夏黑葡萄的丰产栽培技术浅析

文章以安徽省葡萄种植为例进行分析,对当地夏黑葡萄的引种栽培进行分析,总结出适应当地气候条件的葡萄丰产栽培技术,对栽培架式、整形、修剪、调节剂、避雨棚、土肥管理、病虫害防治等深入分析。     

绵羊KAP11.1基因克隆、原核表达及皮肤毛囊表达研究

【目的】 对毛囊角蛋白关联蛋白11.1（keratin associated protein 11.1,KAP11.1）基因进行克隆及原核表达,并对KAP11.1基因在不同品种绵羊皮肤毛囊中表达量进行比较,探究KAP11.1基因在南疆地方绵羊品种间表达差异及其对羊毛品质的影响。【方法】 以平原型和田羊、山区型和田羊和卡拉库尔羊体侧皮肤毛囊为研究材料,以GenBank中绵羊KAP11.1基因序列（登录号：HQ595347.1）为参照设计引物,对KAP11.1基因进行PCR扩增,构建pMD19-T-KAP11.1克隆质粒,双酶切鉴定后构建pET-28a （+）-KAP11.1原核重组表达质粒,经PCR和双酶切鉴定后测序并进行序列分析,转化大肠杆菌BL21（DE3）感受态细胞中表达,采用SDS-PAGE和Western blotting检测;利用实时荧光定量PCR技术检测KAP11.1基因在不同绵羊皮肤毛囊中的表达情况。【结果】 3种绵羊KAP11.1基因CDS区序列为480 bp,编码159个氨基酸,为不稳定的疏水蛋白。相似性比对结果发现,与参照基因相比,2种类型和田羊基因序列相似性均为99.79％,均在423 bp处发生突变,由C变为T,卡拉库尔羊基因序列相似性为99.38％,其69 bp处G变为T、93 bp处C变为T、423 bp处C变为T。系统进化树分析发现,3种绵羊和山羊亲缘关系最近,和瘤牛亲缘关系最远。KAP11.1蛋白二级结构主要由无规则卷曲组成。试验成功构建了pET-28a （+）-KAP11.1原核重组表达质粒,并纯化得到19 ku的KAP11.1蛋白。KAP11.1基因在山区型和田羊和卡拉库尔羊皮肤毛囊中的表达量均显著高于平原型和田羊（P<0.05）,在山区型和田羊和卡拉库尔羊中差异不显著（P>0.05）。【结论】 克隆获得480 bp的绵羊KAP11.1基因CDS区序列,成功构建了pET-28a （+）-KAP11.1原核重组表达质粒,并获得19 ku的KAP11.1蛋白,且KAP11.1基因在3个品种绵羊皮肤毛囊中均有表达。     

新疆南部地方品种绵羊MSTN基因功能区的克隆及其蛋白二级结构和抗原表位的预测

为了确定新疆南部地方品种绵羊肌生成抑制素(MSTN)成熟蛋白的功能区及二级结构和B细胞抗原表位,根据GenBank中绵羊肌生成抑制素基因序列及其所编码蛋白质的序列,应用GenBank的Blast功能检索其蛋白的功能区,并设计引物克隆新疆南部地方品种绵羊MSTN功能区基因,进行序列测定.然后运用DNAStar软件和www...     

南疆不同品种绵羊MSTN基因克隆及其组织表达谱分析

本研究旨在对山区型和田羊、平原型和田羊、卡拉库尔羊的MSTN基因进行组织表达谱分析。参考GenBank上（登录号：NM_001009428.1）绵羊MSTN基因序列设计引物,采用RT-PCR技术克隆绵羊MSTN基因序列,进行组织表达谱分析。结果表明：MSTN基因在各品种绵羊不同组织中表达的差异较大,MSTN在各品种绵羊的肌肉、肾脏和脾脏中都有表达,其中肌肉中表达量最高,其次是肾脏和脾脏;MSTN在山区型、平原型和田羊的心脏中表达丰度较低,而在卡拉库尔羊心脏中则几乎无表达;MSTN在山区型、平原型和田羊的肝脏中几乎无表达,而在卡拉库尔羊肝脏中则有一定量表达;MSTN在山区型和田羊、平原型和田羊与卡拉库尔羊的肺脏中则都无表达。     

舍饲和田羊与卡拉库尔羊生长发育指标的测定

本研究旨在对新疆南部地方品种绵羊平原型和田羊、山区型和田羊及卡拉库尔羊的17种生长发育指标进行检测分析,了解农区舍饲条件下新疆南部地方品种绵羊的基本生长发育情况。主要进行了2个品种、品系绵羊断奶后7个多月期间的17项生长指标的检测,通过SPSS 17.0统计软件分析其各项指标的差异显著性。结果表明：6月龄时,平原型和田羊与山区型和田羊间体高、尻长存在差异显著性(P<0.05),而后胸宽、尾长、尾宽、尾厚的差异极显著(P<0.01);山区型和田羊与卡拉库尔羊间前胸宽、后胸宽存在差异显著性(P<0.05);平原型和田羊与卡拉库尔羊间体重、胸围存在差异显著性(P<0.05),且前胸宽、后胸宽、尾长、尾宽、尾厚的差异极显著(P<0.01)。所检测各项指标的平均月增长量,平原型和田羊与山区型和田羊间体高存在差异显著性(P<0.05),而山区型和田羊与卡拉库尔羊间体高差异极显著(P<0.01);山区型和田羊与卡拉库尔羊管围存在差异显著性（P<0.05）;平原型和田羊与卡拉库尔羊间尾厚存在差异显著性(P<0.05)。对于绵羊体重、体长、体高、胸围等生长发育规律的研究结果表明,平原型和田羊的生长发育与山区型和田羊以及卡拉库尔羊相比较在这些方面具有优势。     

不同农药对棉花同工酶的影响

采用聚丙烯酰胺凝胶（PAGE）电泳法研究了喷施农药对棉花植株同工酶谱的影响,分析了不同农药，不同棉花品种，施药后不同时间间隔，不同生育期棉株过氧化物酶（POD）同工酶谱的变化和差异，结果表明，喷施不同农药，不同棉花品种，不同生育期及施药后不同时间间隔均对棉株POD同工酶产生不同的影响。     

棉籽壳对卡拉库尔羊血液生化指标的影响

中国卡拉库尔羊(以下简称卡羊)是以苏联卡拉库尔羊为父本,以中国库车羊为母本,进行级进杂交培育而成的羔皮羊新品种,适应性稳定,耐干旱、炎热,繁殖成活率高,耐粗饲,羔皮品质优良,非常适合新疆南部荒漠、半荒漠草原与农区饲养,是南疆地区不可替代的绵羊当家品种,目前数量有13万余只.     

卡拉库尔羊血液生化指标常值测定

从大群卡拉库尔羊(以下简称卡羊)中选择公羊羔18只，自由采食中棉35号大陆棉棉壳饲料，利用半自动生化分析仪测定血液生化指标。结果表明：与绵羊临床正常生化指标相比，卡羊的总蛋白、碱性磷酸酶测定值偏高；白蛋白、低密度脂蛋白胆固醇、谷丙转氨酶测定值偏低；其它指标都在正常值范围内。     

平原型和田羊毛囊KAP4.2基因的克隆与原核表达

为了探索影响平原型和田羊羊毛品质的角蛋白关联蛋白(keratin association protein,KAP)4.2基因的结构与功能,试验以平原型和田羊毛囊总RNA反转录得到的cDNA为模板,经RT-PCR扩增KAP4.2基因成熟蛋白序列,与pMD18-T载体连接,经PCR扩增、双酶切鉴定连接正确后再与原核表达载体pET-28a连接,连接正确后对其测序并进行同源性分析及氨基酸分析。结果表明:平原型和田羊重组质粒pMD-18T-KAP4.2构建成功,表达质粒pET-28a-KAP4.2成功原核表达。在不同诱导时间KAP4.2基因表达蛋白的量明显不同,在诱导4小时时蛋白表达量最大;不同体积IPTG诱导后KAP4.2基因表达蛋白的量明显不同,体积为10μL时蛋白表达量最大。平原型和田羊毛囊KAP4.2基因序列与GenBank中美利奴羊(X05639.1)基因序列同源性为99.1%,显示有3处发生突变,分别为第77位的T突变为C,第108位的G突变为T,第200位的C突变为T。平原型和田羊KAP4.2蛋白基因第26位氨基酸由亮氨酸突变为脯氨酸,第67位氨基酸由脯氨酸突变为亮氨酸。说明平原型和田羊毛囊KAP4.2基因序列与GenBank中美利奴羊基因序列同源性较高,虽然高度保守,但存在碱基突变和氨基的变异。     

肌生成抑制素基因研究进展

肌生成抑制素是 1 997年发现的骨骼肌生长发育负调控因子 ,肌生成抑制素不仅在骨骼肌中表达 ,还可在心肌和浦肯野纤维等多种组织中表达。研究表明 ,大鼠骨骼肌在体内的再生 ,对 MSTN m RNA的表达表现出明显的时间依赖性 ,并且 m RNA的表达不必由功能性神经支配。通过对不同品种双肌表型牛 MSTN基因的研究 ,发现其骨胳肌增大的共同特点是肌生成抑制素基因发生了突变 ,如布鲁牛 MSTN基因在编码区外显子 3发生 1 1 bp的缺失 ,导致MSTN此位点后的阅读框架改变 ,并在此点后的 1 4个密码子处终止了阅读框架 ,从而使MSTN被截短 ,MSTN蛋白活性区域消失 ,活性丧失 ,结果肌肉大量增加。目前 ,已分别对人、牛和猪的 MSTN基因进行了定位研究 ,猪肌生成抑制素基因定位研究表明 ,猪 MSTN基因位于1 5号染色体上。