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对猪体细胞克隆技术中关键步骤之一的去核方法作了较深入的研究。结果表明,由本实验室改进的Willadsen去核法——二步挤压去核法,无论在去核操作成功率(73.9%)上还是在去核效率(81.2%)上都明显好于McGrath-Solter去核法(42.5%、67.4%,P〈0.05);同时,本试验还发现,卵母细胞成熟培养36h后去核组去核效率(89.1%)显著地高于成熟培养44h后去核组(55.8%,P〈0.05),而核移植重构胚的发育率2个组间无显著差异。 相似文献
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4冷冻与解冻方法本研究采用两步法冷冻保存技术。卵母细胞进行随机分组后,转移到预先在37℃恒温台上平衡的预处理液中,平衡5m in,再转到玻璃化冷冻液中。用做好标记的GLT、OPS、GM P分别吸入含玻璃化液卵母细胞,每管8 ̄12枚细胞。然后直接投入液氮中;实验前2h预先37℃平衡解冻液,从液氮中取出冷冻管,在37℃水浴中晃动10秒,立即取出拭去水珠,将内容物吹入表面皿中(0.5m ol/L蔗糖溶液),然后转入新鲜的蔗糖溶液中平衡5m in,再转入到0.25m ol/L蔗糖溶液中平衡5m in,最后在TCM199液平衡10m in,以充分洗去冷冻保护剂。5卵母细胞冷冻效果评价… 相似文献
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猪圆环病毒(Porcine circovirus,PCV)属于圆环病毒科、圆环病毒属,为单股负链环状DNA病毒。该病毒平均直径为17nm,无囊膜,呈正十二面体对称,只有一条共价闭合环状的单链DNA。根据PCV的致病性、抗原性及核苷酸序列,将其分为PCV-1和PCV-2两型。从PK-15细胞系上得到的PCV无致病性,被定为PCV-1型;而具有致病性,能引起猪断奶仔猪多系统衰竭综合征(Postweaningmultisystem—icwastingsyndrome,PMWS)的PCV被定为PCV-2型。PCV一1基因组全长为1758~1760bp,PCV-2全长为1768bp。 相似文献
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益生菌是通过改善、平衡宿主的肠内菌群,对宿主能起到有益作用的活性微生物.2001年世界卫生组织也对益生菌作了如下定义:通过摄取适当的量,对食用者的身体健康能发挥有效作用的活菌.只有对宿主能发挥显著有效作用,能够确保安全性,存活在食品中能保持有效的菌数,能耐受胃液和胆汁,能活着到达肠内并在肠内增殖,廉价且容易处理的菌群才可以称作益生菌. 相似文献
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猪卵母细胞冷冻保存研究 总被引:11,自引:0,他引:11
【目的】本研究试图通过比较猪卵母细胞超低温冷冻保存方法、冷冻承载工具、冷冻卵母细胞的类型,从而有效地保存猪卵母细胞;【方法】利用屠宰场卵巢采集的卵母细胞,以台盼蓝染色、二乙酸荧光素(FDA)染色鉴定卵母细胞冷冻后的成活率,以体外成熟和体外受精鉴定卵母细胞冷冻后的发育能力,研究了不同冷冻方法和不同冷冻保护剂对猪卵母细胞的冷冻效果。【结果】(1)程序化法冷冻保存中,9%乙二醇(EG),10%二甲基亚砜(DMSO),10%甘油(Gly)均对猪MII期卵母细胞有冷冻保护作用,极显著高于对照组(FDA染色成活率33.8%,25.8%,23.5% vs 2.5%,P <0.01),且以9%EG的效果最好,显著高于另外两组( 33.8% vs 25.8%,23.5%, P <0.05)。(2)玻璃微细管(GMP)法是猪卵母细胞超低温冷冻的较好方法,以普通的麦管(Straw)法进行的程序化冷冻为对照组,GMP管法显著提高猪卵母细胞的冷冻成活率(分别为63.3%和34.5%,P<0.05)。(3)在玻璃化冷冻方法中,不同的冷冻液载体对猪卵母细胞冷冻成活率有影响。以EFS40为冷冻液,Straw和GMP管作冷冻液载体,卵母细胞的成活率分别为45.0%和65.9%,二者差异显著(P <0.05)。(4)用Straw的程序化冷冻法和用GMP管的玻璃化冷冻法对猪GV期卵母细胞冷冻均有效,但二者差异显著(成活率分别为30.0%和59.7%,P<0.05)。冷冻后继续培养,分别有2.8%和6.3%的卵母细胞周围颗粒层发生扩散。(5)冷冻对MII期卵母细胞的发育潜能影响较大,用新鲜精液使其受精,仅有4.9%的受精卵分裂,极显著低于对照组的49.5%(P<0.01);发育至4-细胞期的比例为1.7%,但未能发育至8-细胞期以上胚胎。【结论】选用MⅡ期卵母细胞、以GMP管为冷冻承载工具、应用玻璃化冷冻方法能够较好地保存猪卵母细胞,为进一步完善猪卵母细胞超低温冷冻保存技术体系提供了参考依据。 相似文献
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鸭传染性浆膜炎是由鸭疫里默氏杆菌(Riemerella anatipestifer,RA)引起的一种接触性传染病,主要侵害1~8周龄的雏鸭。鸭传染性浆膜炎于1932年首次报道于纽约长岛3个鸭场之后,英国、加拿大、挪威、前苏联、澳大利亚、丹麦、德国等国家和地区都相继有报道,并且在野鸭、火鸡、雉鸡、鸡、珍珠鸡、 相似文献
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