加环引物LAMP法快速检测布鲁氏杆菌方法的研究

研究以布鲁氏杆菌保守的OMP25蛋白基因为靶基因,设计了6条LAMP特异性引物,同时探讨了加环引物对LAMP的影响,通过优化LAMP体系的反应条件,建立了一套快速检测布鲁氏杆菌的新方法。LAMP扩增产物可通过凝胶电泳和荧光显色进行判定。该研究比较了LAMP法和加环引物LAMP法的灵敏度,并检测了其引物特异性。试验结果显示,普通LAMP法的灵敏度为20CFU/mL,加环引物的LAMP法的灵敏度为2.0CFU/mL。通过两种方法的比较可知:LAMP法可以快速、直观、准确地检测布鲁氏杆菌,加环引物可进一步提高LAMP的扩增效率,是一种在基层现场有广泛应用前景的检测方法。     

牛奶中AFM1人工抗原的合成及多克隆抗体血清的制备

本研究合成并鉴定了黄曲霉毒素M1人工抗原,通过动物免疫制备出敏感性高、特异性好的鼠源黄曲霉毒素M1多克隆抗血清。采用琥珀酸酐改造黄曲霉毒素M1,并将其改造物按两种方法(DCC和EDC)分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)进行偶联,合成免疫抗原AFM1-BSA和检测抗原AFM1-OVA,经过薄层色谱、紫外扫描和凝胶电泳鉴定后,免疫BALB/c小鼠,共免疫3次,每次间隔3周,最后1次免疫10d后,断尾采血,制备多抗血清。经过测定,免疫的3只小鼠效价均达到了1:104以上,2号小鼠多抗血清的敏感性最好,半数抑制浓度IC50(50%inhibitive concentration,IC50)为37.61ng/m L,且具有良好的特异性。本研究成功合成了黄曲霉毒素M1人工抗原和多克隆抗体血清,为黄曲霉毒素M1单克隆抗体制备及其免疫学快速检测方法的建立奠定了基础。     

烟富3号苹果的性状表现及栽培技术要点

烟富3号苹果是山东省烟台地区选育出的优良着色系富士芽变品种,具有果个大、果形端正、着色好、着色快等优点.山东省东平县2008年由烟台引进试栽,经过6年的观察,其综合经济性状优于长富2号品种,发展前景良好.目前已在东平街道、大羊镇、梯门镇推广面积40hm2.通过采用起垄栽培、果园覆草、配方施肥、果实套袋、无公害农药应用、纺锤形整形修剪等配套技术,达到了高产、优质、高效的效果.现将其性状表现和栽培技术要点介绍如下.     

石斛兰杂交新品‘万泉宝石’

正近年来,石斛兰因较高的观赏价值吸引了兰花育种者的注意,观赏石斛兰的育种成为研究的重点和热点。观赏石斛兰‘万泉宝石’为‘水晶’(母本)与‘变异种03’(父本)杂交选育出来的盆栽新品种。2015年开始选育,2017年育成。‘万泉宝石’株高40.80cm,假球茎茎粗4.59cm。成熟株叶片数平均为10.6个,叶展幅(周径)26.73cm。叶片长度为11.85cm,宽度为3.37cm,厚度为1.60cm。叶片双面绿色,长披     

烟台海参产业发展与品牌建设探讨

<正>"烟台海参"多肽、氨基酸含量高,以其高营养价值且能够提高人体免疫力而深受北方人喜爱。山东烟台海参产业以科技促发展,严把质量关,拓展产业链,创新商业模式收获产业效益。在进一步推进产业发展和品牌建设方面,笔者提出提高养殖技术和加工工艺,加强品牌建设管理,提高品牌形象等建议。     

认识一种特殊型式的10 kV配电变压器

随着农村电网改造工程的全面竣工,S9-M,S11-M系列三相全密封式10 kV配电变压器已经在10 kV配电网络中得到了广泛应用.     

小农机在丘陵地区发展现状分析

<正>由于我市西北部山区丘陵多、经济发展滞后及分田到户形成单家独户的种植方式等原因,很多地方仍沿袭面朝黄土背朝天的手工劳作方式。在推广农业机械化过程中存在一定困难,农民还没有机会真正享受到农业机械带来的好处,因此,解决好贫     

深松技术推广与应用

<正>为提高农作物的产量,农民对化肥有些过度依赖。随着化肥投入的连年增加,加上农家肥施用量逐年减少,导致当地土地越种越薄,土壤有机质含量不断下降,由于连年翻耕灭茬作业,在耕     

基于网络药理学及分子对接技术研究黄芪调控仔猪肠道菌群失调性腹泻的作用

【目的】基于网络药理学及分子对接技术研究黄芪调控仔猪肠道菌群失调性腹泻的有效活性成分及其作用机制。【方法】从TCMSP数据库搜集黄芪中药化合物成分,并获取其潜在靶点。利用GeneCards和OMIM数据库搜集肠道菌群失调性腹泻(flora imbalance diarrhea)的作用靶点,将两者预测的潜在作用靶点进行映射,获得共同作用靶点。运用STRING数据库构建靶点蛋白-蛋白相互作用(PPI)关系,用Cytoscape_3.8.0软件对其网络进行拓扑分析,用DAVID数据库对共同作用靶点进行富集分析,用AutoDuck_4.2.6软件对其核心成分与核心靶点进行分子对接。【结果】黄芪含有11个调控仔猪肠道菌群失调性腹泻核心成分,其对应靶点基因65个,疾病靶点854个,交集靶点25个。PPI网络中显示肿瘤坏死因子(TNF)、转录因子AP-1(JUN)、半胱氨酸蛋白酶-3(CASP3)、白细胞介素-6(IL6)、NF-κB抑制剂α(NFKBIA)、IL1B、IL10、细胞肿瘤抗原p53(TP53)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARG)、C-C基序趋化因子2(CCL2)为关键靶点。GO功能和KEGG通路富集分析发现,黄芪有效成分主要通过美国锥虫病、炎症性肠病、阿米巴病、细胞因子-细胞因子受体相互作用、A型流感、疟疾、T细胞受体信号通路、沙门菌感染等信号通路参与转录调控、免疫反应、细胞对脂多糖的反应等生物过程。分子对接结果显示,槲皮素、山奈酚、芒柄花素等核心成分与TNF、IL1B等关键靶点结合紧密,亲和力较好。【结论】黄芪可能通过槲皮素、山奈酚、芒柄花素等主要活性成分作用于TNF、IL1B等靶点,通过参与美国锥虫病、炎症性肠病、疟疾、T细胞受体信号通路、沙门菌感染等信号通路进而治疗仔猪肠道菌群失调性腹泻。