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1.
应用MTT比色法,以四因素四水平L16(45)的正交试验测定E2、P4、OT和PGF2α四种激素对猪的外周血单个核细胞(PBMC)的转化效果。结果显示,所选的4种激素在不同浓度组合时刺激PBMC转化的作用不同。这4种激素对PBMC的转化影响的强度依次为:PGF2α、OT、E2、P4。在试验剂量范围内,E20.1 pg/mL、P41 ng/mL、OT 10 pg/mL、PGF2α100 ng/mL时,其共同作用对PBMC转化活性最强。提示在不同生理时期,由于机体内各种激素浓度变化不同,免疫系统也发生相应的变化。  相似文献   
2.
对山羊子宫内膜基质细胞进行分离与体外培养,研究其生长特性,并对其进行免疫细胞化学染色鉴定。结果表明,山羊子宫内膜在37℃条件下,以2 g/L的胶原酶Ⅰ型消化3~4 h效果最好;采用过滤—低速离心—沉降相结合的方法分离山羊子宫内膜基质细胞效果较好,所得细胞在培养后0.5 h开始贴壁,培养12 h后,可见梭形和多角形2种形态的细胞,3~4 d呈网状铺满皿底,有明显的重叠生长现象;免疫细胞化学染色显示这2种形态的细胞均表达波形蛋白,阳性率可达95%以上,不表达角蛋白。说明采用本文所述的消化和分离方法可获得高纯度的子宫内膜基质细胞。  相似文献   
3.
分离1日龄长白仔猪的胰腺细胞后,通过显微镜和电镜观察细胞生长形态和超微结构,运用细胞计数法制作细胞生长曲线测定其群体倍增时间,采用免疫组化法测定细胞生长不同时期的表面标志蛋白的表达,用肝细胞因子和尼克酰胺联合诱导其向功能性G细胞分化,并测定了分化细胞对葡萄糖的反应能力。结果显示获得的仔猪胰腺祖/干细胞具有多种形态,以神经样细胞克隆生长占优势,电镜超微结构证实其具有核质比高、细胞器不分化的干细胞态特征。试验测得第1代和第3代群体的倍增时间分别为96.0、307.7h,仔猪胰腺祖/干细胞表达胚胎干细胞标志Oct4、SSEA-1、SSEA-4,也表达胰腺干细胞的标志PDX-1、CK7等。仔猪胰腺干/祖细胞的向β细胞诱导分化细胞对22mmol/L葡萄糖的刺激产生强烈的胰岛素分泌反应,胰岛素分泌量可达321.75mIU/L。结果证实仔猪胰腺千/祖细胞具有干细胞和胰腺祖的表面标志和超微结构,同时具有分化成分泌胰岛素β细胞的能力。  相似文献   
4.
探讨了妊娠早期山羊胎儿IL-4水平与外周血单核细胞(PBMC)增殖活性的关系。用MTT法,检测孕早期山羊胎儿匀浆上清液(FHS)在不同浓度下对PBMC转化增殖活性的影响,设立孕130 d胎儿血清(FS)及FHS PHA-P对照组;检测蛋白质浓度在1×10-4mg/mL时IL-4的含量,并与转化后的含量进行比较。结果:妊娠早期,FHS对PBMC转化活性的影响随着妊娠的发展而逐渐降低,但均低于妊娠后期对照组,FHS蛋白质浓度在1×10-4~1×10-5mg/mL时,对PBMC的转化增殖效果均较好(P<0.05),且与PHA-P具有协同作用;妊娠早期FHS的IL-4水平随着妊娠的发展呈现上升的趋势,且均高于FS对照组,FHS的IL-4水平与转化后无显著差异(P>0.05)。妊娠早期FHS IL-4水平的上升与PBMC转化活性下降之间呈负相关关系,正常妊娠早期主要是Th2型细胞因子在起作用,因此可以说明,PBMC转化活性的下降可能是IL-4发挥免疫抑制作用的结果,进而说明,妊娠早期胎儿可能通过自身分泌一些Th2型细胞因子,在母体子宫局部免疫中发挥免疫抑制作用,使其自身不被母体排斥,使妊娠能够顺利进行。  相似文献   
5.
缺乏供体细胞制约着胰岛替代疗法在Ⅰ型糖尿病治疗过程中的应用。本研究对实验室分离保存的胎猪胰腺干细胞(fetal porcine pancreatic stem cells,FPPSCs),体外诱导分化为胰岛素分泌细胞以及移植治疗裸鼠糖尿病的能力进行了深入研究,以探讨该细胞株作为异种供体细胞的潜力。研究结果表明,该细胞体外增殖活力旺盛,其形态及表面抗原表达特征与间充质干细胞极其相似,除表达胰腺干细胞相关标志外,FPPSCs还表达一些胚胎干细胞的相关标志。采用无血清诱导方案诱导2周后,FPPSCs形成DTZ染色阳性的胰岛样细胞团(islet-like cell cluster,ICC),该细胞团表达胰岛素、Glut-2等胰岛素分泌细胞功能相关的蛋白。RT-PCR结果显示,诱导后,胰腺干细胞相关标志表达减弱,而成熟胰岛素分泌细胞相关标志表达增强。葡萄糖刺激实验结果显示,诱导后,FPPSCs合成、分泌胰岛素和C-肽的能力显著增强(P<0.05)。将诱导2周后的细胞移植到糖尿病裸鼠腹腔内,可缓解其高血糖状况。结果提示,FPPSCs具有间充质干细胞的特性,体外能够诱导分化为胰岛素分泌细胞,并具有改善糖尿病裸鼠高血糖症状的...  相似文献   
6.
山羊子宫内膜腺上皮细胞的分离培养和鉴定   总被引:3,自引:1,他引:2       下载免费PDF全文
为了探讨山羊子宫内膜腺上皮细胞的分离、生长条件以及纯度鉴定,通过2 g/L的Ⅰ型胶原酶置于水浴消化4 h,200目的滤网过滤后进行低速离心,收集沉淀物,沉降洗涤3~5次,将细胞移至24孔培养板置37℃细胞培养箱中进行培养。12 h后开始贴壁生长,腺团开始向外部扩散,生长2~3 d,细胞扩散并出现明显的铺路石状,4~5 d腺团基本扩散开来并呈一定走向继续生长。经免疫组织化学方法进行细胞染色,细胞表达角蛋白的阳性率达90%以上。  相似文献   
7.
应用MTT比色法,以四因素四水平L16(4^5)的正交试验测定E2、P4、OT和PGF2a四种激素对猪的外周血单个核细胞(PBMC)的转化效果。结果显示,所选的4种激素在不同浓度组合时刺激PBMC转化的作用不同。这4种激素对PBMC的转化影响的强度依次为:PGFza、OT、E2、P4。在试验剂量范围内,E2 0.1Pg/mL、P41 ng/mL、OT 10 pg/mL、PGF2a 100 ng/mL时,其共同作用对PBMC转化活性最强。提示在不同生理时期,由于机体内各种激素浓度变化不同,免疫系统也发生相应的变化。  相似文献   
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