大豆PAL2-3基因的克隆及转化研究

大豆异黄酮是苯丙氨酸代谢途径中合成的一类次级代谢产物,在苯丙氨酸代谢途径中,苯丙氨酸解氨酶(PAL)是关键酶和限速酶。本课题组前期研究发现PAL基因的相对表达量与大豆异黄酮含量具有明显的协同增减趋势,并且在PAL基因家族成员时空表达模式分析中发现,PAL2-3(XM_003542493)是PAL基因家族中相对表达量较高的主要表达成员之一。本试验首先通过克隆大豆中PAL2-3基因;然后构建pCAMBIA3301-GmPAL2-3植物过表达载体,将构建好的pCAMBIA3301-GmPAL2-3表达载体重组质粒转化到根癌农杆菌EHA105中;采用农杆菌介导的大豆子叶节转化体系获得转化植株,并对T1代转化植株进行PPT检测,外源标记基因Bar检测以及荧光定量PCR检测,对转基因阳性植株进行大豆籽粒异黄酮含量的测定。结果表明T_1代转基因植株中PAL2-3基因的表达量是对照的5.11~11.24倍,总异黄酮含量最高的(2 587.63μg·g~(-1))是对照(1 616.90μg·g~(-1))的1.6倍。因此在大豆中过量表达PAL2-3基因可以提高大豆籽粒中异黄酮含量。     

亚麻枯萎病病原菌鉴定及药剂筛选

根据亚麻枯萎病病原菌形态特征和致病性等特点,鉴定亚麻枯萎病病原菌为Fusarium oxysporum f.sp.Lini。通过供试的13种杀菌剂对病原菌菌丝的抑制效果研究表明:对亚麻枯萎病病原菌菌丝生长有较强抑制效果的杀菌剂有枯萎灵、代森锰锌,其抑菌率均为100%,其次为多菌灵(抑菌率为86.3%),爱苗(抑菌率为83.8%),根腐宁(抑菌率为82.5%)。     

籽用美洲南瓜新品种“金龙瓜1号”的选育

籽用美洲南瓜"金龙瓜1号"是杂交一代短蔓、高产、抗病新品种。母本‘GM’是黑龙江省优良短蔓自交系,父本‘GF’是由俄罗斯引进高产抗病材料选育而成。"金龙瓜1号"属中熟品种,生育日数105 d左右,需≥10℃活动积温2 300℃以上;植株短蔓,生长健壮,叶片浓绿,单株坐瓜1~2个,瓜长圆球形,横径18~25 cm,纵径30~40 cm,单瓜质量3.9~5.0 kg。瓜籽长1.9 cm,宽1.3 cm,公顷产籽量1 250 kg。田间表现抗白粉病、霜霉病,适合在黑龙江省推广。     

影响稻米香味的主要因素与增香调控措施

香味是稻米的重要品质性状之一,具有适口性好、黏性强、蒸煮时清香四溢等特点的优质香稻深受市场和消费者喜爱。稻米香味除了受遗传因素影响外,还与气候条件、土壤条件及栽培条件密切相关。本文作者综述了影响稻米香味形成的遗传及环境因素研究进展,详细介绍了改善稻米香气的主要调控措施,以期为提高优质香稻栽培技术水平,促进优质香米产业发展提供参考。     

南瓜SSR-PCR反应体系的优化

以3个矮生南瓜自交系和2个蔓生南瓜自交系为试材,利用Primer 5软件开发南瓜植物中具有特异性的SSR引物,并通过正交实验和梯度PCR试验对影响南瓜SSR-PCR结果的主要条件进行优化筛选,以期建立最佳的SSR-PCR反应体系.结果表明:20μL反应体系合有1.5 mmol/L Mg2+,60 ng DNA,0.20 mmol/L dNTPs,0.25 mrnol/L Primer和1.5 UTaq酶,最佳退火温度为44.1℃.     

花粉管通道介导的抗除草剂基因(bar)对大豆的遗传转化

采用花粉管通道介导法将含有bar基因的pPTN140质粒DNA导入8个黑龙江省大豆主栽品种（系）,导入1384朵花,共获得1164粒种子,经2次Basta除草剂筛选后共获得3个品种的除草剂抗性植株8株.对其进行PCR以及PCR-Southern杂交检测均为阳性结果,Southern杂交结果显示,8个除草剂抗性后代植株整合数目不同,其中2株整合单拷贝基因,另外6株分别整合3～8个拷贝的bar基因.对8个抗性植株的后代进行了除草剂抗性分析,D1-D3代均出现除草剂抗性植株,表明bar基因可以在转基因植株后代中遗传,抗性遗传分析结果表明不同株系间以及株系内除草剂抗性缺乏规律性,分离比率不符合孟德尔遗传规律.说明大豆花粉管通道法转化基因存在多拷贝共抑制现象.目前获得除草剂抗性稳定的D3代株系82个.试验说明利用花粉管通道技术进行大豆转化是可行的.     

浅析生物技术在作物育种中的应用

科技的发展和生活水平的提高,对农作物的产量和品质提出了更高的要求,而将现代生物技术应用于作物育种中,不但能促进作物改良,显著提升农产品的质量,而且能提升种植效率,促进农业的可持续发展,建设环境友好型农业。本文作者简要介绍了生物技术育种的发展历程,详细阐述了生物技术在作物育种中的应用,并对其提出了前景展望,以期为生物技术育种产业化发展提供参考。     

珠三角地区养殖及野生淡水鱼类的甲基汞积累现状

汞（尤其是甲基汞）易在鱼体内富集,进而危害人类健康。为了解珠三角地区淡水鱼类的甲基汞积累现状,本研究对该区域内常见的养殖和野生鱼类进行了采样和甲基汞测定,并探讨了影响鱼类甲基汞积累差异的原因。结果发现,珠三角地区鱼类甲基汞含量总体较低,均未超过我国水产品食用安全标准,其中养殖鱼类肌肉甲基汞含量为0.26-331 ng g-1 dw,平均含量为62 ng g-1 dw;野生鱼类肌肉甲基汞含量为0.71-1 006 ng g-1 dw,平均含量为111 ng g-1 dw,养殖鱼类甲基汞含量显著低于野生鱼类。鱼类甲基汞累积主要受食物组成及食物甲基汞浓度影响,饲料甲基汞含量是决定养殖鱼类甲基汞水平的关键性因素。食用该地区鱼肉的甲基汞摄入水平总体较低,其中食用野生鱼类的甲基汞摄入水平较养殖鱼类高,食用野生鳜（Siniperca chuatsi)）存在甲基汞暴露风险。     

亚麻立枯病病原菌鉴定及药剂筛选

根据亚麻立枯病病原菌形态特征和致病性等特点,亚麻立枯病病原菌为Rhizoctonia solani kuehn,属于半知菌亚门,丝核菌属.供试的12种杀菌剂对病原菌菌丝的抑制效果试验表明,对亚麻立枯病病原菌菌丝生长有较强抑制效果的杀菌剂有立枯净、多菌灵、代森锰锌,其抑菌率分别为96.3%、92.5%、88.8%,其次,甲基托布津抑菌率为83.8%,甲霜灵,抑菌率为77.5%.     

伪狂犬病病毒闽A株gE基因表位抗原编码区的克隆与序列测定

用PCR方法以伪狂犬病病毒闽A株的基因组DNA为模板扩增到了gE基因表位抗原决定域的编码区段。PCR产物连接到pMD18-T载体后，转化大肠杆菌XL1－blue菌株，重组质粒经测序并与GenBank中已登录的gE基因序列比较，确证含有PRV闽A株gE基因的表位抗原编码区，此区段与PRV Rice株相应区段的DNA序列同源性为97．3％，氨基酸序列同源性为94．7％。