牛基因组DNA两种提取方法的比较研究

研究哺乳动物基因组DNA的水煮抽提法，并将传统的酚仿抽提法和水煮法进行比较，水煮法即通过对细胞的煮沸和冷却，使细胞破裂、蛋白变性，从而获得用于PCR扩增的模板DNA的方法。通过电泳分析和PCR扩增检测了所提取基因组DNA的完整性、可行性。检测时采用3对引物对2种方法提取的DNA进行了PCR扩增，同时对冷冻保存的基因组DNA也进行了扩增检测。结果表明：水煮法提取基因组DNA是一种快速、简便、经济、高效的方法。     

影响荷斯坦奶牛产犊间隔的因素及其研究进展

产犊间隔（calving internal,CI）又称胎间距,即两次产犊间的时间间隔,能够综合反映奶牛发情、配种、妊娠和产犊等繁殖性能,是衡量奶牛繁殖性能的一个重要指标,同时也是影响奶牛产奶量和产犊数量的重要因素,对奶牛养殖经济效益具有直接影响。最新研究显示,适宜产犊间隔与牛群泌乳能力相关,泌乳能力越高,适宜产犊间隔应越长。但是,即使中国规模化牛场产奶量已经有了大幅提升,中国大多数牧场还在追求更短的产犊间隔。为此,作者对影响荷斯坦奶牛产犊间隔的因素及其研究进展进行概述,并简要阐述了产犊间隔对牛场经济效益的影响,以期为中国荷斯坦奶牛养殖确定适宜产犊间隔提供一定的借鉴和理论依据。     

哺乳动物胚胎分割技术研究进展

胚胎分割是指将哺乳动物的胚胎采用手术或非手术的方法从子宫或输卵管中取出，人为的利用机械或化学方法将其分割成2个或多个部分，分割后的每个部分在适宜的条件下进行体外培养、移植回受体子宫或输卵管（或不经过培养直接移植），可从1枚胚胎获得2个或多个基因型和表型一致的后代。胚胎分割技术可用于扩增可用的优良胚胎的数目和生产同卵双胎、同卵多胎的克隆动物，可用于濒危动物的保护，也可为早期胚胎遗传疾病的检查和性别鉴定等技术提供一种活体组织检查的方法。作者将介绍胚胎分割的研究进展、技术方法及其相关问题。     

牛活体采集卵母细胞的超声波技术

牛活体采集卵母细胞的超声波技术朱化彬罗应荣（中国农业科学院畜牧研究所北京１０００９４）通过超数排卵技术虽然可以得到比自然发情状态下多的胚胎,但是超数排卵效果很不稳定。近十几年来,卵母细胞体外成熟（ＩＶＭ）,体外受精（ＩＶＦ）以及受精后胚胎的体外培养（...     

热滞蛋白在低温冷冻保存卵母细胞和胚胎中的作用

近来一些短期或长期保存卵母细胞和胚胎的研究结果表明，热滞蛋白或称抗冻蛋白，在低温和超低温下，能与细胞膜相互作用，保护卵母细胞和胚胎，热滞蛋白的这种保护作用与其浓度和种类有关，在玻璃化快速冷冻中，所需ＴＨＰｓ的最低浓度为４０ｍｇ／ｍｌ，而在慢速冷冻或低温短期保存（１－４天）胚胎中，其适宜浓度范围为０．１－１ｍｇ／ｍｌ，所需浓度取决于ＴＨＰｓ的咎类。ＴＨＰｓ与玻璃化液相互作用，稳定玻璃化液；同时也与细     

O-GlcNAc修饰水平变化对牛卵母细胞体外成熟的影响

旨在探究O-β-N-乙酰葡糖胺(O-linked beta-N-acetylglucosamine, O-GlcNAc)修饰水平变化对牛卵母细胞体外成熟的影响。本研究以牛卵母细胞为研究对象,检测O-GlcNAc转移酶(O-GlcNAc transferase, OGT)、O-GlcNAc糖苷酶(O-GlcNAcase, OGA)及O-GlcNAc蛋白在牛体外成熟卵母细胞中的分布;将卵丘-卵母细胞复合体分别在添加4 mmol·L^-1 OGT抑制剂BADGP和100μmol·L^-1 OGA抑制剂PUGNAc的体外成熟液中进行体外成熟,将未添加组作为对照组,分别统计各组卵母细胞第一极体排出率和体外受精胚胎发育率,并采用荧光定量PCR和Western blot检测O-GlcNAc蛋白、OGT、OGA、GFAT和TXNIP的mRNA和蛋白表达。结果表明,OGT和O-GlcNAc蛋白共定位于牛体外成熟卵母细胞的细胞质和细胞核中,而OGA和O-GlcNAc蛋白共定位于体外成熟卵母细胞的细胞质中,且相对集中在卵母细胞的皮质区。与对照组相比,BADGP处理组和...     

鲁西黄牛体细胞克隆保种技术的研究

以体外培养的鲁西黄牛耳皮肤成纤维细胞作核供体，研究利用体细胞克隆技术保存我国地方黄牛优良品种的技术方法。通过组织块培养法建立的鲁西黄牛（1♂，4♀）成纤维细胞系，作为核移植供体细胞，利用屠宰场母牛卵巢卵母细胞经体外培养成熟后作为核受体进行核移植，试验结果表明：重构胚的融合率为62．5％（242／387），分裂率为63．6％（154／242），体外培养第7天囊胚发育率为42．9％（66／154）。体外培养第7天的囊胚的内细胞团细胞（ICM）与滋养层细胞数平均为37和47，ICM占44．2％。体外发育到7d的囊胚新鲜胚胎的移植妊娠率（新鲜胚胎）移植受体10头，60d妊娠率为20％（2／10）。     

哺乳动物性别控制的原理与方法

在畜牧生产中许多性状受到性别因素的制约,如:只有母奶牛才能产奶;要实现一个优良品种的迅速扩繁,必须有足够数量的基础母畜;而公犊的生长速度快、体型大、屠宰率高,所以在肉用品种生产中更希望有更多的公犊。就生产成本来讲,非育种用公犊是奶牛生产的副产品,如能实现性别控制,使动物生产与人类意愿相一致性别的后代,则可以避免非育种用公犊的出生,在妊娠母牛和犊牛的管理上可节约近一半的费用,这在奶牛生产中是一笔可观的费用。由此可见,性别控制技术对于我国现有生产条件不变而奶制品和肉制品需求迅速增加的现状来说,更意味着生产资料的高…