东方百合和亚洲百合鳞片组培试验

百合是重要的切花、盆花和庭院用植物材料。传统的百合繁殖方法如分球、分珠芽或鳞片扦插、鳞片包埋等,存在繁殖系数较小,多代繁殖常造成退化以及种间杂交不亲合等问题。采用组织培养进行百合的快速繁殖和脱毒复壮,可促进百合商品种球的生产和百合新品种的培育。     

矮牵牛Tidal Wave品种遗传转化受体再生体系的建立

以矮牵牛Tidal Wave品种无菌苗叶片为外植体,在附加不同质量浓度激素的MS基本培养基上诱导培养,通过器官发生途径获得再生植株。在附加3.0mg/LBA、0.3mg/LNAA的培养基上获得了90%以上芽的再生率。再生芽在附加0.02mg/LNAA、1.0mg/LKT、5.0mg/LGA3的培养基上发育良好。在3种选择抗生素的筛选中发现,叶片对潮霉素和庆大霉素较为敏感,这2种抗生素质量浓度为5mg/L时,2周内可将外植体全部杀死;而卡那霉素质量浓度达到15mg/L时,芽分化才被完全抑制。因此可确定卡那霉素为理想的选择抗生素,其选择压质量浓度为15mg/L。2种抑菌抗生素中,头孢霉素对叶片再生影响较大;而250mg/L的羧苄青霉素能有效地抑制农杆菌菌株LBA4404的生长,却对矮牵牛叶片的芽分化影响不大,为适宜的抑菌抗生素。     

电子束辐照百合鳞茎后对生长发育的影响及RAPD分析

分别以5、10、15、20、25 Gy电子束剂量辐照百合品种Starfighter和Tiber的鳞茎,发现该剂量梯度明显抑制百合当代的营养生长和生殖生长,但不影响新鳞茎定植后第2代正常营养生长和开花,而且在C 15 Gy 第2代中发现花朵颜色变深、花瓣斑点长突起变短的变异株。以百合幼嫩叶片作为材料,应用RAPD技术分析不同剂量电子束辐照的扩增结果。11个试验组中,有5个随机引物扩增出清晰谱带282条,其中,32条为多态性谱带,多态率为11.35%。RAPD结果显示,电子束辐照百合鳞茎能够引起百合DNA变异,并且辐照剂量与诱变频率呈正相关关系,此外诱变频率还与试验品种、辐照部位及所处的生长期有关。     

东方百合索邦叶烧发生情况调查研究

为降低东方百合索邦发生叶烧的概率,对鳞茎周长、鳞茎储存时间、易感病时期土壤平均温度与百合叶烧之间的关系进行了研究。结果表明:储存时间相同,鳞茎的周长越长,越易发生叶烧;鳞茎周长相同时,种球的储存时间越长,越易发生叶烧;在百合生长的关键时期,土壤温度长期偏低,尤其是长期低于12℃,易发生叶烧。     

新铁炮百合遗传转化体系的建立及zm401基因的导入

以培育无花粉百合新材料为目的，进行了新铁炮百合遗传转化技术的探索。结果表明，以新铁炮百合无菌苗小鳞片为外植体，在附加1.0 mg/L 6-BA 和1.0 mg/L NAA的MS基础培养基上诱导培养，通过器官直接发生途径获得再生植株，再生率达100%。农杆菌介导的遗传转化中，外植体预培养2 d，侵染5 min，共培养5 d，获得12‰的转化率。以此方法用玉米花药发育相关基因zm401转化受体材料，经PCR和PCR-Southern检测证实，zm401已经成功地整合到转化植株基因组中。该研究结果为获得无花粉百合中间材料奠定了基础。     

根癌农杆菌介导的转录因子DREB1A基因在地被菊花中的遗传转化

以地被菊花（Dendranthema grandiflomm cv．White Snow）无菌苗叶片为外植体，在附加不同浓度植物生长调节剂的MS基础培养基上诱导培养，通过器官直接发生途径获得再生植株。结果表明，2．0mg/L 6-BA和0．2mg/L NAA组合可获得93．8％的再生芽。将含拟南芥（Arabidopsis thaliana）逆境诱导转录因子DREB1A基因的植物表达载体pBI-DREB1A导入根癌农杆菌（Agrobacterium tumefaciens）LBA4404，农杆菌介导法遗传转化地被菊花White Snow叶盘，经PCR和PCR—Southem检测，DREB1A基因已整合到转化植株的基因组中。遗传转化过程中，预培养2d后，将OD600=0．5～0．7的根癌农杆菌稀释30倍后侵染叶盘10min，再共培养2d，有利于获得最高遗传转化效率。     

地被菊花Fall Color体细胞胚途径再生、遗传转化及转基因植株的抗寒性检测

【目的】培育耐寒性强的地被菊花[Dendranthema grandiflorum (Ramat.) Kitamura]新材料。【方法】 以Fall Color品种的幼嫩叶片为外植体，探讨胚状体诱导所需的植物生长调节剂浓度和诱导培养时间等条件。【结果】叶片外植体在添加0.75 mg·L-1 2,4-D的诱导培养基上诱导15 d，再进行分生培养，不仅能够诱导胚性愈伤组织形成，还能够诱导胚状体发生，并进一步诱导芽再生，最终93%的供试外植体通过胚状体途径获得芽的再生。通过根癌农杆菌介导法将35S启动子驱动的逆境诱导转录因子DREB1A基因导入该品种。转化株在低温下的种子发芽率、扦插苗生长以及植株露地越冬生长状况等方面都明显优于对照。【结论】本研究成功地建立了地被菊花Fall Color体细胞胚再生途径，并成功地获得了具有越冬耐性的地被菊花转化株系。     

矮牵牛''''Tidal Wave''''品种受体再生体系的建立

文章对矮牵牛‘Tidal Wave’品种进行组织培养快速繁殖和再生的初步研究。以矮牵牛无菌苗叶片为外植体,在附加不同浓度激素的MS基本培养基上诱导培养,通过器官发生途径获得再生植株。在附加3.0mg.L-1BA,0.3mg.L-1NAA的培养基上获得90%以上芽的再生率。再生芽在附加0.02mg.L-1NAA,1.0mg.L-1KT,5.0mg.L-1GA3的培养基上发育良好;初期继代时适合的生根培养基为1/2MS附加0.1mg.L-1NAA,多次继代后适合的生根培养基为1/2MS。