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运用生物信息学手段分析pep1基因结构,并根据GenBank中玉米瘤黑粉菌pep1 DNA序列设计引物,从玉米瘤黑粉菌SG200的基因组中扩增得到了pep1基因全长,构建了pET–28a–pep1重组表达质粒,选用大肠埃希菌BL21(DE3)作为宿主菌,以1 mmol/L IPTG诱导表达。SDS–PAGE检测结果表明,诱导表达产物大小与理论值(20 800)一致,说明pET–28a–pep1能够在大肠埃希菌BL21(DE3)中高效表达。 相似文献
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药剂处理对瓜尔豆种子低温萌发和活力的影响 总被引:2,自引:0,他引:2
用不同的药剂分别在20℃、15℃条件下浸泡瓜尔豆种子24h,放入15℃的发芽箱中发芽。结果表明:400ml/kg乙烯利、10mg/kgAMP、20mg/kg6-BAl5℃浸种显著或极显著的提高种子活力,促使种子低温萌发;而20℃浸种时对种子萌发没有显著影响。0.1%水杨酸钠在15℃条件下能显著提高种子的发芽率,较长时间的维持种子活力。0.1%甲醛处理完全杀死种子。20mg/kgIAA20℃浸种、30mg/kg2,4-D15℃浸种抑制种子的萌发。200ml/kgCCC、500mg/kgGA3、0.1mol/LKNO3、25ml/kg肌醇15℃或20℃浸种效果均不明显。 相似文献
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为避免现有的多片段质粒构建技术的弊端,提高多片段质粒构建效率,以构建树干毕赤酵母Agglutinin-like基因的敲除载体为例,利用酿酒酵母活体细胞重组系统,一次性将多个外源DNA片段和线性化质粒重组,形成环状质粒。通过引物设计在相互连接的DNA片段之间引入50bp重叠序列,用PCR扩增DNA片段后,与线性化质粒一起转化酿酒酵母,再用PCR和测序等方法鉴定阳性酵母菌落中质粒的正确性。通过本方法构建的多片段质粒正确率高、耗时短。 相似文献
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花椒根腐病病原鉴定和生物学特性研究* 总被引:6,自引:1,他引:6
对云南省昭通市永善县黄华镇花椒根腐病的病原物进行鉴定并研究其生物学特性。结果表明,引起花椒根腐病的病原菌是茄形镰刀菌[Fusarium solani(Mart.)Sacc],病菌的菌丝生长温度范围为5~40℃,最适温度为25~30℃,pH值范围为3~10,最适宜的pH值为5~7;分生孢子在相对湿度为90%以下不能生长,在相对湿度为100%(水滴)中才能很好的萌发;光照对其菌丝生长影响较小;60℃ 10 min为病原菌的致死温度;较适宜的碳氮源为蔗糖、乳糖和NaNO3,(NH4)2SO4。 相似文献
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【目的】研究建立由乙醇和(NH_4)_2SO_4形成的双水相体系萃取灯盏花中灯盏花乙素。【方法】用HPLC法对灯盏花乙素含量进行测定,并对影响双水相体系的成相和灯盏花乙素萃取率的条件进行优化。【结果】灯盏花粗提液经过双水相体系萃取之后,能有效减低大分子物质和极性分子的干扰。乙醇体积为1.5 mL、(NH_4)_2SO_4质量分数为25%、pH为6.0时,双水相体系对灯盏花乙素的萃取率达到94.2%。【结论】对灯盏花样品进行的检测和加标回收实验表明,该方法准确性较高,结果可靠,操作简单,绿色无污染。 相似文献
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三个萝卜主产区软腐病病原菌的分离与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
为有效防治萝卜(Raphanus sativus L.)软腐病,提高萝卜产量和质量,从江苏徐州、浙江萧山和湖北利川3个萝卜主产区分别采集萝卜软腐病病样并进行病原菌的分离鉴定及致病力测定。通过结合菌落形态、生理生化指标测定和16S r DNA基因序列分析,确定3株病原菌属于胡萝卜果胶杆菌(Pectobacterium carotovorum)的2个亚种,其中2株为Pectobacterium carotovorum subsp.brasiliense,另1株为Pectobacterium carotovorum subsp.carotovorum。致病力测定分析表明,3株病原菌的致病力存在显著差异,随温度的升高均呈现出增强的趋势。 相似文献
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为了寻找有效提取杏鲍菇(Pleurotus eryngii Quel)菌丝胞外酶的方法,为杏鲍菇等食用菌胞外酶的活性研究和生长规律提供试验依据,研究通过p H 4.8的柠檬酸缓冲液、去离子水2种处理方式提取杏鲍菇菌丝胞外酶,并通过测定8种胞外酶酶活来对这2种方式进行比较分析。结果表明,2种提取方式对杏鲍菇菌丝胞外酶的酶活有差异,其中,酸性纤维素酶和果胶酶经酸处理酶活是水处理的2倍多;木聚糖酶和木质素降解相关酶类经酸处理的酶活也高于水处理,但淀粉酶和蛋白酶经酸处理酶活低于水处理。 相似文献
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以毕赤酵母CBS 6054(Scheffersomyces stipitis)为试验菌株,用葡萄糖和半乳糖2种六碳糖,木糖和阿拉伯糖2种五碳糖分别作为惟一碳源进行发酵试验,测定毕赤酵母在不同培养基中的生长曲线、糖消耗情况、产物乙醇生成情况,由此研究该菌株发酵不同单糖的能力以及对应的产乙醇的潜力。结果表明该菌株对葡萄糖和木糖的发酵能力较强,且两者发酵情况相当;发酵半乳糖的能力居中;发酵阿拉伯糖的能力较弱。乙醇产量从高到低依次是葡萄糖、木糖、半乳糖、阿拉伯糖。 相似文献