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1.
通过制备鸡脂滴包被蛋白(Perilipin1)的抗血清,分析鸡Perilipin1的组织表达特性并推测其在脂肪组织脂类代谢过程中发挥的功能。利用RT-PCR的方法扩增鸡Perilipin1基因,并将其构建到含有His标签的表达载体pET-28a上。将阳性重组表达质粒pET-28a/Perilipin1导入大肠杆菌BL21,在IPTG诱导下产生His/Perilipin1融合蛋白,对产生的His/Perilipin1蛋白包涵体进行复性处理,复性后以其为免疫原制备鸡Perilipin1多克隆抗血清。通过ELISA和Western blot的方法检测抗血清的效价及特异性,并利用此抗血清分析鸡Perilipin1在各种组织中的表达特性以及比较其在高、低脂系公鸡间的表达差异。ELISA和Western blot结果表明,本试验获得了效价高、特异性强的鸡Perilipin1抗血清,同时Western blot检测Perilipin1的组织表达特性结果表明,Perilipin1仅在鸡脂肪组织中表达,而在肝脏、十二指肠、胸肌、腿肌、肌胃、心脏、脾脏、肾脏等组织中未检测到表达信号;Perilipin1在肉鸡高脂系脂肪组织中的表...  相似文献   
2.
本研究旨在克隆鸡(Gallus gallus)脂滴包被蛋白基因(Perilipin1)的cDNA序列,并检测其在鸡前脂肪细胞分化过程中的亚细胞定位.本研究以7周龄肉鸡腹部脂肪组织为材料,采用RT-PCR和RACE的方法扩增并克隆了鸡Perilipin1基因的5'UTR、CDS和3'UTR片段,分析了该基因的结构;以鸡原代前脂肪细胞为材料,利用免疫荧光及激光共聚焦技术,在诱导分化的不同时间点(12~120 h),检测了鸡Perilipin1在前脂肪细胞中的表达位置.结果表明,本研究获得的鸡Perilipin11基因5'UTR、CDS和YUTR序列总长度为2 379 bp,该基因由9个外最子、8个内含子组成(ATG位于第二外显子上);在鸡原代前脂肪细胞诱导分化过程中,Perilipin1始终包被在脂滴周围.综上,本研究成功克隆了鸡Perilipinl基因的完整cDNA序列并确定了Perilipin1在鸡前脂肪细胞分化过程中与脂滴的空间位置关系,该结果为深入开展鸡Perilipinl基因的功能研究,揭示鸡脂肪代谢的分子遗传机理提供了重要的理论依据.  相似文献   
3.
生物技术在家禽育种中的应用   总被引:1,自引:1,他引:0  
传统的家禽育种综合了数量遗传学、繁殖生理学、统计学、计算机科学和家禽管理学等学科的特点,共同指导并完成了家禽的遗传改良。为了更好地满足市场对家禽日益提高的要求,育种家有必要借助于分子遗传学、有关的技术鉴别和克隆影响经济性状的主效基因,或发现与这些基因紧密连锁的标识基因,更有效的选择和培育种鸡。在当前家禽育种中应用最广的生物技术方法主要有两项:分子标记技术和基因转移技术。文章就目前应用于家禽育种的分子标记技术和基因转移方法作以综述。  相似文献   
4.
优质黄鸡矮小型品系胫长和胫宽的双向选择效应分析   总被引:2,自引:1,他引:1  
以温氏育种公司黄羽矮小型品系N301第七世代育种鸡群为素材,根据10周龄公鸡胫长和胫宽的测定结果,组建高低胫长、胫宽双向选择系零世代,测定各系后代即双向选择系一世代公母鸡的体重、胫长、胫宽,结果表明:胫的双向选择对后代公母鸡的胫长产生了明显的效果,长胫长系的后代公母鸡的胫长显著(P<0.05)大于短胫长系;宽胫宽系的后代公母鸡的胫宽显著(P<0.05)大于窄胫宽系。  相似文献   
5.
鸡的营养与免疫   总被引:1,自引:0,他引:1  
蛋白质、氨基酸是构成机体免疫系统的基本物质 ,与免疫系统的组织发生 ,器官发育有极为密切的关系。矿物质元素、维生素等也是免疫应答反应不可缺少的物质成分 ,在动物的防疫系统中也起着重要的作用。这些营养物质在机体内的水平影响动物免疫功能的发挥 ,营养不良与过量均影响免疫系统的发育及功能的发挥 ,改变免疫力 ,降低抵抗疾病的能力。因此 ,合理的营养可视为一种间接调节机体免疫能力的手段。1 蛋白质与免疫机体受到外来抗原刺激后 ,细胞免疫发挥作用的效果受体内蛋白质水平的影响。雏鸡日粮中蛋白质缺乏 ,抑制T细胞免疫功能 ,同时…  相似文献   
6.
梅花鹿胰岛素样生长因子Ⅰ(IGF1)基因的克隆及序列分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
近20年来,由于人们对胰岛素功能认识的不断深入,致使人们对胰岛素样生长因子的研究也不断深入,尤其是在分子生物学方面取得了很大的进展。IGF1又叫生长介素,是由70个氨基酸组成的单链碱性多肽,分子质量为75 ku,既具有胰岛素样作用,又可促进细胞的分化和增殖,在人和其他脊椎动物的正常生长和发育过程中起着重要作用。IGF1在进化上相当保守,人们在畜禽(如猪、牛、羊和鸡等动物)中已进行了大量而深入的研究。但是,目前关于梅花鹿IGF1基因方面的报道却很少,在网上也只是公布了马鹿的IGF1基因的5′UTR序列。试验利用牛的IGF1基因序列(Acc…  相似文献   
7.
鸭病毒性肝炎病毒的分离与鉴定   总被引:2,自引:0,他引:2  
鸭病毒性肝炎(Duck virus hepatitis,DVH)是雏鸭的一种高度致死性的病毒性传染病,以发病急、传染快、病程短、死亡率高为主要特征。临床表现痉挛抽搐和角弓反张等神经症状,病理变化以肝脏肿大和出血为DVH特征性病变,DVH严重影响养鸭业的发展。引起DVH的病毒有3个血清型,即Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型。Ⅰ型(古典型)鸭肝炎病毒最  相似文献   
8.
为了验证过氧化物酶体增殖物激活受体(PPAR)γ选择性抑制剂T0070907对鸡PPARγ基因表达的促进作用,本研究利用荧光定量PCR检测了不同浓度T0070907对鸡成纤维细胞(DF-1细胞)中PPARγ基因mRNA转录水平的影响,结果显示,随着T0070907浓度的增加,鸡PPARγ基因的表达量逐渐升高,并且在T0070907浓度为5μmol/L时极显著高于对照组(p<0.01);利用western blot检测了T0070907对PPARγ蛋白表达的影响,结果显示,5μmol/L的T0070907对DF-1细胞中PPARγ2蛋白的表达有一定的促进作用;利用双荧光素酶报告基因技术检测了不同浓度T0070907对PPRE报告基因活性的影响,结果显示,随着T0070907浓度的增加,DF-1细胞中PPRE报告基因活性逐渐增强,并且在T0070907浓度为0.5μmol/L时该报告基因活性显著高于对照组(p<0.05),当T0070907浓度为2μmol/L、5μmol/L时,与对照组之间的差异达到极显著水平(p<0.01);利用双荧光素酶报告基因技术检测了T0070907和罗格列酮(Rosi)对PPRE报告基因活性的影响,结果显示,单独添加T0070907或Rosi均可显著增强PPRE报告基因活性(p<0.05),同时,添加T0070907并不能降低Rosi对PPRE报告基因活性的促进作用。本研究结果表明,作为PPARγ抑制剂的T0070907对鸡PPARγ基因的mRNA的转录水平、蛋白表达及其蛋白活性均具有促进作用,推测与哺乳动物不同,鸡PPARγ可能具有其独特的表达方式和调控机制。本研究结果对完善PPARγ抑制剂在生理学及药理学上的研究、为PPARγ功能研究选择准确的拮抗剂、预防和治疗炎症相关疾病等方面具有重要意义。  相似文献   
9.
通过对哈尔滨部分地区规模化鸡场疑似鸡传染性支气管炎(IB)病例进行解剖检查,统计分析病变规律,并应用RT—PCR方法对疑似病例进行鸡传染性支气管炎病原检测,以掌握哈尔滨地区鸡传染性支气管炎发病情况,可进一步补充和丰富黑龙江省鸡传染性支气管炎的流行病学资料,为规模化鸡场防控该病提供科学依据。  相似文献   
10.
为制备鸡肝脏型脂肪酸结合蛋白(L-FABP)的多克隆抗血清,并分析L-FABP的组织表达特性,利用RT-PCR扩增L-FABP基因,构建鸡L-FABP基因的GST融合蛋白表达质粒pGEX-4T/L-FABP。将重组表达质粒转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导产生GST/L—FABP融合蛋白,用亲和层析纯化目的蛋白,将纯化的GST/L—FABP融合蛋白免疫家兔制备抗血清,并利用此抗血清分析鸡0FABP基因的组织表达特性。诱导得到了1个40ku(14ku L—FABP+26kuGST)的融合蛋白,获得效价较高、特异性强的鸡L-FABP的抗血清。鸡L-FABP的组织表达特性研究结果表明,该基因在肝脏和小肠组织中有较高表达,但在心脏、脂肪、肌肉、肌胃、脾、肺和肾中没有检测到表达信号。  相似文献   
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