河北省西瓜枯萎病菌生理小种分化及其分布

采用国际公认的鉴别寄主Sugar Baby、Charleston Gray和Calhoun Gray的病株率作为抗性分级标准,对采集于河北省西瓜种植区46个县（市）的西瓜枯萎病菌系进行了致病性测定。根据鉴别寄主对供试菌系的抗感反应,将46个西瓜枯萎病菌系划分为0号、1号和2号3个不同的生理小种,分别包括8,30和8个菌系,占供试菌系的17.4%、65.2%和17.4%;0号生理小种菌系致病性最弱,仅使品种Sugar Baby感病,以冀中和冀南居多;1号生理小种菌系致病力中等,使鉴别寄主Sugar Baby和Charleston Gray感病,而使Calhoun Gray抗病,分布在整个河北省西瓜种植区;2号生理小种的菌系致病力最强,使3个鉴别寄主均能感病,主要分布在冀中和冀北。     

棉花组织总RNA的快速提取方法

棉花组织富含多糖、棉酚等次生代谢物质，较难提取高质量的RNA。本研究在前人方法的基础上对快速提取棉花组织总RNA的方法进行了探讨。利用改进的CTAB异硫氰酸胍裂解缓冲液，获得的RNA完整性好，无DNA污染，含量高，每克鲜组织能提取0．5mg总RNA，OD260／OD280比值均在1．7～2．0之间。该方法不但适用于叶片提取总RNA，而且在根、花冠、种子、发育的纤维中均能提取出高质量的RNA，同时节约成本，相对于试剂盒提取RNA，成本大为降低。     

SSR和AFLP技术鉴定棉花遗传资源的比较研究

选用58个陆地棉抗枯、黄萎病品种,采用SSR和AFLP技术对棉花品种资源进行鉴定,并对两种标记方法加以比较,探讨两种方法的应用效果,为分子标记技术在棉花种质资源研究上的进一步应用提供理论依据.     

利用cDNA-AFLP技术分离与小麦耐盐性相关的 cDNA片段及基因的可行性研究

利用cDNA-AFLP技术分析了耐盐性受主效基因控制的小麦品系98-160盐胁迫前后基因表达的变化。对112个克隆的cDNA片断进行了tBlastx分析，约有65.2%的基因与已知基因有较高的同源性，从中筛选出18个与小麦耐盐性密切相关的片段，主要包括转录因子、与离子转运有关的蛋白、信号传导相关蛋白、胁迫相关蛋白以及与蛋白-蛋白相互作用有关的蛋白。目前已得到部分序列的全长cDNA，RT-PCR结果表明一些基因与耐盐性密切相关。     

河北省西瓜枯萎病菌生理小种分化及其分布

采用国际公认的鉴别寄主SugarBaby、CharlestonGray和CalhounGray的病株率作为抗性分级标准,对采集于河北省西瓜种植区46个县(市)的西瓜枯萎病菌系进行了致病性测定。根据鉴别寄主对供试菌系的抗感反应,将46个西瓜枯萎病菌系划分为0号、1号和2号3个不同的生理小种,分别包括8,30和8个菌系,占供试菌系的17.4%、65.2%和17.4%;0号生理小种菌系致病性最弱,仅使品种SugarBaby感病,以冀中和冀南居多;1号生理小种菌系致病力中等,使鉴别寄主SugarBaby和CharlestonGray感病,而使CalhounGray抗病,分布在整个河北省西瓜种植区;2号生理小种的菌系致病力最强,使3个鉴别寄主均能感病,主要分布在冀中和冀北。     

小麦类CTR1基因的克隆和特性分析

 【目的】克隆小麦类CTR1基因（TaCTR1），研究其在各种胁迫条件下的表达、亚细胞定位和过量表达TaCTR1对转基因烟草耐盐性的影响。【方法】利用RACE结合RT-PCR技术克隆TaCTR1，利用半定量RT-PCR研究TaCTR1在各种非胁迫及ABA处理条件下的表达，通过烟草转化研究过量表达TaCTR1对转基因植株耐盐性的影响。【结果】TaCTR1全长2 635 bp，编码759个氨基酸，在其羧基端有一个非常保守的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶结构域，该结构域含有ATP结合位点和一个钙调素结合位点；TaCTR1与其它植物中CTR1的氨基酸序列同源性较高。TaCTR1的表达受NaCl和干旱胁迫的诱导，当用30μmol?L-1 ABA对小麦幼苗进行处理时，TaCTR1的表达受到抑制，当将小麦幼苗转移至无ABA的Hoagland培养液时，TaCTR1的表达又逐渐升高。利用洋葱表皮细胞进行瞬时表达显示TaCTR1可能定位于细胞质膜。过量表达TaCTR1的转基因烟草植株耐盐性下降。【结论】 TaCTR1是小麦中克隆的第一个CTR1基因，TaCTR1:GFP可能定位于细胞质膜，过量表达TaCTR1的烟草植株耐盐性下降说明TaCTR1是植物耐盐信号传导途径的负调控因子。     

西瓜枯萎病菌最优RAPD体系的建立

采用完全随机试验，对适合西瓜枯萎病菌的最优RAPD体系(包括随机引物浓度、模板DNA浓度、Taq DNA聚合酶浓度以及扩增反应中的退火温度)进行了探索，寻求各因素间的最优组合，最终得到了条带清晰的最优RAPD体系。反应体积为25μL，其中随机引物浓度为10μmol／L，Taq DNA聚合酶为1．25U，模板DNA度为1．6md/L，dNTPs浓度为2mmol／μL，扩增反应的退火温度为37℃。     

中国抗枯、黄萎病陆地棉材料分子水平的遗传差异评价

 采用SSR和AFLP分子标记技术，对中国不同年代培育的54个抗枯、黄萎病陆地棉品种（系）分子水平的遗传差异进行了研究。22对SSR引物和20个AFLP引物组合共扩增出446个多态性标记，每个品种平均8.26个。采用SPSS11.5软件计算欧氏距离，中国抗病品种间欧氏距离分布在5.568～11.790之间，平均值为8.906；单一品种欧氏距离平均值为8.530～10.011，高于欧氏距离总平均值的品种共10个，占品种总数的18.52%；85.55%的品种欧氏距离值分布于7.000～10.000之间，表明中国供试抗病品种群体的遗传基础较为狭窄。作为比较对照的4个国外品种间欧氏距离变化在9.055～10.724之间。国内品种与国外品种之间的欧氏距离介于6.481～12.490，82.02%的品种欧氏距离值分布于8.000～11.000之间，表明国外品种与国内品种之间遗传差异较大。基于SSR和AFLP整合数据的聚类分析，58个品种被划分为5个SAG（SSR&AFLP-based groups）分子类群，SAG的划分与品种系谱来源有较强的相关性。     

MITE转座元件在植物中的研究进展

  MITE（miniature inverted repeat transposable element）是一种新近发现的DNA转座元件, 其结构与非自主元件相似,具有TIR或TSD结构,但又具有反转录转座元件的高拷贝性。MITE广泛分布于真核生物基因附近或内部,主要包括Tourist和Stowaway两种类型,通过相应的自主转座元件编码的反转录酶识别TIR序列完成扩张。它插入位点的倾向性以及高度重复性,使其在基因的表达调控和遗传进化上发挥重要的作用。本文在简要介绍MITE转座元件的结构及转座机制的基础上,综述了植物MITE元件在基因表达调控、遗传多样性评价及基因（组）进化方面的研究进展,并对MITE转座元件在植物中的应用前景进行了展望。     

西瓜品种间亲缘关系的AFLP分析

为了解西瓜品种间的亲缘关系,利用AFLP指纹图谱分析技术,对48个国内外西瓜品种进行了基因组DNA多态性分析。结果表明:11对AFLP引物共产生490条DNA带,平均每个引物组合扩增出44.5条带,其中,96条为多态性带,占总带数的19.6%;根据DNA谱带计算品种间遗传相似系数,其变化范围在0.32~0.95之间,平均相似系数为0.82,说明西瓜品种间同源性较高,遗传基础狭窄。用NTSYS软件进行聚类分析,48个西瓜品种被划分为6个类群(Watermelon groups,简称WGs)。其中WGI和WGII分别包括30、14个西瓜品种,两者占总数的91.7%。其余WGIII、WGIV、WGV和WGVI均包括1个品种,它们都与WGI和WGII之间有较大的差异。WGI又分为5个亚群,其中WGI-1品种最多,占60%;WGII又分为3个亚群,其中WGII-2含品种最多占85.7%,说明多数品种亲缘关系较近,只有少数品种亲缘关系较远。此外,本研究表明,AFLP指纹分析技术具有很高的分辨率,能够揭示西瓜品种间的差异,是鉴定西瓜品种的有力工具。