鸭坦布苏病毒E蛋白的原核表达

在大肠杆菌中表达鸭坦布苏病毒(duck tembusu virus,DTMUV)奉贤株的主要结构蛋白E。本研究利用RT-PCR方法扩增出E基因,将其克隆至原核表达载体p ET-30a,构建重组质粒p ET-E。将其转化大肠杆菌BL21(DE3),在IPTG的诱导培养下重组蛋白成功获得了表达。SDS-PAGE结果显示,表达的重组蛋白分子量为63 ku。Western blot分析表明,该蛋白能与抗His标签的鼠单克隆抗体发生特异性反应。以上结果表明,在大肠杆菌中成功表达了DTMUV主要结构蛋白E。     

马铃薯套种玉米不同种植模式研究

对全程机械化生产和传统生产2种模式下马铃薯套种玉米效果进行比较。结果表明,机械化生产能显著降低生产成本(降低了1 572元/hm~2),利润增加10 782元/hm~2,达到了降低成本、提高经济效益的目的。     

鸽常规石蜡切片制作技术的体会及改良

为了使传统的石蜡切片技术满足病理研究与诊断的需要,针对鸽的石蜡切片制作过程中易出错的环节,探讨制作优良鸽石蜡切片的具体方法,对制作过程中取材、固定、修整、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色及封固等步骤进行改良,镜检结果表明获得了高质量的石蜡切片。     

无乳链球菌dnaJ基因缺失株的构建及其致病性研究

为研究dnaJ基因序列与细菌致病力的关系,本研究构建了dnaJ基因缺失株和互补株,并对其致病性进行验证。参照GenBank中无乳链球菌GD201008-001(登录号:NC_018646)目的基因序列分别设计引物,PCR克隆dnaJ基因上、下游同源臂基因序列,通过融合PCR将两个片段连接到一起,构建dnaJ基因上、下游同源臂融合片段,PCR克隆含有启动子序列的dnaJ基因。将dnaJ基因上、下游同源臂融合片段和含有启动子序列的dnaJ基因分别连接链球菌-大肠杆菌穿梭质粒pSET4s和pSET2,电转化GD201008-001感受态细胞,构建dnaJ基因缺失株ΔdnaJ和互补株CΔdnaJ。通过分析ΔdnaJ和CΔdnaJ的遗传稳定性与形态学变化对dnaJ上、下游基因转录的影响,以及生长速率和斑马鱼攻毒试验评价dnaJ基因对无乳链球菌毒力的影响。经PCR鉴定和测序证明,ΔdnaJ和CΔdnaJ构建成功;与野生株GD201008-001相比,ΔdnaJ和CΔdnaJ在细菌染色形态上均无明显差异,但ΔdnaJ在液体培养基中的生长速度明显减缓;dnaJ基因的缺失未对相邻基因的转录造成影响;ΔdnaJ对斑马鱼的毒力明显下降,对斑马鱼的LD_(50)为5.68×10~4 CFU,约是野生株的241倍。dnaJ基因对无乳链球菌的毒力有显著影响,本试验结果为进一步探究无乳链球菌dnaJ基因的功能提供了参考依据。     

中华蜜蜂和意大利蜜蜂工蜂幼虫和蛹呼吸代谢的研究

为了比较研究中华蜜蜂和意大利蜜蜂工蜂幼虫和蛹的呼吸代谢,为蜜蜂生理学、生态学、能量学及饲养管理学提供理论指导。本试验用华勃式微量呼吸检压仪测定了中华蜜蜂和意大利蜜蜂工蜂幼虫期和蛹期的耗氧量、二氧化碳释放量、呼吸商及代谢率。结果显示:中华蜜蜂和意大利蜜蜂工蜂幼虫期和蛹期的耗氧量、二氧化碳释放量及代谢率的变化趋势大致相同,在预蛹期呼吸代谢较低,蜕皮时升高。中华蜜蜂幼虫期和预蛹期的呼吸商为0.838,意大利蜜蜂为0.870;中华蜜蜂蛹期的呼吸商为0.760,意大利蜜蜂为0.770。中华蜜蜂和意大利蜜蜂工蜂幼虫期的代谢率都是随体重的增加而降低,而蛹期的代谢率与则体重无明显相关性。     

正确把握农产品市场信息

准确把握农产品市场信息关键应抓好三个环节. 一是抓信息源.要获取准确及时的信息,首先要通过各种形式在大中城市和销售区市场设立窗口或信息联络点,利用这个点收集全国各地及国际市场的生产和需求情况,然后对获取的信息分类排队、分析筛选,并结合国家宏观调控政策有选择地采用.     

1型鹅星状病毒ORF2蛋白原核表达及其多克隆抗体的制备与鉴定

[目的] 利用原核表达系统表达1型鹅星状病毒（Goose astrovirus 1,GAstV-1）结构蛋白ORF2,并制备其多克隆抗体。[方法] 根据GAstV-1 TZ03株基因序列,对ORF2基因序列进行大肠杆菌密码子偏爱性优化和合成,将其克隆至原核表达载体pET-30a（+）,构建重组质粒pET-ORF2,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞,IPTG诱导表达重组蛋白,通过SDS-PAGE和Western blotting鉴定重组蛋白;将鉴定正确的重组蛋白纯化后免疫家兔制备多克隆抗体,以间接免疫荧光试验鉴定多克隆抗体的特异性。[结果] 酶切和测序结果显示,成功获得重组质粒pET-ORF2;SDS-PAGE结果显示,表达的重组蛋白分子质量约为70 ku,主要以包涵体形式存在;Western blotting结果表明,该蛋白能与抗His标签鼠单克隆抗体发生特异性反应。间接ELISA检测制备的兔抗ORF2蛋白多克隆抗体效价达1：128 000;间接免疫荧光试验结果显示,制备的多克隆抗体能与GAstV-1发生特异性反应。[结论] 原核表达的GAstV-1 ORF2重组蛋白具有良好的免疫原性,制备的兔源多克隆抗体具有较高的效价和特异性,为研制GAstV-1相关诊断试剂奠定了基础。     

地势起伏成品油管道最大输量的优化

根据某管道主要采取的旁接油罐和密闭两种输送方式,建立了优化数学模型,运用动态规划方法进行了优化分析.基于Visual Basic 6.0编程,进行迭代运算,得到了相应优化结果,可以用于指导该管道的优化运行.     

巴西陆稻IAPAR9引种及高产栽培技术研究

通过栽培方式、播期等试验，分析了巴西陆稻IAPAR9的生理特性、生长环境和经济性状，总结出了一套适合于安化山区的高产栽培技术。