拟南芥MDH2基因GFP载体构建及转基因植株的筛选鉴定

[目的]以野生型拟南芥为材料构建MDH2基因GFP载体及GFP转基因植株,研究MDH2基因在植物响应镉胁迫机制中的功能。[方法]通过提取野生型拟南芥的RNA,反转录成为cDNA,并以cDNA为模板,利用PCR扩增MDH2基因,将扩增所获得MDH2基因和pXB94-GFP质粒双酶切后连接,并转化进大肠杆菌感受态细胞中,鉴定正确后再转入农杆菌感受态细胞中,通过菌落PCR鉴定出阳性单菌落。再通过浸花法转入野生型拟南芥中,最后利用抗性筛选和PCR鉴定获得MDH2转基因阳性植株。[结果]成功克隆MDH2基因,并构建了MDH2-GFP重组质粒,抗性筛选获得了MDH2-GFP转基因植株。[结论]成功获得MDH2-GFP转基因植株,为进一步研究该基因在植物响应镉胁迫机制中的功能奠定了基础。     

高产与具有超高产潜力水稻品种光合功能衰退的比较

张荣铣等人的很多研究表明 ,与产量成正相关不是整个光合功能期而是光合速率的高值期。 97- 7曾被国际水稻所选为培育超级稻的株系 ,但未获成功。从株型上看 ,97- 7是一个具有超高产潜力的品系 :叶片宽而长、厚度大、叶绿素含量较高 ,叶直立、受光条件好 ,剑叶叶面积达 78ｃｍ2     

水稻剑叶叶源量及其与产量性状关系的研究

对10个水稻品种剑叶叶源量及其与产量性状的关系进行了研究，结果表明，水稻剑叶叶源量与单株产量，单穗重及每穗实粒数均呈极显正相关，通径分析进一步说明，光合功能期对叶源量的直接效应最大，其次为瞬时光合速率，叶面积的效 最小，结果还表明，剑叶叶源量在水稻品种间存在极显差异，说明利用这种遗传差异通过育种手段选育源量大的品种是可行的，品种内叶源量存在一定程度的变异，其变异系数为6．19－17．34％，表明可以通过栽培措施调节叶源量。     

水稻种质资源光合速率及光合功能期的研究

 对230份水稻种质资源进行了光合速率及光合功能期测定，结果显示水稻种质资源的光合速率及光合功能期的品种内变异系数分别集中在2.0%～11.0％和3.5%～9.5％，而其品种间变异系数分别为11.1%和11.2%。统计分析表明，水稻品种间光合速率和光合功能期存在极显著差异，但籼、粳亚种间差异不显著。进一步分析籼粳亚种间品种分布，发现籼稻光合速率偏高者居多，而粳稻光合功能期偏长者居多，且其变异幅度大于籼稻。根据聚类结果，42个水稻品种可分别划分为光合速率高、中、低类和光合功能期长、中、短类3个类群。对供试水稻种质资源光合速率及光合功能期进行二维排序并将坐标分成4个象限。籼稻和粳稻分别在象限Ⅱ和I的分布频率最大，分别为33.4％和33.3％。从4个象限中选出一些具有特异光合性状的典型材料，如协优9308、轮回422、武育粳8号、NPT、汕优129等，可用于优化水稻杂交配组及光合遗传改良研究。     

拟南芥CDR6基因过表达载体构建及过量表达植株筛选鉴定

[目的]以拟南芥为材料克隆CDR6基因,构建CDR6基因的过量表达载体并筛选鉴定获得过表达植株.[方法]提取拟南芥mR-NA,反转录成cDNA,并以此为模板克隆CDR6基因CDS全长,通过限制性内切酶切割、T4 DNA连接酶连接,将CDR6基因CDS全长连接到带有35S强启动子的pXB094载体上;然后转化至Trans1-T1感受态细胞中,菌落PCR鉴定阳性单克隆并测序确认.将重组质粒转化至根瘤农杆菌GV3101菌株,通过浸花法侵染拟南芥野生型植株,通过抗性筛选和鉴定获得预期的转基因植株.[结果]菌落PCR鉴定和测序结果表明CDR6基因已成功构建至pXB094载体;通过抗性筛选并鉴定获得了过量表达阳性植株.[结论]筛选和鉴定获得的过量表达植株为研究CDR6基因的分子功能奠定了基础.     

用水稻苗期叶绿素含量相对稳定期估算水稻剑叶光合功能期的方法研究

 用SPAD-502型叶绿素计测定了8个水稻品种不同叶位连体与离体叶片叶绿素含量的变化，结果表明叶片全展后（或离体后）叶绿素含量变化可明显划分为相对稳定期和速降期两个阶段。离体与连体叶片、不同叶位叶片间的叶绿素含量相对稳定期均呈极显著线性回归关系。进一步测定其他34个品种幼苗期离体第6叶和连体剑叶叶绿素含量相对稳定期并进行若干方程曲线拟合表明，用多项式表示两者之间关系的相关系数最大（r＝0.9619,P< 0.01）。用该拟合方程对另外10个品种剑叶的光合功能期估算并与实测值之间进行相关分析表明，估算值与叶绿素含量相对稳定期和光合速率高值持续期的实测值均达极显著水平，其相关系数分别为0.9948和0.9913(P < 0.01)。进一步证实了上述关系的存在。     

低浓度CO_2诱导对小麦光合功能的影响

 以普通栽培小麦为材料 ,分析了低浓度 CO2 (15 0～ 180 μl/ L)处理下叶片光合性能的变化。结果表明 ,处理2 4h内碳同化速率明显增加 ,与之同步增加的还有碳酸酐酶 (carbonic anhydrase,CA)活性和叶肉导度。加入放线菌酮可以抑制 CA活性和光合放氧速率的增加 ,表明这一过程中涉及到了蛋白质合成量的增加 ,CA的专一性抑制剂 -AZA处理也起到了同样的作用 ,说明 CA活性的上升是光合速率增加的主要原因。最后还讨论了这种低浓度 CO2 诱导效应与下部叶片光合速率以及高产之间的关系。     

不同类型水稻品种叶源量及有关光合生理指标的研究

 就不同类型水稻品种的叶源量及有关光合生理指标进行了研究。超高产育种重穗型品种叶源量高于高产育种穗粒兼顾型品种和矮化育种多穗型品种,主茎剑叶的叶源量与单株产量呈极显著正相关,相关系数为0.8729**（P < 0.01）;光合速率叶位差、叶龄差和时间差以超高产育种重穗型品种最小,矮化育种多穗型品种最大。叶位差和叶龄差分别与成熟期单株干重及千粒重呈极显著负相关,相关系数分别为－0.9810**和－0.9341**（P<0.01）,时间差和光抑制有关。水稻品种抽穗期光合速率及其叶龄差、叶位差和时间差可作为高光效育种的生理指标     

不同产量潜力水稻品种的剑叶光合特性研究

以粳稻品种武育粳３号以及具有高产潜力的９５１６为材料,研究了不同产量潜力的两个水稻品种剑叶的光合特性差异。结果表明,在剑叶一生中,两者的净光合速率、叶绿素含量、ＲｕＢＰＣａｓｅ总活性和初始活性、光合全链（ｚ链）电子传递活性的变化趋势一致。９５１６的衰退速度慢于武育粳３号,且具有较长的光合速率高值持续期、叶绿素含量相对稳定期和较高的叶源量,其绝对值分别较武育粳３号高２．５ｄ,４．５ｄ和１２．３６％。     

植物凝集素MNB1基因启动子表达载体的构建及鉴定分析

近年来植物受逆境胁迫的影响日益严峻，而逆境胁迫是造成现代农作物减产的重要因素之一。MNB1基因是拟南芥中与甘露糖高度特异性结合的植物凝集素，具有多种生物学功能，对植物的生长发育及逆境胁迫的应答有着至关重要的调控作用。以拟南芥为试验材料，利用聚合酶链式反应（polymerase chain reaction, PCR）技术成功构建了ProMNB1:GUS植物表达载体，结合浸花法，成功将ProMNB1:GUS载体转化到拟南芥中，最终通过PCR鉴定分析获得ProMNB1:GUS阳性植株，为研究逆境胁迫下MNB1基因的功能及其转录水平的变化提供了重要的依据。