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为优化心里美萝卜花青素的浸提及纯化条件,弄清其花青素稳定性以及抗氧化性,用不同浸提液和大孔吸附树脂对心里美萝卜花青素进行了提取与分离纯化,并对提取花青素的稳定性和抗氧化性进行了初步试验.结果表明:0.1%的HCI浸提液对花青素提取效果最好,2h、12h和24 h时OD505分别为2.60±0.17、2.95±0.21和3.52±0.24;AB8大孔吸附树脂纯化花青素的效果较好,与pH6.0的缓冲液比较,花青素在pH7.0的缓冲液中较为稳定;Fe3-在一定程度上可提高花青素的稳定性,0.5 mM Fe3-时花青素最为稳定,10 min内花青素的残留量保持在90%左右;花青素对受到氧化损伤的大肠杆菌的生长有一定的保护作用. 相似文献
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根据NCBI上传的猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)[GenBank:JN547228(CH/S)],设计引物对阳性病料进行鉴定并回收,与pMD18-T构建重组载体并测序。对猪流行性腹泻病毒的基因多样性及序列保守性进行分析,一是以经典毒株为主,包括CV777、KPEDV-9和CH/S株等为代表的G1基因型,另一种是以近几年分离的毒株为主,包括HB3-CH2012、CXHZ-CH2013、HNCZ-CH2013等为代表的G2基因型。基因同源性分析比较结果表明,这4株PEDV之间的序列同源性为97.6%~100.0%,与经典株CV777的同源性为92.7%~92.8%。同源分析显示,PEDV不同毒株间的基因同源性仍高度相似,但PEDV流行毒株已呈现进化分支的趋势。 相似文献
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萝卜过氧化物酶基因RsPrx1在毕赤酵母中的表达及其抗性 总被引:1,自引:0,他引:1
从成熟心里美萝卜肉质根的皮中提取总RNA,采用RT-PCR方法获得过氧化物酶基因RsPrx1的cDNA,将其克隆到pGEM-T载体中,并构建毕赤酵母重组表达载体pPIC9KH-RsPrx1。用L iC l法转化野生型毕赤酵母GS115获得重组转化子。用不同浓度的NaC l和H2O2处理重组毕赤酵母转化子,结果表明该转化子具有一定的抗盐和抗氧化能力。建立了RsPrx1重组毕赤酵母表达体系,能够有效表达具有生物活性的外源过氧化物酶。 相似文献
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为了研究萝卜过氧化物酶对植物生长的影响,用不同浓度的粗提萝卜过氧化物酶(RsPOD)对黄瓜叶面喷施,测定黄瓜果实中过氧化物酶(POD)、过氧化氢酶(CAT)、超氧化物歧化酶(SOD)的活性,维生素C、叶绿素和可溶性蛋白的含量,并对过氧化物酶同工酶谱进行了分析。结果表明,外施RsPOD对黄瓜果实POD、SOD、CAT活性均有不同程度的促进作用;增加维生素C和可溶性蛋白的含量,对叶绿素含量几乎没有影响。POD的同工酶谱带数目没有发生明显变化。由此推测,外源RsPOD可以提高黄瓜果实的抗氧化能力而对光合作用影响不大。 相似文献
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为了探讨转萝卜过氧化物酶基因RsPrx1的功能以及不同诱导条件对转基因毕赤酵母中外源基因表达功能的影响,选择诱导-不诱导和不诱导-诱导2种培养条件,观察NaCl、H2O2、温度等变化时,转萝卜过氧化物酶基因RsPrx1毕赤酵母的抗性变化.试验结果表明:转萝卜过氧化物酶基因RsPrx1的酵母菌株的抗盐、抗氧化和抗高温性能高于野生菌株,且诱导-不诱导培养条件下萝卜过氧化物酶基因RsPrx1的抗盐、抗氧化及抗高温和低温功能高于不诱导-诱导培养条件,其中,抗盐和抗高温功能最强.由此推论:萝卜过氧化物酶基因RsPrx1具有抗盐、抗氧化和抗高温功能,且诱导-不诱导培养条件是研究外源基因功能的最佳培养条件. 相似文献
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萝卜过氧化物酶基因片段的cDNA克隆及花期表达谱分析 总被引:1,自引:0,他引:1
通过研究过氧化物酶(POD)活性在心里美萝卜花期的变化以及萝卜POD基因的结构,探讨POD的基因结构和功能之间的关系。测定了萝卜花期 不同时间各个部位中POD活性,用改进的半定量RT-PCR分析了过氧化物酶基因(Rsprx)的表达谱,并通过RT-PCR克隆过氧化物酶基因的cDNA片段。结 果表明,心里美萝卜花期不同器官中的POD活性具有明显的变化,地上部分和地下部分POD活性差异显著,在结荚期的木质部II中达到峰值(17.53± 0.35)×103 U8226;g-1(FW)。不同器官中Rsprx的表达差异明显,花蕾和荚中表达最强。从花蕾和荚中得到4个长度为400 bp左右的cDNA克隆片段,序列 比对结果显示,与棉花的花器官过氧化物酶基因Ghpod具有较高的同源性和结构相似性。因此认为POD与萝卜花期生长发育有一定的关系,且有多种 过氧化物酶基因在该过程中表达。 相似文献