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一株裂解性青枯雷尔氏菌噬菌体的分离及生物学特性分析 总被引:2,自引:0,他引:2
【目的】分离并纯化出一株裂解性青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)噬菌体,并测定其各项生物学特性,为开发新的抗烟草青枯病制剂提供依据。【方法】取烟草青枯病重病田中健康烟株的根际土壤制成土壤悬浮液,并通过在青枯雷尔氏菌菌液中加入过滤后的土壤悬浮液富集噬菌体,用双层平板法验证噬菌体的存在后挑取单个最大噬菌斑进行反复纯化,直到得到单一清晰的噬菌斑。纯化后的单个噬菌斑加入对数早期的青枯雷尔氏菌菌液中进行增殖培养,将增殖液按常规方法进行噬菌体颗粒浓缩后,取20μL浓缩液用磷钨酸染色并通过电子显微镜观察噬菌体的形态特征;同时将浓缩液进行SDS-PAGE电泳,观察蛋白条带大小和数量;用λ噬菌体DNA提取试剂盒提取噬菌体增殖液中的噬菌体核酸进行琼脂糖凝胶电泳,确定其基因组片段大小;最后用常规方法测定噬菌体的滴度、最佳感染复数、一步生长曲线,并通过比较加入噬菌体液前后青枯雷尔氏菌菌液的OD600值变化测定其对温度、p H、紫外线、氯仿的敏感性。【结果】分离并纯化出了一株裂解性青枯雷尔氏菌噬菌体,命名为∈RS-1,噬菌斑为圆形,清晰透明,边缘光滑,直径1—2 mm,经电镜观察其形态为蝌蚪状,头部为二十面体的立体对称,直径约为94 nm,并有一带伸缩尾鞘的长尾大约为27 nm×100 nm,按照国际病毒分类委员会分类标准,其属于有尾噬菌体目(Caudovirales),肌尾噬菌体科(Myoviridae)的裂解性噬菌体,核酸性质为ds DNA;噬菌体浓缩液经SDS-PAGE分析至少可以观察到25条蛋白条带,相对分子质量在10—100 k D,说明其蛋白外壳至少含有25个结构蛋白;将提取的DNA进行琼脂糖凝胶电泳显示其条带大于48 kb,符合肌尾噬菌体科基因组大小范围(31—317 kb);生物学特性的测定显示该噬菌体对青枯雷尔氏菌的最佳感染复数为0.01;其吸附和感染青枯雷尔氏菌时的潜伏期约为30 min,爆发期约为80 min,裂解量约为156;该噬菌体的裂解活性在28℃时最高,在28—50℃均较强,但在温度超过60℃后活性基本丧失;其对酸碱的耐受力较强,在p H 3—8的范围内均有较强的裂解活性,当p H值超过9后活性开始降低;其对紫外线有一定的耐受能力,经紫外线照射0—9 min后裂解活性依然较强,12 min后活性开始下降,21 min后活性基本丧失;其对氯仿不敏感,5%浓度的氯仿对其活性基本没有影响。【结论】分离到了裂解性的青枯雷尔氏菌噬菌体,属于有尾噬菌体目,肌尾噬菌体科,经过测定其各项生物学特性可知其潜伏期较短,裂解能力较强,具有很好的杀菌效果,且其裂解活性持续时间长,并能在不同温度、不同酸碱性的环境内有较强的适应能力,具有开发为抗青枯雷尔氏菌菌剂的潜力。 相似文献
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1996~1999年,从恩施州利用、咸丰、恩施、建始采集烟草根结线虫病标样21份,通过形态学、鉴别寄主及生物化学3种方法进行鉴定,结果表明:恩施州烟草根结线虫主要有爪哇根结线虫[Meloidghyme jatanica(Trevb)Chitwood]、南方根结线虫[Meloidogyme incognita(Kofcid and White)Chitwood]号小种,主要分布于利川、恩施。发病烟区在实行轮作的基础上选用抗病品种,并辅以5%涕灭威颗粒剂450g/100m~2或3%米乐尔颗粒剂405g/100m~2根区施药,防效达68.8%~71.0%。 相似文献
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湖北省不同白肋烟品种(系)黑胫病抗性鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
采用田间人工接种烟草黑胫病(Phytophthora parasitica)病菌0号和1号生理小种,对13份白肋烟资源连续两年进行烟草黑胫病田间抗性鉴定。结果表明,在参试13份白肋烟品种(系)中,对0号生理小种表现为抗的品种(系)有27018、27011、2619、2937、27123、2902、鄂烟1号等7份材料;对1号生理小种表现为抗的品种(系)有27018、27011、2619、2937、B0833、27015、27123、2902、鄂烟1号等9份材料。 相似文献
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2004~2005年在湖北省建始县邺州镇黄家湾村进行了10%吡虫啉可湿性粉剂防治十字花科蔬菜蚜虫的药效试验。1材料与方法1·1供试作物供试作物为甘蓝,品种为京丰一号。1·2供试药剂a.10%吡虫啉WP(江苏盐城双宁农化有限公司产品);b.对照药剂:10%吡虫啉WP(杭州天一农化有限公司产品)。1·3试验地点试验地点安排在建始县邺州镇黄家湾村,海拔580m,甘蓝10月20日移栽,每667m2单行栽植4 000株(株距0·5×0·33m),施药时甘蓝为8~10叶。1·4试验设计试验设5个处理:A、10%吡虫啉WP每667m210g,5 000倍;B、10%吡虫啉WP(a)每667m220g,2 500倍;C、10%吡虫… 相似文献
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白肋烟新品种‘鄂烟215’的选育及特性 总被引:1,自引:1,他引:0
‘鄂烟215’由‘MSBurley21’为母本、‘Virginia509’为父本杂交选育而成,2015年4月通过全国烟草品种审定委员会审定。该品种田间长势强,遗传性状稳定,属非转基因烟草。综合经济性状与对照‘鄂烟1号’相当;烟叶外观质量好,主要化学成分含量适宜且协调性好,物理特性好,感官评吸质量中等+,与对照属同一质量档次;抗TMV,抗至中抗黑胫病,中感至感根结线虫病,感至高感赤星病。该品种品质优良,抗病性好,丰产性较好,可作为白肋烟生产的储备品种。 相似文献
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烤烟化学成分与焦油的相关性分析 总被引:1,自引:0,他引:1
以来源于3个省份的56份烤烟品种(系)为研究材料,测定中部叶焦油和6种常规化学成分含量,并由此计算氮碱比、糖碱比和钾氯比等3个相关性状,采用相关分析、通径分析和逐步回归分析等方法初步探讨了9种烟叶化学成分与焦油的相关关系。结果表明,钾和氮碱比均与焦油呈极显著负相关,氯与焦油呈显著正相关,其他化学成分与焦油相关性不显著。各化学成分对焦油的直接作用排序为:钾〉氮碱比〉总氮〉总糖〉烟碱〉还原糖〉氯〉钾氯比〉糖碱比。钾和氮碱比对焦油的影响主要取决于直接作用,烟碱对焦油的影响主要取决于间接作用,总氮和总糖对焦油的直接和间接影响相当。此外,其他化学成分对焦油也存在一定程度的影响。最后,本研究建立了化学成分与焦油的多元逐步回归方程。 相似文献
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