋溶指数达０．５以上。     

酸矿水中丝状绿藻对酸和汞的耐性

从安徽铜陵狮子山矿区酸矿水溪流上游纯化培养获得一株丝状绿藻,并命名为AMD-algae-1.对AMD-algae-1元素分析及X射线吸收近边缘分析发现藻体中含有汞,干藻样品中汞含量为412.730mg/kg.AMD-algae-1在光照度20001x、30℃下培养,PH值为3.0～3.5时明显生长,pH值为5时生长较好.AMD-algae-1在Bristol培养液中汞最大耐受浓度为100x10-6mg/mL.表明AMD-algae-1能够适应酸矿水的酸性环境,并从酸矿水中吸收富集汞,从而降低酸矿水中汞含量,对酸矿水治理有一定的应用价值.     

耐热链霉菌B221产生角蛋白酶的液体发酵条件研究

以羽毛粉为底物,采用链霉菌(Streptomycessp.)B221液体发酵生产角蛋白酶,考察了温度、pH值、氮源、碳源以及接种菌量对角蛋白酶生成的影响。结果表明,该菌能够分解羽毛角蛋白,产生角蛋白酶,且在40℃、pH值为9.0、接种量为5%时酶活力最强。与培养基中只含有羽毛的发酵过程相比,添加蔗糖更有利于提高角蛋白酶的活性,而葡萄糖和可溶性淀粉对酶的活性则有不同程度的抑制作用;添加NH4C l和KNO3对角蛋白酶活性均有一定的促进作用,而尿素和蛋白胨则对角蛋白酶活性有抑制作用。本试验研究结果为进一步利用微生物技术手段开发羽毛角蛋白资源奠定了基础。     

耐热链霉菌B221降解羽毛角蛋白的固体发酵条件研究

以羽毛粉为底物,研究链霉菌Streptomycessp.B221固体发酵条件,分析培养基初始含水量、温度、pH值、接种量、培养基氮源、碳源等参数对角蛋白固体发酵的影响。结果表明,该菌在培养基含水量为35 ml BM/10g羽毛、40℃、pH值9.0、接种量为20%时发酵效果最好,最佳发酵周期为6 d。本研究为进一步工业化生产提供必要的试验依据。