用卡片PCR法检测卡耶他环孢子虫

使用FTA卡片法提取卡耶他环孢子虫DNA,利用特异性引物组F1E/R2B、CC719/CRP999进行巢式PCR,得到1条298bp的特异条带。并以柔嫩艾美尔球虫、贝氏隐孢子虫等作为对照,结果显示,除卡耶他环孢子虫外,均无特异性条带。用卡耶他环孢子虫卵囊进行巢式PCR敏感性试验,结果显示敏感度最高达1.0×100个/mL。     

柔嫩艾美耳球虫含HD结构域蛋白特性和功能初步研究

鸡球虫病是由艾美耳球虫引起的一种危害严重的肠道寄生虫病,每年都会给世界各地的养禽业带来巨大的经济损失。目前,该病主要依靠抗球虫药物进行防治,但由于药物的长期及不合理使用导致鸡球虫几乎对所有使用过的抗球虫药均产生耐药性。为研究球虫耐药性产生的分子机制,本实验室前期对柔嫩艾美耳球虫地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株以及敏感株进行了转录组测序并获得了敏感株与耐药株的差异表达基因,发现柔嫩艾美耳球虫含HD域蛋白（EtHDCP）在耐药株中上调表达。本研究以柔嫩艾美耳球虫敏感株孢子化卵囊cDNA第一链为模板,成功克隆出EtHDCP基因,构建了原核表达重组质粒pGEX-4T-EtHDCP,并成功诱导表达了重组蛋白rEtHDCP。利用qRT-PCR和Western blot对柔嫩艾美耳球虫敏感株不同发育阶段的转录和翻译水平进行分析,结果显示,EtHDCP在第二代裂殖子的转录和翻译水平高于其他三个阶段（未孢子化卵囊、孢子化卵囊和子孢子）。同时利用Western blot分析了EtHDCP在柔嫩艾美耳球虫敏感株、地克珠利耐药株、马杜拉霉素耐药株中的翻译水平,结果显示,EtHDCP在耐药株中的蛋白翻译水平显著高于敏感株。间接免疫荧光定位结果显示,该蛋白主要定位在子孢子和裂殖子的表面以及裂殖子的胞质内。入侵抑制试验表明,抗rEtHDCP多克隆抗体可有效抑制子孢子对宿主细胞的入侵。这些结果说明该蛋白可能参与了虫体在宿主细胞内的生长发育、耐药性的产生以及子孢子入侵宿主细胞的过程。     

巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫早熟株对8种抗球虫药的敏感试验

为检测巨型艾美耳球虫和柔嫩艾美耳球虫早熟株对常用抗球虫药的敏感性,选用地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星、盐霉素和拉沙洛西等8种抗球虫药进行鸡体试验,通过抗球虫活性百分比（percent of optimum anticoccidial aetivity,POAA）、病变记分减少率（reduction of lesion scores,RLS）、相对卵囊产量（relative oocyst production,ROP）和抗球虫指数（anticoccidial index,ACI）4项指标进行综合评价。结果表明,巨型艾美耳球虫早熟株对8种药物敏感;柔嫩艾美耳球虫早熟株对盐霉素轻度敏感,对地克珠利、氯苯胍、二硝托胺、癸氧喹酯、尼卡巴嗪、马杜米星和拉沙洛西敏感。本研究结果可为对球虫早熟株疫苗的开发与应用提供实验依据。     

上海市奶牛隐孢子虫感染现状调查

隐孢子虫病（Crytosporidiosis）是由隐孢子虫（Crytospridum spp）引起的一种全球性的人兽共患原虫病。主要症状为腹泻，一旦食物或水源遭到隐孢子虫卵囊污染即可经口传染给人和动物。该病正日益受到国内外广大学者关注，其原因是作为一种水源性疾病，它能引起免疫缺陷或免疫抑制者致死性腹泻，且迄今没有特效治疗药物。隐孢子虫对家畜的危害尤以对反刍动物牛的危害最大，     

复方Closantel驱除绵羊体内外寄生虫的试验

应用中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所研制的新型高效、低毒、广谱驱虫药——复方 Closantel片剂,对严重感染体内外寄生虫的绵羊50只,分组后分别从5mg·kg~(-1)、10mg·kg~(-1)、20mg·kg~(-1)的剂量给绵羊一次口服;同时用虫克星口服作药物对照.结果表明:驱除绵羊体内外寄生虫的有效剂量为5mg·kg~(-1)、有效率为100%,对消化道线虫、肝片吸虫和前后盘吸虫的虫卵减少率分别是为47.40%和37.50%;     

崇明县奶牛寄生虫病调查和驱虫效果观察

崇明县位于长江入海处，是我国的第三大岛。由于土质肥沃、气候温暖潮湿，且水网丰富，水草丰盛，是我市奶牛和山羊的饲养基地。崇明地区由于工业污染较少，待别是当地政府采取了一系列措施，崇明将成为国家的绿色食品基地。目前崇明县共有奶牛1万余头，山羊17万头，其生产的优     

柔嫩艾美耳球虫泛素蛋白功能初步研究

泛素是真核生物中普遍存在的一种小分子蛋白,广泛参与细胞内蛋白质的平衡代谢过程,对维持细胞内环境的稳态具有重要作用.为研究泛素在柔嫩艾美耳球虫中的功能,本研究利用PCR方法克隆了柔嫩艾美耳球虫泛素(EtUb)基因,将其亚克隆至原核表达载体pET28a(+),转入大肠杆菌BL21,诱导表达制备rEtUb蛋白,用纯化的重组蛋...     

抗球佳、克球灵防治鸡柔嫩艾美耳球虫笼饲试验

鸡球虫病是一种对养禽业危害极为严重的全球性寄生虫病,每年都给养禽业造成巨大的经济损失.为了防治此病,广大科研工作者在过去的几十年间做了大量的研究工作,取得了巨大的成绩.目前球虫病主要依靠药物预防和免疫预防,在免疫预防还未能取得突破性效果的今天,药物仍是防治鸡球虫病的可靠方法.然而,由于药物产生耐药性或其他原因造成药物低效,至今球虫病仍然经常发生.在研制新药远远跟不上实际需要的情况下,如何合理使用现有抗球虫药,延长药物使用周期,是目前需要探索的问题,通过两种或两种以上药物联合使用仍是目前值得探索的一个方法.基于上述目的,我们进行了本次试验.     

亚洲象肝片吸虫病的免疫诊断和治疗

在国内首次用斑点免疫金渗滤法（Dot-immunogold filtration assay,DIGFA)对亚洲象的肝片吸虫病进行了免疫诊断，并采用10%肝蛭净进行治疗，获得成功。试验结果表明，斑点免疫金渗滤法诊断大象肝片吸虫病是一种敏感、快速、简便和实用的方法。